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NO ABSTRACT
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SEM RESUMO
Abstract in English:
ABSTRACT.- Roehe P.M., Silva T.C., Nardi N.B., Oliveira L.G. & Rosa J.C.A. 1997. [Monoclonal antibody differentiation between bovine herpesviruses type 1 and 5.] Diferenciação entre os vírus da rinotraqueíte infecciosa bovina (BHV-1) e herpesvírus da encefalite bovina (BHV-5) com anticorpos monoclonais. Pesquisa Veterinária Brasileira 17(1):41-44. Centro de Pesquisas Veterinárias Desidério Finamor, Caixa Postal 2076, Porto Alegre, RS 90001-970, Brazil.
Bovine Herpesviruses (BHV) type 1 (BHV-1) and type 5 (BHV-5) were analysed by immunoperoxidase staining with a panei of monoclonal antibodies (Mabs) prepared against BHV antigens. One of the Mabs recognized ali BHV isolates tested. The remainder four mabs recognized only BHV-1 samples, including standard laboratory strains. Ali isolates associated with clinical cases of encephalitis (BHV-5) displayed a pattern of reactivity distinct from that of viruses isolated from syndromes associated with BHV-1 infections. The results obtained indicate that such Mabs allowed the differentiation between BHV-1 and BHV-5, with a perfect correlation between the clinical pictures and the patterns of reactivity in vitro.
Abstract in Portuguese:
SINOPSE.- Roehe P.M., Silva T.C., Nardi N.B., Oliveira L.G. & Rosa J.C.A. 1997. [Monoclonal antibody differentiation between bovine herpesviruses type 1 and 5.] Diferenciação entre os vírus da rinotraqueíte infecciosa bovina (BHV-1) e herpesvírus da encefalite bovina (BHV-5) com anticorpos monoclonais. Pesquisa Veterinária Brasileira 17(1):41-44. Centro de Pesquisas Veterinárias Desidério Finamor, Caixa Postal 2076, Porto Alegre, RS 90001-970, Brazil.
Amostras de herpesvírus bovinos (BHV) tipo 1 (Virus da Rinotraqueíte Infecciosa BovinaNulvovaginite Pustular Infecciosa; BHV-1) e tipo 5 (Herpesvírus da Encefalite Bovina; BHV-5) tiveram seu perfil de reatividade analisado em testes de imunoperoxidase frente a um painel composto por cinco anticorpos monoclonais (AcM) produzidos contra antígenos de BHV-1. Um dos AcM reconheceu todas as amostras de BHV examinadas. Os quatro AcM restantes reconheceram somente amostras de BHV-1. Todas as amostras isoladas de casos de encefalites (BHV-5) apresentaram um padrão de reação distinto daquelas isoladas de outros síndromes associados à infecção pelo BHV-1. Os resultados obtidos indicam que os AcM avaliados permitem a diferenciação entre amostras de BHV-1 e BHV-5, havendo perfeita correlação entre os quadros clínicos observados com os perfis de reatividade obtidos in vitro.
Abstract in English:
From 115 cattle herds 15 (13.04%) were infected by Tritrichomonas foetus. From 85 bulls 25 (29.07%) were positive for the infection: 12 bulls were treated with the topic use of 1% tripaflavina, anel to the other 13 animals oral doses of 15g/100kg of 30% dimetridazole were administered. Post-treatment examination revealed that both groups of bulls were then free of infection. The results showed that the two treatments were equally efficient.
Abstract in Portuguese:
De 115 rebanhos bovinos, quinze (13,04%) estavam contaminados com Tritrichomonas Joetus. Dos 85 reprodutores examinados pela técnica da microscopia direta do lavado prepucial, 25 (29,07%) estavam infectados: estes animais foram afastados da reprodução e submetidos ao tratamento. Um grupo foi medicado com tripaflavina a 1 % (uso tópico), o outro com dimetridazole a 30%, na dose de 15g/100kg ("per os"). Conseguiu-se a recuperação de todos os touros tratados, comprovado pela realização de três lavados prepuciais consecutivos pós-tratamento e pelos resultados negativos e retorno destes reprodutores à monta natural. A duração entre o início do tratamento e a recuperação do touro infectado levou de 45 a 115 dias. Foi demonstrado pelo teste estatístico do qui-quadrado ao nível de 5%, haver diferença não significativa entre os dois métodos de tratamento.
