Resultado da pesquisa (51)

Termo utilizado na pesquisa immunohistochemical

#1 - Clinical, pathological and immunohistochemical characterization of spontaneous neoplasms in pet rodents in Northeastern Brazil

Abstract in English:

In the last decade, there has been a significant increase in the demand for small rodents such as hamsters, guinea pigs, rats, and mice to be kept as pets. Consequently, the veterinary care provided to these animals has also increased. The aim of this study was to describe gross, histopathological and immunohistochemical findings of 26 spontaneous neoplasms diagnosed in 25 pet rodents in Northeastern Brazil. A retrospective study was carried out from 2014 to 2022 in two veterinary diagnostic laboratories to identify cases of tumoriform lesions in these species. Hamsters represented the most frequent species in this study (60%, 15/25), followed by rats (28%, 7/25), guinea pigs (8%, 2/25), and mice (4%, 1/25), with a mean age of 17.63 months. The anatomical regions of the face/head and thoracic region were the most affected. The most affected tissues were the skin/subcutaneous/mucosal (65%, 15/26) and mammary gland (23%, 6/26). Eighteen different types of neoplasms were diagnosed, and T-cell lymphomas and mammary adenocarcinomas were the most diagnosed tumors, each corresponding to 12% (3/26) of the cases. Leiomyosarcoma, myxosarcoma and mammary adenocarcinoma metastases were also noted. Immunohistochemistry was essential for the diagnosis of certain malignant mesenchymal and round-cell neoplasms. Pet rodent neoplasms in Northeastern Brazil are common, especially in hamsters, and immunohistochemistry can be a useful tool for the definitive diagnosis of these tumors.

Abstract in Portuguese:

In the last decade, there has been a significant increase in the demand for small rodents such as hamsters, guinea pigs, rats, and mice to be kept as pets. Consequently, the veterinary care provided to these animals has also increased. The aim of this study was to describe gross, histopathological and immunohistochemical findings of 26 spontaneous neoplasms diagnosed in 25 pet rodents in Northeastern Brazil. A retrospective study was carried out from 2014 to 2022 in two veterinary diagnostic laboratories to identify cases of tumoriform lesions in these species. Hamsters represented the most frequent species in this study (60%, 15/25), followed by rats (28%, 7/25), guinea pigs (8%, 2/25), and mice (4%, 1/25), with a mean age of 17.63 months. The anatomical regions of the face/head and thoracic region were the most affected. The most affected tissues were the skin/subcutaneous/mucosal (65%, 15/26) and mammary gland (23%, 6/26). Eighteen different types of neoplasms were diagnosed, and T-cell lymphomas and mammary adenocarcinomas were the most diagnosed tumors, each corresponding to 12% (3/26) of the cases. Leiomyosarcoma, myxosarcoma and mammary adenocarcinoma metastases were also noted. Immunohistochemistry was essential for the diagnosis of certain malignant mesenchymal and round-cell neoplasms. Pet rodent neoplasms in Northeastern Brazil are common, especially in hamsters, and immunohistochemistry can be a useful tool for the definitive diagnosis of these tumors.


#2 - Serum and immunohistochemical analyses of troponin I in sheep experimentally poisoned with Palicourea marcgravii

Abstract in English:

Palicourea marcgravii is a lethal toxic plant widely distributed in Brazil. Ingestion of this plant causes cardiotoxic effects in animals, leading to acute heart failure without evident macroscopic changes in the heart due to the rapid progression of the disease. Currently, the diagnosis is confirmed based on microscopic identification of characteristic renal lesions. Although troponin is used as a biomarker for myocardial lesions in human and veterinary medicine, its serum levels in sheep poisoned with P. marcgravii remain unknown. The objective of this study was to determine serum levels of troponin I and evaluate its expression in incipient heart lesions in sheep. Eight male sheep were experimentally intoxicated with 1g kg-1 of fresh P. marcgravii plants. The animals were physically examined every two hours, and blood samples were collected before the administration of the plant material and during the agonizing period immediately before death. Additionally, necropsy and immunohistochemistry were performed on cardiac tissue samples. All animals presented minimal serum levels of troponin I before plant administration, with a significant increase in these levels immediately before death, indicating leakage due to the cardiac injury. These results confirm the hypothesis that troponin is released into the bloodstream before morphological changes in the myocardium can be observed through conventional microscopy and immunohistochemical testing. These findings contribute to understanding the pathological mechanisms of this toxicity and may assist in the early diagnosis and treatment of affected animals.

