PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

Inclusion body disease (IBD) is a global viral infectious disease that affects snakes, mainly from the Boidae and Pythonidae families. The appearance of secondary infections is common in cases of IBD. The aim of this study was to report a case of inclusion body disease (IBD) associated with secondary infection in the respiratory system by Salmonella spp. in a captive Boa constrictor in the state of Ceará, northeastern Brazil. A male captive snake from a private captivity was sent for necropsy after presenting apathy and anorexia. It was sent for necropsy to the “Laboratório de Anatomia e Fisiologia Animal” at the “Universidade Federal do Cariri.” Macroscopically, there was a discrete focal brownish catarrhal content in the tracheal lumen. The lungs, especially the right one, were reddish, with multifocal to coalescing yellowish areas. On the cut surface, these areas extended to the lung parenchyma. They were soft, yellow and had a pasty texture. A brownish catarrhal exudate was also observed in the lung cavity. Microbiological examination of the tracheal swab and lungs resulted in the isolation of Salmonella spp. as well as Achromobacter denitrificans in the trachea. Fragments from all organs were collected, fixed in 10% buffered formalin solution and routinely processed to make histological slides stained with hematoxylin and eosin (HE). Microscopically, there was lymphoplasmacytic and heterophilic tracheitis, with hyperplasia of the mucosal epithelium associated with intracytoplasmic eosinophilic inclusion bodies. In the lungs, there was granulomatous pneumonia. The faveolar epithelium showed degeneration and necrosis associated with intracytoplasmic eosinophilic inclusion bodies. In the intestine, there was necrotic enteritis. In the liver there was random necrotic hepatitis. In the kidneys, there was degeneration and necrosis of the tubular epithelium and interstitial nephritis. Round to oval, intracellular eosinophilic to amphophilic inclusion bodies were also seen in the pancreas, liver, bile ducts, kidneys, and brain. Paraffin blocks of lung and intestine fragments were sent to the Veterinary Pathology Department at “Universidade Federal do Rio Grande do Sul” for immunohistochemistry with anti-Salmonella antibody, with positive immunostaining. The findings of inclusion bodies were consistent with infection by a virus of the genus Reptarenavirus. This appears to be the first reported case of IBD in a Boa constrictor from a private zoo in the state of Ceará, northeastern Brazil. In the present report, the disease was associated with secondary infection in the respiratory system by Salmonella sp. Additionally, this seems to be the first report of isolation of A. denitrificans from the microbiome of a respiratory sample in a snake in Brazil. Although Salmonella spp. infections are common in snakes, the isolation of A. denitrificans requires further studies on infection routes, pathogenicity and antimicrobial sensitivity.

• Reptarenavirus secondary infections salmonellosis immunohistochemistry

Abstract in Portuguese:

A doença do corpúsculo de inclusão (“Inclusion Body Disease” – IBD) é uma doença infecciosa viral e de caráter global que acomete serpentes, principalmente das famílias Boidae e Pythonidae. O surgimento de infecções secundárias é comum em casos de IBD. Objetivou-se com este trabalho, relatar um caso da doença de corpúsculos de inclusão (IBD) associada a infecção secundária do sistema respiratório por Salmonella spp. em uma jiboia (Boa constrictor) de cativeiro, no estado do Ceará, nordeste do Brasil. Uma serpente, macho, proveniente de cativeiro particular foi encontrada morta em seu recinto após apresentar apatia e anorexia, e encaminhada para necropsia no Laboratório de Anatomia e Fisiologia Animal na Universidade Federal do Cariri. Macroscopicamente, no lúmen da traqueia havia conteúdo catarral acastanhado focal discreto. Os pulmões, principalmente o direito, estava avermelhado, com áreas multifocais a coalescentes amareladas. Ao corte, estendiam-se ao parênquima pulmonar, eram macias, amarelas e de consistência pastosa e na cavidade pulmonar havia exsudato catarral acastanhado. O exame microbiológico foi feito a partir de swab traqueal e pulmão resultou em isolamento de Salmonella spp., além de Achromobacter denitrificans em traqueia. Foram colhidos fragmentos de todos os órgãos, fixados em solução de formalina tamponada a 10% e, em seguida, processados rotineiramente para fazer confecção de lâminas histológicas coradas com hematoxilina e eosina (HE). Microscopicamente, havia traqueíte linfoplasmocitária e heterofílica com hiperplasia do epitélio da mucosa associada a corpúsculos de inclusão intracitoplasmáticos. No pulmão, havia pneumonia granulomatosa. No epitélio faveolar foi visto degeneração e necrose associada a corpúsculos de inclusão eosinofílicos intracitoplasmáticos. No intestino havia enterite necrótica. No fígado havia hepatite necrótica, aleatória. Nos rins, havia degeneração, necrose do epitélio tubular e nefrite intersticial linfoplasmocitária. Corpúsculos de inclusão eosinofílicos a anfofílicos, redondos a ovais, intracitoplasmáticos foram vistos ainda em pâncreas, fígado, ductos biliares, rins e encéfalo. Blocos de parafina de fragmentos de pulmão e intestino foram encaminhados ao Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul para realização de imuno-histoquímica com anticorpo anti-Salmonella, com imunomarcação positiva. Os achados de corpúsculos de inclusões foram compatíveis com infecção por vírus do gênero Reptarenavirus. Este parece ser o primeiro relato de caso de doença do corpúsculo de inclusão em uma jiboia de um zoológico particular no estado do Ceará, Nordeste do Brasil. No presente relato, a doença foi associada à infecção secundária no sistema respiratório por Salmonella sp. Além disso, este parece ser o primeiro relato de isolamento de A. denitrificans do microbioma de uma amostra respiratória em uma serpente no Brasil. Embora infecções por Salmonella spp. sejam comuns em serpentes, o isolamento de A. denitrificans requer mais estudos sobre as vias de infecção, patogenicidade e sensibilidade antimicrobiana.

• Reptarenavirus infecções secundárias salmonelose imuno-histoquímica

Abstract in English:

ABSTRACT.- Hardt I., Gava M.G., Paz J.S., Silva E.L.F., Souza T.D., Jabour F.F., Leite F.L.G. & Flecher M.C. 2017. [Inclusion body disease and spondilitis by Salmonella sp. in a Boa constrictor constrictor.] Doença do corpúsculo de inclusão e espondilite por Salmonella sp. em uma Boa constrictor constrictor. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(9):984-990. Setor de Patologia Veterinária, Universidade de Vila Velha, Complexo Nossa Senhora da Penha (biopráticas), Rua Viana s/n, Boa Vista, Vila Velha, ES 29102770, Brazil. E-mail: isabelahardt@yahoo.com.br Inclusion Body Disease (IBD) is a disorder characterized by intracytoplasmic corpuscles in different tissues, mainly in the CNS, wich is responsible for the major neurological signs attributable to this disease. It affects Boas and Phytons in captivity and have been a global concern due to the high morbidity and mortality. The diagnosis is made by visualization of corpuscles caused by a modified Arenaviruses. Salmonella sp. belongs to microflora of cold and warm-blooded animals; it is an opportunistic pathogen that can causes gastrointestinal or septic disorders. In reptiles, Salmonella sp. is the bacteria most frequently quotes in spondylitis and osteomyelitis. This article describes a boa constrictor (Boa constrictor constrictor) that had restriction of movement and multiple granulomas in the dorsal vertebrae, the shadowgraph showed up fractured regions. After months of treatment without clinical improvement and the emergence of new injuries, the animal started to get prostrate, anorexic, cachectic and developed opisthotonos. It was opted for euthanasia. At necropsy it was found in multiple spots swelling of the dorsal vertebrae that ranging from mild to moderate. At the cutting vertebrae it was visible deformed and showed focal caseous content near the spinal cord, this was collected for microbiology where it was identified Salmonella sp. At microscopic evaluation the vertebrae had one to multifocal moderate inflammatory infiltrate of macrophages and heterophils. Some areas had lots of granulomas with central calcification and numerous giant cells. Other vertebras showed areas of osteomalácea and fibrosis. Rare focus had vertebral body fracture and spinal cord compression with mild infiltration entering the spinal cord canal. In the lung, especially in the bronchial epithelium, sometimes even within lymphocytes in bronchial-associated lymphoid tissue, in the intestine, liver, gall bladder, kidney and brain were found various structures of eosinophilic intracytoplasmic rounded ranging between 1 and 10 micrometers. These structures accompanied or not mononuclear inflammation. These findings are consistent with IBD and spondylitis due to salmonellosis. The IBD is a common disease in captive snakes, of world importance, is probably underdiagnosed in Brazil. This disease causes immunosuppression favoring the development of other affections, and is typically associated with other diseases such as spondylitis found in the case.