Abstract in English:
The evolution of colostral antibodies to bovine leukemia virus (BLV) was examined by testing serum samples of female calves collected from birth to 270 days of age. To observe the levels of BLV-specific antibodies in dams in the peri-natal period, sérum samples were collected between days 35 pre-partum and days 28 post-partum. The presence of antibodies was examined by agar gel immunodiffusion tests (AGID). One week after ingestion of colostrum 100% (49/49) of the heifers gave positive results for BLV antibodies. The number of antibodiy-positive heifers decreased progressively until animais became sem-negative by day 180 of age. From the 41 sem-positive dams tested during the peri-natal period, three (7.3%) became sem-negative at that time. These data suggest that serologic diagnostic of BLV infectious with AGID should be performed after the 6th month of age in calves in order to avoid false-positive results due to passively acquired maternal antibodies. Moreover, serologic diagnosis in pregnant cows between 2 weeks pre and 4 weeks "post-partum" may give rise to false-negative results.
Abstract in Portuguese:
A presença de anticorpos colostrais contra o vírus da leucose bovina (BLV), foi examinada através de análise de amostras de soro de terneiras coletadas desde o nascimento até 270 dias de idade. Também foram coletadas amostras de soro de vacas entre 35 dias antes do parto até 28 dias após o parto. As amostras foram examinadas pelo teste de imunodifusão em gel de ágar (IDGA). Uma semana após a ingestão de colostro, 100% (49/49) das terneiras apresentaram anticorpos para o BLV. Posteriormente, houve uma queda progressiva do número de animais soropositivos, com o desaparecimento de níveis detectáveis de anticorpos até que todas as terneiras se tornassem soronegativas aos 180 dias de idade. De 41 vacas analisadas durante o período peri-parto, 3 (7,3%) apresentaram- se sorologicamente negativas neste período. Nas terneiras, os testes deverão ser realizados após o 6 mês de idade a fim de evitar resultados falso-positivos devido a anticorpos maternos passivamente adquiridos. Sugere-se também que para diagnóstico de infecções pelo BLV, a prova de IDGA seja realizada, nas vacas prenhes, somente até duas semanas antes do parto ou após 1 mês do parto.
Abstract in English:
The purpose of this study was to evaluate the competitive enzyme immunoassay used for the serological diagnosis of bovine brucellosis, comparing the results obtained using a conjugate prepared with monoclonal antibody and a conjugate prepared with policlonal sera. The results were also compareci with those obtained by a microtechnique of complement fixation. Two hundred and seventy-three sera from herds with a history of brucellosis, 205 sera from herds free of brucellosis and without vaccination with Brucella abortus strain 19 and 122 sera from herds without history of infection or vaccination were tested. Among sera from infected herds, the complement fixation test revealed antibody titres in 28.51%, the enzyme immunoassay using monoclonal conjugate in 39.19% and the enzyme immunoassay using policlonal conjugate revealed antibody titres in 37.0% of the sera. The agreement between complement fixation and the enzyme immunoassay using policlonal conjugate was 94.38% and the agreement between both of the enzyme immunoassays was 97.89%. Among the sera from vaccinated herds, the agreement between the complement fixation test and the enzyme immunoassay using policlonal conjugate was 69.39%, and the agreement between the enzyme immunoassays was 90.73%. The complement fixation test did not reveal any antibody titre in 67.86% of the sera from vaccinated herds, the enzyme immunoassay using policlonal conjugate did not reveal titres in 51.22% and the enzyme immunoassay with monoclonal conjugate did not reveal antibody titres in 41.95% of the sera from vaccinated herds. All the 122 sera from herds without infection or vaccination were negative to the three serological tests.
Abstract in Portuguese:
O objetivo do trabalho foi avaliar o comportamento do teste imunoenzimático competitivo quando aplicado ao diagnóstico sorológico da brucelose bovina, comparando-se o desempenho do teste ao usar um conjugado preparado com anticorpos monoclonais e um conjugado preparado com soro policlonal. Os resultados foram também comparados com aqueles obtidos através de uma microtécnica de fixação de complemento. Foram examinados 273 soros provenientes de rebanhos com histórico de brucelose, 205 soros provenientes de rebanhos sem problemas de infecção e que adotam a vacinação das bezerras com Brucella abortus amostra B 19 e 122 soros de bovinos procedentes de rebanhos sem histórico de brucelose e que não adotam a vacinação. Nos soros de rebanhos com histórico de infecção, a reação de fixação de complemento revelou títulos de anticorpos em 28, 51%, o teste imunoenzimático com o conjugado monoclonal revelou títulos em 39,19% e o teste imunoenzimático com o conjugado policlonal revelou títulos em 37,0% dos soros examinados, observando-se uma concordância de 94,38% entre a fixação de complemento e o teste imunoenzimático usando o conjugado policlonal e de 97,89% entre os dois testes imunoenzimáticos. Nos soros de rebanhos vacinados, a concordância entre a fixação de complemento e o teste imunoenzimático com o conjugado policlonal foi de 69,39%, enquanto que a concordância entre os testes imunoenzimáticos foi de 90,73%. Neste caso, a reação de fixação de complemento não revelou qualquer título em 67,86% dos soros examinados, o teste com o conjugado policlonal não revelou títulos em 51,22% dos soros, ao passo que o teste com o conjugado monoclonal não revelou título em 41,95% dos soros. Os 122 soros de rebanhos sem histórico de infecção e vacinação apresentaram resultados negativos nos três testes realizados.