Abstract in Portuguese:

Palicourea marcgravii é uma planta tóxica letal e amplamente disseminada no Brasil. Sua ingestão causa efeitos cardiotóxicos em animais, levando à insuficiência cardíaca aguda sem alterações macroscópicas evidentes no coração devido à rápida progressão da doença. A confirmação do diagnóstico atual se baseia na identificação microscópica das lesões renais características. Embora a troponina seja usada como biomarcador de lesões miocárdicas na medicina humana e veterinária, seus níveis séricos em ovinos intoxicados por P. marcgravii ainda são desconhecidos. O objetivo deste estudo foi determinar os níveis séricos de troponina I e avaliar sua expressão em lesões incipientes no coração de ovinos. Oito ovinos machos foram experimentalmente intoxicados com 1g/kg da planta fresca. Os animais foram avaliados fisicamente a cada duas horas, e tiveram seu sangue coletado antes da administração da planta e durante a fase agônica, antes do óbito. Além disso, foram realizadas necropsia e imunohistoquímica em fragmentos cardíacos. Todos os animais apresentaram níveis mínimos de troponina antes da administração da planta, e mostraram aumento expressivo imediatamente antes do óbito, indicando extravasamento devido à lesão cardíaca. Esses resultados confirmam a hipótese de que a troponina é liberada na corrente sanguínea antes das alterações morfológicas no miocárdio serem observadas pela microscopia convencional e imunohistoquímica. Esses achados contribuem para a compreensão dos mecanismos patológicos dessa intoxicação e podem auxiliar no diagnóstico precoce e tratamento em animais afetados.


#3 - Immunohistochemical analysis of ORF2 protein and ORF3 protein of hepatitis E virus in livers of swine in Mato Grosso state, Brazil

Abstract in English:

Hepatitis E is an emerging zoonotic disease caused by hepatitis E virus (HEV). Immunohistochemistry (IHC) can be used to verify viral presence in human and swine livers. The aim of this study was to comparatively analyze the immunolabeling of the ORF2 protein (pORF2) versus the ORF3 protein (pORF3) of HEV in swine livers from subsistence farms in the state of Mato Grosso, Brazil. This study included 25 liver samples formalin fixed paraffin embedded tissue block from a published molecular detection and immunohistochemistry (IHC) study, which used the HEV pORF3 protein, demonstrating 4% (1/25) of positive immunolabeling and 96% (24/25) negative, in contrast to the molecular exam that showed 24% (6/25) of liver samples positive and 76% (19/25) negative. In order to increase the sensitivity of the IHC technique, these samples were analyzed using the antibody for the detection of HEV pORF2, showing 24% (6/25) immunolabeling positive and 76% (19/25) negative, equivalent to the result of molecular analysis on corresponding samples. Thus, the use of antibody to pORF2 increased the number of HEV cases detectable in the IHC by 600%. The IHC added to molecular techniques can be used as a tool for monitoring viral presence in swine livers, constituting a sensitive diagnostic methodology when liver samples fixed in formalin and embedded in paraffin are available.

Abstract in Portuguese:

A hepatite E é uma enfermidade emergente de caráter zoonótico causada pelo Vírus da Hepatite E (HEV). A imuno-histoquímica (IHQ) pode ser utilizada para verificar a presença viral em fígados de humanos e suínos. O objetivo deste estudo foi analisar comparativamente a imunomarcação da proteína ORF2 (pORF2) versus proteína ORF3 (pORF3) de HEV em fígados de suínos de criatórios de subsistência no estado de Mato Grosso, Brasil. Este trabalho incluiu 25 amostras de fígados de suínos fixados em formol e embebidos em parafina provenientes de um estudo publicado de detecção molecular e imuno-histoquímica (IHQ), que utilizou pORF3 de HEV, demonstrando 4% (1/25) de imunomarcação positiva e 96% (24/25) negativa, em contraste com o exame molecular que apresentou 24% (6/25) das amostras de fígado positivas e 76% (19/25) negativas. Com o objetivo de aumentar a sensibilidade da técnica de IHQ, essas amostras foram analisadas utilizando o anticorpo para detecção da pORF2 de HEV, apresentando 24% (6/25) de imunomarcação positiva e 76% (19/25) negativa, equivalente ao resultado da análise molecular em amostras correspondentes. Desta forma, o uso do anticorpo para pORF2 ampliou o número de casos de HEV detectáveis na IHQ em 600%. A IHQ somada a técnica molecular pode ser utilizada como ferramenta de monitoramento da presença viral em fígados de suínos, constituindo uma metodologia diagnóstica sensível quando há disponibilidade de amostras de fígado fixadas em formol e embebidas em parafina.