• Inclusion body disease spondylitis Salmonella sp. Boa constrictor constrictor arenavirus snakes salmonellosis corpúsculo de inclusão espondilite arenavírus serpentes salmonelose

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Hardt I., Gava M.G., Paz J.S., Silva E.L.F., Souza T.D., Jabour F.F., Leite F.L.G. & Flecher M.C. 2017. [Inclusion body disease and spondilitis by Salmonella sp. in a Boa constrictor constrictor.] Doença do corpúsculo de inclusão e espondilite por Salmonella sp. em uma Boa constrictor constrictor. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(9):984-990. Setor de Patologia Veterinária, Universidade de Vila Velha, Complexo Nossa Senhora da Penha (biopráticas), Rua Viana s/n, Boa Vista, Vila Velha, ES 29102770, Brazil. E-mail: isabelahardt@yahoo.com.br Doença do corpúsculo de inclusão (IBD) é uma enfermidade caracterizada por corpúsculos intracitoplasmáticos em diversos tecidos, principalmente no sistema nervoso central, responsável pelos principais sinais clínicos atribuídos à doença que acomete Boas e Phytons de cativeiro; essa enfermidade tem sido uma preocupação mundial devido à alta morbidade e mortalidade. O diagnóstico é feito pela visualização dos corpúsculos causados por um Arenavírus modificado. Salmonella sp. pertence à microflora de animais de sangue frio e quente, e é um patógeno oportunista que pode causar quadros gastrointestinais ou septicêmicos. Em répteis a Salmonella sp. é a bactéria com maior frequência de citações em espondilites e osteomielites. Relata-se um caso de uma jiboia (Boa constrictor constrictor) que apresentava restrição de movimento e múltiplos granulomas dorsais nas vértebras; à radiografia evidenciaram-se regiões fraturadas. Após meses de tratamentos sem melhora clínica e o aparecimento de novas lesões o animal ficou prostrado, anoréxico, caquético e desenvolveu opistótono; optou-se pela eutanásia. À necropsia verificaram-se, nas vértebras, múltiplos focos dorsais com aumento de volume que variava de 1,7cm à 3,8cm. Ao corte as vértebras eram deformadas e exibiam conteúdo caseoso focal próximo ao canal medular, este foi coletado para microbiologia onde se identificou Salmonella sp. À microscopia as vértebras tinham um infiltrado inflamatório multifocal moderado de macrófagos e heterofilos. Algumas áreas possuíam grande quantidade de granulomas com calcificação central e inúmeras células gigantes; outros mostravam áreas de osteomalácia e fibrose. Em raros focos havia fratura do corpo vertebral e compressão da medula espinhal com leve infiltrado inflamatório invadindo o canal medular. No pulmão, principalmente no epitélio brônquico, por vezes até dentro de linfócitos do tecido linfoide bronco-associado, no intestino, fígado, vesícula biliar, nos rins e no encéfalo foram encontradas diversas estruturas eosinofílicas intracitoplasmáticas arredondadas que variavam de 1 a 10 µm. Essas estruturas acompanhavam ou não inflamações mononucleares. Os achados são compatíveis com IBD e espondilite por salmonelose. A IBD é uma enfermidade frequente em serpentes de cativeiro, de importância mundial, que provavelmente é subdiagnosticada no Brasil. Essa doença causa imunossupressão que favorece ao desenvolvimento de outras enfermidades, e é tipicamente associada a outras doenças como a espondilite encontrada no caso.