Abstract in English:
The comparison of the comparative tuberculin test and the Stormont method, performed at the sarne groups of animals, gave highly convergent results in bovines free from tuberculosis and also in infected groups with strong reactors. In weak reactors the results were highly discordant. A group of 21 bovines with negative results at the comparative tuberculin test, but reacting to avian tuberculin, was negative with the Stormont test. Twenty six bovines which reacted strongly positive (4.0mm or more) at the comparative test, with or without non-specific reactions, showed also positive reactions in 88.4%, suspicious reactions in 7.7% and negative reactions in 3.9% at the Stormont test. A group of 19 bovines, initially tested by the Stormont method and considered as infected, when retested by the comparative test after 90 days, showed 84.2% positive reactors and 15.7% negative ones. Groups of bovines with suspicious (2.0 to 2.9mm) or weakly positive reactions (3.0 to 3.9 mm) at the comparative test, showed 20.0% positive, 20.0% suspicious and 60.0% negative reactors in the suspicious group and 53.3% positive, 13.3% suspicious and 33.3% negative reactions in the weakly positive reactors by the Stormont test. Another group of bovines gave suspicious reactions when initially tested by the Stormont method, but showed 50.0% positive, 9.3% suspicious and 40.6 negative reactions when retested by the comparative test. The discordant results of the present and other investigations do not allow to recommend the Stormont test for use in routine procedures for the diagnosis of bovine tuberculosis before a critical evaluation has been made, with slaughter and bacteriological exarnination of reacting animals.
Abstract in Portuguese:
A comparação entre a tuberculinização intradérmica comparada (tuberculina bovina e aviária) e a tuberculinização dupla (com 7 dias de intervalo) conhecida por teste de Stormont, revelou resultados altamente concordantes em grupos de bovinos sem tuberculose e em grupos de animais infectados com fortes reações alérgicas, no entanto, apresentou resultados bem discordantes nos reagentes suspeitos e fracamente positivos em ambos os testes cujas causas não puderam ser esclarecidas por exames necroscópicos e bacteriológicos por razões econômicas. Em um grupo de 21 bovinos com resultados negativos na tuberculização comparada, mas portadores de reações à tuberculina aviária, o teste de Storment revelou também resultados negativos. Em 26 bovinos reagentes positivos no teste comparativo com aumento de espessura da dobra da pele (AEDP) acima de 4,0 mm, com ou sem reações inespecíficas, o teste de Stormont acusou também 88,4% de reações positivas, 7,7% reações suspeitas e 3,9% reações negativas. Em outro experimento, um grupo de 19 bovinos reagentes positivos no teste de Stormont, quando retestado, 90 dias depois pelo teste comparativo, este revelou 84,2% de reagentes positivos e 15,7% de reações negativas. Em grupos de bovinos com reações suspeitas (AEDPs entre 2,0 e 2,9 mm) ou fracamente positivos (AEDPs entre 3,0 e 3,9mm) no teste comparativo, o teste de Stormont revelou 20,0% de reações positivas, 20,0% de reações suspeitas e 60,0% negativas, e 53,3% positivas, 13,3% suspeitas e 33,3% negativas respectivamente. Num grupo de bovinos que no teste de Stormont acusou reações suspeitas e que, 90 dias após foi retestado pela tuberculização comparativa, esta acusou 50,0% de reagentes positivos, 9,3% suspeitos e 40,6% negativos. Os resultados discordantes da presente pesquisa e da de outras não recomendam o uso rotineiro do teste de Stormont no diagnóstico da tuberculose bovina antes de uma avaliação científica criteriosa, com abate e exames bacteriológicos de animais reagentes.