#4 - Pathological, microbiological and immunohistochemical characterization of avian colibacillosis in broiler chickens of Mozambique

Abstract in English:

Avian colibacillosis is an acute and globally occurring infectious disease of domestic and wild birds caused by Escherichia coli, and it is associated with considerable economic losses mainly due to the morbidity and mortality associated. The present study aimed to describe the pathological, bacteriological and immunohistochemical aspects of avian colibacillosis in broiler chickens of Mozambique. Forty-nine broiler chicken presented anorexia, decreased weight gain, ataxia, diarrhea, dyspnea, and death in a clinical course of 3-5 days. The birds were raised in five farms (small, medium and large farms) with manual and automatic breeding system, with flocks ranging from 100 to 20,000 birds. At the necropsy, all birds had poor body condition, and the pericardium and the Glisson’s capsule of all avian exhibited different degrees of adherence often associated with severe fibrin deposition. The thoracic and abdominal air sacs were thickened and adhered to the costal wall. Mild, moderate or marked hepatomegaly associated with white pinpoint multifocal areas (100%, 49/49) and mild to moderate splenomegaly in 75.5% (37/49) with a mottled surface were observed. The lungs and kidney were enlarged and reddish. Histologically, a multiorgan fibrinoheterophilic polyserositis was observed in 75.5% of the cases (37/49), which were characterized by inflammatory infiltrates composed mainly of degenerative heterophils, macrophages and plasma cells, associated with fibrin deposits and intermixed by coccobacillary bacterial basophilic aggregates. These affected mainly the pericardium (28.6%, 14/49), the pleura (18.4%, 9/49), the Glisson’s capsule (10.2%, 5/49), the ventriculus (10.2, 5/33), and the proventriculus (8.2%, 4/49) serosa. Multifocal to coalescing areas of coagulative necrosis associated with similar inflammatory cells were observed mainly in the spleen (28.6%, 14/49), liver (24.5%, 12/49), and intestines (22.4%, 11/49). A similar infiltrate was also observed affecting the the lungs (16.3%, 8/49), the kidney (16.3%, 8/49) and the myocardium (14.3%, 7/49). Isolation and identification of E. coli was obtained in 12 cases through bacterial culture. Some organs (2 cases of each farms) were selected and submitted to immunohistochemistry anti-E. coli, and a positive stain was observed in all tested cases in liver (3/3), heart (4/4), spleen (1/1), lungs (4/4), intestines (4/4), bursa of Fabricius (1/1), ventriculus (1/1), and proventriculus (1/1) tissue sections. These results demonstrate that E. coli was the cause of mortality in these birds. Therefore, biosecurity and management measures should be employed to prevent and control the disease occurrence in Mozambique’s poultry farming.

Abstract in Portuguese:

A colibacilose aviária é uma doença aguda de ocorrência mundial que acomete aves domésticas e silvestres, causada por Escherichia coli e resulta em perdas econômicas consideráveis devido à elevada morbidade e mortalidade das aves. O presente estudo teve o objetivo de descrever os aspectos patológicos, bacteriológicos e imuno-histoquímicos de colibacilose aviária em frangos de corte de Moçambique. Um total de 49 frangos de corte apresentaram anorexia, baixo ganho de peso, ataxia, diarreia, dispneia e morte em um curso clínico de 3 a 5 dias. As aves eram provenientes de 5 granjas (pequenas, média e grandes), com sistema de criação manual e automático, com rebanhos que variavam de 100 a 20.000 aves. À necropsia, todas as aves exibiam condição corporal ruim a caquética, além de pericárdio e cápsula de Glisson de todas aves (100%; n=49) com diferentes graus de aderência e deposição de fibrina de forma difusa acentuada. Os sacos aéreos torácicos e abdominais estavam espessados e aderidos à parede costal. Foi observado ainda hepatomegalia discreta, moderada a severa frequentemente associada com áreas multifocais puntiformes brancacentas (100%; 49/49), e esplenomegalia discreta a moderada, associado a áreas multifocais moteadas (75,5%; 37/49). Os pulmões e rins estavam aumentados e com coloração avermelhada. Histologicamente, observou-se majoritariamente serosite fibrinoheterofílica em 75,5% dos casos (37/49), caracterizadas por infiltrado inflamatório composto por heterófilos degenerados, macrófagos, linfócitos e plasmócitos, com deposição de fibrina entremeada por uma miríade de estruturas bacterianas cocobacilares. Esta lesão foi observada principalmente em pericárdio (28,6%; 14/49), pleura (18,4%; 9/49), cápsula de Glisson (10,2%; 5/49), ventrículo (10,2; 5/33) e em proventrículo (8,2%; 4/49). Áreas multifocais a coalescentes de necrose de coagulação associada a infiltrado inflamatório semelhante ao descrito foi observado principalmente no baço (28,6%; 14/49), fígado (24.5%; 12/49), e intestinos (8,2%; 4/49). Um infiltrado inflamatório semelhante também foi visualizado em pulmões (16,3%; 8/49), rins (16,3%; 8/49) e miocárdio (14,3%; 7/49), Colônias puras de E. coli foram identificadas e isoladas em 12 casos. Alguns órgãos (2 de cada granja) foram submetidos ao exame imuno-histoquímico anti-E. coli e marcação positiva foi visualizada em todos casos testados, como em fígado (3/3), coração (4/4), baço (1/1), pulmão (4/4), intestinos (4/4), bursa de Fabricius (1/1), rim (1/1), ventrículo (1/1) e proventrículo (1/1). Estes resultados demonstram que E. coli foi a causa de morte destas aves. Sendo assim, a adoção de boas medidas de biosseguridade e de manejo são indispensáveis para a prevenção e controle da ocorrência da doença nas granjas de frango de corte de Moçambique.


#5 - Histomorphometric and immunohistochemical evaluation of the frontal cerebral cortex in diabetic rats after treatment with melatonin

Abstract in English:

The central nervous system is vulnerable to complications caused by diabetes. These complications lead to increased oxidative stress in the brain, resulting in damage to the cerebral cortex, among other regions. Insulin and hypoglycemic agents are still the most widely used treatments. However, current research with an experimental model of diabetes suggests the use of antioxidants, such as melatonin. Thus, we tested the hypothesis that exogenous melatonin may decrease or prevent the effects of diabetes in the frontal cortex of the rat brain. Fifty albino rats were allocated into five groups: GC = rats without diabetes induction, GD = diabetic rats induced by streptozotocin, GDM = streptozotocin-induced and melatonin-treated diabetic rats, GDI = diabetic rats induced by streptozotocin and treated with insulin, GDMI = diabetic rats induced by streptozotocin and treated with melatonin and insulin simultaneously. Diabetes was induced by intraperitoneal administration of streptozotocin (60mg/kg). Insulin (5U/day) was administered subcutaneously and melatonin (10mg/kg) by drinking water; both treatments last days after. We analyzed animals’ weight, the cytokines IL-6 and TNF-α, apoptosis, glycogen, and did morphometry and histopathology of the frontal cortex were analyzed. The results showed that the cerebral cortex of the diabetic animals presented axonal degeneration, reduced number of neurons in the cortex, reduced glycogen, increased IL-6 and TNF-α expression, high apoptotic index, and reduced animal weight and the brain. Treatment with melatonin associated or not with insulin prevented such effects. Thus, we conclude that melatonin associated with insulin may be an alternative for avoiding the impact of diabetes in the brain’s frontal cortex.

Abstract in Portuguese:

O sistema nervoso central é vulnerável a complicações originadas pelo diabetes estresse oxidativo no cérebro e resultando em lesões no córtex cerebral, dentre outras regiões. A insulina e hipoglicemiantes ainda são os tratamentos mais utilizados, entretanto, pesquisas atuais com modelo experimental do diabetes sugerem a utilização de antioxidantes como, por exemplo, a melatonina. Assim, testamos a hipótese de que a melatonina exógena pode diminuir ou prevenir os efeitos do diabetes no córtex frontal do cérebro de ratos. Foram utilizados 50 ratos albinos, divididos em 5 grupos: GC = ratos sem indução ao diabetes, GD = ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina, GDM = ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina e tratados com melatonina, GDI = ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina e tratados com insulina, GDMI = ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina e tratados com melatonina e insulina simultaneamente. O diabetes foi induzido pela administração intraperitoneal de estreptozotocina (60mg/kg). A insulina (5U/dia) foi administrada por via subcutânea e a melatonina (10mg/kg) pela água de beber. Ambos tratamentos foram realizados durante 30 dias após a indução. Foram analisados o peso dos animais, do cerebro, as citocinas IL-6 e TNF-α, apoptose, glicogênio, além da morfometria e histopatologia do córtex frontal. Os resultados mostraram que o córtex cerebral dos animais diabéticos apresentou degeneração axonal, redução do número de neurônios no córtex, redução do glicogênio, aumento da expressão do IL-6 e TNF-α, elevação do índice apoptótico, além da redução do peso dos animais e do cérebro. O tratamento com melatonina associada ou não a insulina preveniu tais efeitos. Assim, concluímos que a melatonina associada ou não a insulina pode ser uma alternativa na prevenção dos efeitos do diabetes no córtex frontal do cérebro.