Abstract in English:
A competitive enzyme immunoassay was evaluated using as conjugate monoclonal antibodies B M-38 and B M-40, prepared from mice immunized with Brucellea melitensis 16 M. The competitive enzyme immunoassay was compared with the complement fixation test and an indirect enzyme immunoassay, regarding their efficiency and differential capacity to diagnose brucellosis in cattle vaccinated with B. abortus strain 19. Four hundred and twenty-one sera of vaccinated female calves, obtained between 15 days and 6 months after vaccination, were examined. The competitive enzyme immunoassay using conjugate BM-38 revealed a greater number of positive results (44,18%) than the complement fixation test (35,98%) and the competitive enzyme immunoassay using conjugate BM-40 (29,69%). This last test allowed a higher degree of differentiation than the others, since it revealed a lower number of reactors.
Abstract in Portuguese:
Foi avaliado o teste imunoenzimático competitivo, usando como conjugado os anticorpos monoclonais BM-38 e BM-40, preparados a partir da imunização de camundongos com Brucella melitensis 16 M, em comparação com a reação de fixação de complemento e com o teste imunoenzimático indireto, para diferenciar anticorpos da infecção natural dos induzidos pela vacina B19. Foram testados 421 soros de bezerras vacinadas com B. abortus amostra B 19 e colhidos em intervalos de 15 dias a 6 meses após a vacinação. O teste competitivo usando o conjugado BM-38 apresentou menor capacidade de discriminação que o teste com o conjugado BM-40 (44,18% contra 29,69% de soros com títulos de anticorpos) e que a reação de fixação de complemento (44,18% contra 35,98%) e resultados próximos aos do teste imunoenzimático indireto (54,89% contra 56, 17%), enquanto que o teste competitivo usando o conjugado BM-40 apresentou maior capacidade de discriminação do que os outros testes estudados, uma vez que acusou um menor número de reagentes: 28,9% contra 37, 6% revelados pela reação de fixação de complemento, 29,69% contra 44,18% revelados pelo teste com o conjugado BM-38 e 43,15% contra 56,85% revelados pelo teste imunoenzimático indireto.
Abstract in English:
An intennittent treatment regímen for bovine tuberculosis with isoniazid was used. Fifty five positive and 13 suspect reactors were treated orally with cristalized isoniazid (25 mg/kg bw) mixed in a concentrated ration given 3 times a week, during 6 months. The cure of the tuberculosis was evaluated after the treatment by allergic desensitization with comparative tuberculinizations performed in 3 months intervals, during a year. The monitoring showed progressive reduction of the allergic sensitivity until definitive disappearance, At 90 days pos-treatment there were 31 negative, 19 suspect and 18 positive reactors; at 180 days, 47 were negative, 10 suspect and 11 positive; at 270 days, 51 were negative, 12 suspect and 5 weakly positive, and at 360 days, 63 were negative, 5 suspect and no one anymore positive. As it was demonstrated experimentally, the pos-treatment suspect reactors may be considered infection-free and so the cure rate was 100 percent. This experiment showed that the intennittent 3 week dosages were as good as the continuous regímen with the advantage of about 40 percent cost reduction.
Abstract in Portuguese:
Foi adotado um regime de tratamento intermitente da tuberculose com isoniazida em 55 bovinos reagentes positivos e 13 suspeitos, A isoniazida em forma de sal cristalizado foi fornecida aos animais misturada em ração concentrada, em doses de 25 mg/kg p.v., nas 2. as, 4. as e 6. as feiras, durante 6 meses. A cura da tuberculose foi avaliada pela dessensibilização alérgica, após o término do tratamento através de tuberculinizações comparativas realizadas de 3 em 3 meses, durante um ano. Este monitoramento revelou progressiva redução da sensibilidade alérgica até o desaparecimento definitivo. Aos 90 dias pós-tratamento já havia 31 (45,5%) bovinos negativos, 19 (27,9%) suspeitos e 18 (26,4%) positivos; aos 180 dias, 47 (69,1%) negativos, 10 (14,7%) suspeitos e 11 (15,1%) positivos; aos 270 dias, 51 (75,0%) negativos, 12 (17,6%) suspeitos e 5 (7,3%) positivos e aos 360 dias, 63 (92,6%) negativos, 5 (7,3%) suspeitos e nenhum mais positivo. Como os reagentes suspeitos, no final do tratamento podem ser considerados livres da infecção, o percentual de curas foi de 100%, mostrando que o tratamento intermitente com 3 dosagens de isoniazida semanais foi tão eficiente quanto o regime contínuo. O regime intermitente reduziu de 120 para 80 o número de doses administradas e reduziu o custo em 40%.