#6 - Clinical-pathological and immunohistochemical evaluations of cardiac lesions in cats with chronic kidney disease

Abstract in English:

Chronic kidney disease (CKD) is characterized by irreversible morphostructural lesions that can progressively evolve to chronic renal insufficiency and kidney failure. It is known that the heart and kidneys are closely related, and that communication between these organs occurs through a variety of pathways; subtle physiological changes in one of them are compensated by the other. Histopathological cardiac evaluation through routine staining presents a limitation to identify specific or discreet lesions in the cardiomyocytes. This study aimed to evaluate serum troponin levels in cats with CKD, associated with clinical and pathological findings, as well as to correlate the morphostructural cardiac lesions to determine their distribution through macroscopic and histological assessments and anti-cardiac troponin C (cTnC) immunohistochemistry (IHC). To this end, 20 cats (18 diagnosed with CKD and two controls) were selected. Anti-human cTnC IHC was conducted after necropsy and separation in eight regions of each collected heart. Heart fragments from two cats without CKD were used as controls. The anti-human cTnC antibody is useful in detecting cardiac lesions and has shown decreased expression in cardiomyocytes of cats with CKD. Serum troponin was above the reference values in 11/18 (61.11%) animals and decreased expression for the cTnC antibody was observed in individual cardiomyocytes in 9/18 (50%) animals. It was verified that the number of regions with decreased expression for the cTnC antibody in cardiomyocytes is significantly correlated with serum troponin. The anti-human cTnC antibody has been found effective in detecting cardiac lesions and has shown decreased expression in the cardiomyocytes of cats with CKD. Correlation was observed between increased serum cTnI and loss of immunoreactivity at anti-cTnC antibody IHC in cats with CKD, which proves damage to cardiomyocytes secondary to kidney disease.

Abstract in Portuguese:

A doença renal crônica (DRC) é caracterizada por lesões morfoestruturais irreversíveis, que podem evoluir progressivamente para insuficiência renal crônica e falência renal. Sabe-se que o coração e os rins mantêm estreita relação e a comunicação entre esses órgãos ocorre por uma variedade de vias; alterações fisiológicas sutis em um desses órgãos são compensadas pelo outro. A avaliação histopatológica cardíaca mediante a colorações rotineiras são limitadas para identificar lesões específicas ou discretas em cardiomiócitos. O presente trabalho teve como objetivos avaliar os níveis séricos de troponina em gatos com DRC, associados aos achados clínico-patológicos, bem como correlacionar as lesões cardíacas morfoestruturais, a fim de determinar a distribuição destas, por meio da avaliação macroscópica, histológica e imuno-histoquímica com anti-cTnC. Neste estudo foram selecionados 20 gatos (18 diagnosticados com DRC e 2 animais controle). Para a aplicação da técnica de imuno-histoquímica anti-troponina C humana, necropsias foram realizadas e cada coração coletado separadamente em 8 regiões. Fragmentos do coração de 2 gatos sem lesão cardíaca foram utilizados como controle. O anticorpo anti-TnC humano é útil na detecção de lesões cardíacas e apresentou expressão diminuída em cardiomiócitos de gatos com DRC. Em 11/18 animais (61,11%) a troponina sérica encontrava-se acima dos valores de referência e foram observadas diminuição da expressão para anticorpo-cTnC em cardiomiócitos individuais em 9/18 (50%). Notou-se que o número de regiões com diminuição da expressão para anticorpo-cTnC em cardiomiócitos está significativamente correlacionado com a troponina sérica. O anticorpo anti-TnC humano se mostrou eficaz para detectar lesões cardíacas e demonstrou diminuição da expressão nos cardiomiócitos de gatos com DRC. Houve correlação entre o aumento da CTnI sérica e perda da imunorretividade na avaliação imuno-histoquímica com anticorpo anti-TnC em gatos com DRC o que comprova danos em cardiomiócitos secundários a doença renal.


#7 - Pathological and immunohistochemical aspects of primary hepatobiliary neoplasms in cats

Abstract in English:

Primary hepatobiliary neoplasms (PHN) are uncommon in cats, and originate in hepatocytes, intra- and extrahepatic bile ducts, mesenchymal cells, and cells of neuroendocrine origin. The aim of this study was to determine the frequency of PHN in cats diagnosed in the metropolitan region of Porto Alegre (RS), Brazil, for a period of 17 years, determining their epidemiological, anatomopathological and immunohistochemical aspects. Necropsy reports of 2.090 cats were analyzed, 125 were diagnosed with primary hepatobiliary diseases, of which 15 were cases of PHN, representing 12% of the specific hepatobiliary conditions and 0.7% of the necropsies. All PHN were malignant, of which 93.3% had epithelial origin and 6.7% presented mesenchymal origin. Cholangiocarcinoma was the most commonly diagnosed neoplasm, followed by hepatocellular carcinoma and hemangiosarcoma. In general, cats with no defined breed were the most affected. Concerning sex, 60% were females and 40% males. Age ranged from five to 18 years, with a mean age of 10.5 years (median of ten years). Grossly, cholangiocarcinoma and hemangiosarcoma were multinodular and hepatocellular carcinoma was massive. Microscopically, cholangiocarcinomas were arranged in acini and ducts, whereas hepatocellular carcinomas were arranged in solid sheets or trabeculae. On immunohistochemistry, cholangiocarcinomas, hepatocellular carcinomas, and hemangiosarcomas were positive for the antibodies CK 7, Hep Par-1, and vimentin and von Willebrand factor, respectively.

Abstract in Portuguese:

Neoplasias hepatobiliares primárias (NHP) são incomuns em gatos e se originam de hepatócitos, células dos ductos biliares intra e extra-hepáticos, células mesenquimais e ainda células de origem neuroendócrina. O objetivo do trabalho foi determinar a frequência das NHP em gatos diagnosticados na Região Metropolitana de Porto Alegre, no período de 17 anos, abordando seus aspectos epidemiológicos, anatomopatológicos e imuno-histoquímicos (IHQ). Foram analisados os laudos de necropsia de 2.090 gatos sendo que 125 foram diagnosticados com doenças hepatobiliares primárias, destes 15 foram casos de NHP, representando 12% das condições hepatobiliares específicas e 0,7% do total de necropsias. Todos os diagnósticos de NHP eram malignos, destes 93,3% apresentaram origem epitelial e 6,7% mesenquimal. Colangiocarcinoma foi a neoplasia mais diagnosticada, seguido do carcinoma hepatocelular e hemangiossarcoma. De uma maneira geral, os gatos sem raça definida foram os mais acometidos. Em relação ao sexo 60% eram fêmeas e 40% machos. A idade variou de cinco a 18 anos, com a idade média de 10,5 anos (mediana de 10 anos). Macroscopicamente o colangiocarcinoma e hemangiossarcoma eram multinodulares, e o carcinoma hepatocelular, maciço. À histologia, houve predomínio do arranjo acinar e ductal nos colangiocarcinomas e sólido, no carcinoma hepatocelular. Na IHQ os colangiocarcinomas foram reativos para CK 7, carcinoma hepatocelular para Hep Par-1 e hemangiossarcoma para vimentina e fator de von Willebrand.


#8 - Clinical-epidemiological, anatomic-pathological, histochemical and immunohistochemical characterization of renal cystadenocarcinoma-nodular dermatofibrosis syndrome in 11 German Shepherd dogs

Abstract in English:

Eleven cases of renal cystadenoma/cystadenocarcinoma-nodular dermatofibrosis syndrome (RCND) are described in German Shepherd dogs diagnosed from January 1994 to January 2018 at the Veterinary Pathology Laboratory of the “Universidade Federal de Santa Maria” (LPV-UFSM). The study sample was composed of eight male and three female dogs at a ratio of 2.67:1. Age ranged from six to 12 years (mean=8.7 years). The main clinical signs reported in descending order of frequency were multiple cutaneous nodules (nodular dermatofibrosis), dyspnea, anorexia, weight loss, recurrent hematuria, vomiting, and polydipsia. Results demonstrated that it is not always easy to clinically recognize this syndrome, but its peculiar anatomical-pathological characteristics allow safe diagnosis. Histologically, it was possible to detect all phases (cysts, papillary intratubular hyperplasia, and cystadenomas or cystadenocarcinomas) of a possible pathological continuum of the renal lesions. Uterine leiomyomas were observed in only one of the cases. Through histochemical techniques, it was possible to identify the presence of type I collagen in both cutaneous and renal lesions and consider its possible involvement in the pathogenesis of renal cystadenocarcinoma. Immunohistochemistry (IHC) showed partially satisfactory results in the staining of epithelial cells of renal cysts and neoplasms for pan-cytokeratin.