Abstract in English:
Lymphocytosis caused by Enzootic Bovine Leukosis (EBL) has been known since the beginning of the century. For the clinical diagnosis of EBL "hematologic keys" have been largely used. The objective of this paper was to evaluate the hematologic condition of black and white holstein cows infected by the Bovine Leukosis Virus (BLV) giving special attention to lymphocytic morphology. Blood samples from 423 cows reacting to the Agar Gel Immunodiffusion Test (AGID) and from 374 non reacting cows were collected. No statistical differences in polymorphic nuclear leucocyte counts and monocyte counts between reacting and non reacting cows were found, but the AGID-reacting cows showed higher lymphocyte counts than the non AGID-reacting cows. When the morphology of the lymphocytes was analysed it was found that the monocytic cell counts and the double nucleus lymphocyte counts were higer in AGID-reagent animals.
Abstract in Portuguese:
Desde o início do século já era conhecido que os animais afetados pela Leucose Enzoótica dos Bovinos (LEB) apresentavam linfocitose. Esta alteração foi muito usada como recurso auxiliar no diagnóstico clínico da LEB através do emprego das chamadas "chaves leucométricas". O presente estudo procurou avaliar o perfil do quadro leucocitário de fêmeas bovinas da raça holandesa naturalmente infectadas pelo Vírus da Leucose Bovina (VLB) dando-se particular atenção à morfologia dos linfócitos. Para tanto, realizou-se o leucograma de 423 bovinos reagentes e 374 não reagentes à prova de Imunodifusão em Gel para a Leucose Bovina (IDLB). Os resultados obtidos mostraram que apenas os linfócitos apresentaram aumentos estatisticamente significantes nos animais reagentes à IDLB. No tocante ao aspecto morfológico dos linfócitos, conclui-se que os linfócitos monocitóides e os linfócitos com núcleo duplo apresentaram contagens significativamente maiores nos animais reagentes.
Abstract in English:
There were 409 bovines in a Swiss Brown-cattle herd in Mossoró, Rio Grande do Norte, Brazil, reacting positively to the tuberculin test. The tuberculosis was confirmed by necropsy, histopathological and bacteriological procedures. The infected animals were treated with purê crystalised isoniazid, administered orally at a dose of about 25 mg/kg/day, during 60 days consecutively and other 60 doses 3 times a week. The large number of reactors did not allow individual medication. Therefore treatment at a large scale was used in groups of animals varying in weight up to 100 kg. Isoniazid was mixed mechanically, daily, and applied at 12 g per 1 kg of high palatable concentrated ration, furnished in long double troughs. The quantity of feed was calculated based on the media of live weight and the numbers of animals in each group. The clinically affected animals showed recuperation starting with the second month of treatment. Thirty days after the end of the treatment the allergic monitoration began by comparative tuberculinizations at intervals of 2 to 3 months. The cure was evaluated by the gradual tuberculin desensitization. In most animals the tuberculin reactions became negative after 2 to 4 months post-treatment. At the end of this experiment 96.4% of the treated animals were cured. In slaughtered animals no lesions were found.
Abstract in Portuguese:
Num rebanho de bovinos da raça suíça parda, em Mossoró, Rio Grande do Norte, foram encontrados 409 animais reagentes positivos na tuberculinização comparativa com tuberculinas PPDs bovina e aviária. A tuberculose foi confirmada por exames necroscópicos, histopatológicos e bacteriológicos em animais vitimados pela doença. Os bovinos infectados foram submetidos ao tratamento com isoniazida pura, cristalizada, administrada por via oral, na dose de aproximadamente 25 mg/kg pv, durante 60 dias consecutivos e mais 60 doses dadas, em dias alternados, 3 vezes por semana. Face ao grande número, não foi possível medicar cada animal individualmente, optando-se pelo tratamento massal, em lotes de até 80 animais cujo peso variava até 100 kg. A isoniazida era misturada mecanicamente na proporção de 12 g para 1 kg de ração concentrada com alta palatibilidade, fornecida aos animais em cochos coletivos duplos em que cada animal livremente procurava o alimento. A quantidade de ração era calculada a base do peso médio e do número de animais do lote, de modo que cada animal, ao comer o alimento, estava ingerindo sua dose terapêutica de isoniazida. Durante o período da medicação, os animais clinicamente portadores de sintomas de tuberculose, mostravam sua recuperação a partir do segundo mês em diante. Trinta dias após o término da medicação foi iniciado o monitoramento alérgico pela tuberculinização comparativa com intervalos de 2 a 3 meses. A cura da tuberculose foi avaliada pela gradual dessensibilização à tuberculina. Na maioria dos animais tratados a reação caiu para níveis negativos entre 2 e 4 meses após o término da medicação. No final do trabalho experimental verificou-se que 96,4% dos animais tratados estavam curados. A cura foi confirmada pela inspeção sanitária em animais abatidos em matadouro.