Abstract in Portuguese:

São descritos 11 casos da síndrome cistadenoma/cistadenocarcinoma-dermatofibrose nodular (CR-DN) em cães Pastor Alemão, diagnosticados entre janeiro de 1994 e janeiro de 2018 no Laboratório de Patologia Veterinária da Universidade Federal de Santa Maria (LPV-UFSM). Os cães afetados foram oito machos e três fêmeas, estabelecendo-se uma relação de 2,67:1. A idade variou de seis a 12 anos, sendo a média de idade de 8,7 anos. Os principais sinais clínicos relatados foram, em ordem decrescente de frequência, múltiplos nódulos cutâneos (dermatofibrose nodular), dispneia, anorexia, emagrecimento, hematúria recorrente, vômito e polidipsia. Este estudo permitiu estabelecer que o reconhecimento clínico da síndrome nem sempre é fácil, porém suas características anátomo-patológicas peculiares permitem um diagnóstico com segurança. Histologicamente, foi possível detectar todas as fases (cistos, hiperplasia intratubular papilífera, cistadenomas ou cistadenocarcinomas) de um possível continuum patológico das lesões renais. Leiomiomas uterinos foram observados somente em um caso. Através das técnicas histoquímicas foi possível estabelecer que o colágeno tipo I está presente em ambas as lesões, cutâneas e renais, e cogitar seu possível envolvimento na patogênese dos cistadenocarcinomas renais. A técnica de IHQ mostrou resultados parcialmente satisfatórios na imunomarcação das células epiteliais dos cistos e dos neoplasmas renais para pancitoceratina.


#9 - Feline lymphoma in the nervous system: pathological, immunohistochemical, and etiological aspects in 16 cats

Abstract in English:

The pathological, immunohistochemical (IHC), and etiological features of lymphoma involving the nervous system (NS) in cats were analyzed through a retrospective study (2004-2017) in Rio Grande do Sul State, Brazil. The NS involvement was observed in 16 (12.2%) of 125 felines with lymphoma. Young cats were mainly affected, with a median of 24 months old. Most cases were secondary central NS lymphoma, whereas in three cats, the NS involvement was primary. IHC revealed 14 (87.5%) FeLV-positive, six FIV-positive, and one FeLV/FIV-negative cats. Distribution of feline lymphoma in the NS was 8/16 in the spinal cord, 7/16 in the brain, and 1/16 in the paravertebral nerves and ganglia (neurolymphomatosis). The lymphoma pattern in the spinal cord was exclusively extradural, often focal (6/8), and located in the lumbar (3/6), sacral (1/6), thoracic (1/6), and cervical segments (1/6). Brain neuroanatomical patterns were: leptomeningeal lymphomatosis (4/7), lymphomatous choroiditis (2/7), and intradural lymphoma (1/7). The feline with primary neurolymphomatosis presented a marked thickening of paravertebral nerves and ganglia from the sacral region. B-cell lymphoma (75%) was often diagnosed, and diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) (11/16) was the main subtype. T-cell lymphoma (25%) was less commonly observed and was classified as peripheral T-cell lymphoma (PTCL) (3/16) and T-cell lymphoblastic lymphoma (T-LBL) (1/16).

Abstract in Portuguese:

Os aspectos patológicos, imuno-histoquímicos (IHQ) e etiológicos do linfoma envolvendo o sistema nervoso de felinos foram analisados através de um estudo retrospectivo (período de 2004-2017) no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil. O envolvimento do sistema nervoso foi observado em 16 (12,2%) dos 125 felinos com linfoma desse estudo e afetou principalmente, jovens com idade mediana de 24 meses. A grande maioria dos casos o linfoma era secundário no sistema nervoso central e somente em três gatos o linfoma foi primário do sistema nervoso. Na IHQ, 14 (87,5%) casos foram positivos para FeLV, seis (37,5%) para FIV, e um foi negativo para ambos. A distribuição do linfoma no sistema nervoso foi em 8/16 felinos na medula espinhal, 7/16 no encéfalo e em 1/16 em nervos e gânglios paravertebrais (neurolinfomatose). Na medula espinhal, o padrão do linfoma foi exclusivamente extradural e frequentemente focal (6/8), localizadas nos segmentos lombares (3/6), sacrais (1/6), torácicos (1/6) e cervicais (1/6). No encéfalo, os padrões neuroanatômicos observados foram: linfomatose leptomeningeal (4/7), coroidite linfomatosa (2/7), linfoma intradural (1/7). No felino diagnosticado com neurolinfomatose primária, foi observado acentuado espessamento dos nervos e gânglios paravertebrais da região sacral. Os linfomas de células de células B (75%) foram os mais frequentes e o principal tipo foi o linfoma difuso de grandes células B (11/16). Os linfomas de células T (25%), menos observados, foram classificados como linfomas de células T periférico inespecífico (3/16) e linfoma linfoblástico T (1/16).


#10 - Use of different fixation times and application of two immunohistochemical methods for detection of KIT and Ki67 proteins in canine cutaneous mast cell tumors

Abstract in English:

Due to the high prevalence of mast cell tumors (MCTs) in the diagnostic routine, several factors, especially prognostic, have been sought to determine the biological behavior of these neoplasms. Immunohistochemistry (IHC) is one of the main tools utilized to biologically differentiate more aggressive tumors from less aggressive ones. However, some immunostainings are influenced by formalin fixation, interfering with the results. This is both a retrospective and prospective study of MCTs diagnosed in laboratory routine. A total of 25 samples, without knowledge about fixation time, were analyzed in the retrospective study, whereas 12 samples, with known fixation times, were assessed in the prospective study. Two histologic grading systems (Patnaik and Kiupel), special staining of toluidine blue, and IHC for KIT and Ki67 proteins were applied in both studies. Additionally, two amplification systems (biotinylated and non-biotinylated) for Ki67 protein and counting of the argyrophilic nucleolar organizing regions (AgNOR method) were tested in the prospective study. In the retrospective study, greater agreement between the evaluating pathologists was observed when the Kiupel system was used. IHC staining for KIT protein was effective in both studies, regardless of fixation time. IHC staining for Ki67 protein was highly sensitive to formaldehyde, and staining failure was observed in 56% of the cases in the retrospective study. In the prospective study, samples fixed for longer than 24 hours showed a reduction in the number of stained cells (altering the determination of the cell growth fraction) or showed absence of IHC staining in both amplification systems. The use of the AgNOR method to evaluate the rate of cell proliferation may be an alternative when the fixation time of the neoplasm is unknown or longer than 24 hours.

Abstract in Portuguese:

Devido a alta prevalência dos mastocitomas cutâneos caninos (MCCs) na rotina diagnóstica, vários fatores, especialmente fatores prognósticos, têm sido buscados para auxiliar na determinação do comportamento biológico desse neoplasma. A imuno-histoquímica é uma das principais ferramentas empregadas para diferenciar tumores biologicamente mais agressivos de tumores menos agressivos. Entretanto, algumas imunomarcações sofrem influência pela fixação em formol, interferindo nos resultados. Este estudo compreendeu avaliar através de uma etapa retrospectiva e uma etapa prospectiva casos de MCCs diagnosticados na rotina laboratorial. Um total de 25 amostras, sem conhecimento do tempo de fixação, foi analisado no estudo retrospectivo e 12 amostras, com tempos de fixação conhecidos, no estudo prospectivo. Foram aplicados nos dois estudos, dois sistemas de graduação histológica (Patnaik e Kiupel), a coloração especial de azul de toluidina e a imuno-histoquímica para as proteínas KIT e Ki67. Adicionalmente, no estudo prospectivo, foram testados dois sistemas de amplificação (biotinilado e não biotinilado) para a proteína Ki67 e a técnica de AgNOR (contagem das regiões organizadoras nucleolares argirofílicas). Na etapa retrospectiva, observou-se uma maior concordância entre os patologistas avaliadores quando o sistema Kiupel foi utilizado. A imunomarcação para KIT se manteve eficaz em ambos os estudos, independentemente do tempo de fixação. A imunomarcação para o Ki67 mostrou-se altamente sensível ao tempo de fixação em formol, sendo observada falha na imunomarcação em 56% dos casos do estudo retrospectivo. No estudo prospectivo, constatou-se que amostras fixadas por mais de 24 horas em formol apresentaram redução na quantidade de células imunomarcadas (alterando a determinação da fração de crescimento celular) ou apresentaram ausência de imunomarcação em ambos os sistemas de amplificação. A utilização do método AgNOR, para avaliar a taxa de proliferação celular, pode ser uma alternativa quando o tempo de fixação do neoplasma for desconhecido ou superior a 24 horas.


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