Resultado da pesquisa (187)
Termo utilizado na pesquisa IFI
#1 - Carbapenem resistance and ESBL production in the Acinetobacter calcoaceticus-Acinetobacter baumannii complex in animals: challenges in resistance identification and diagnosis
Abstract in English:
The Acinetobacter calcoaceticus-Acinetobacter baumannii (Acb) complex is a major concern in veterinary medicine due to its intrinsic resistance to various antimicrobial agents, including ampicillin, amoxicillin, amoxicillin-clavulanate, and carbapenems. The increasing prevalence of multidrug-resistant (MDR) strains, particularly those producing extended-spectrum beta-lactamases (ESBLs) and carbapenemases, has been observed in animals, with a significant number of urinary tract infections being associated with these pathogens. The present study identified Acb complex strains harboring one or more resistance genes for ESBL and carbapenemase production, highlighting the growing issue of bacterial resistance in veterinary clinical practice. Phenotypic resistance profiling revealed that some Acinetobacter complex strains can hydrolyze a wide range of beta-lactams, including penicillins and third- and fourth-generation cephalosporins, while remaining resistant to cephamycins and carbapenems. Most of the ESBLs belong to Ambler’s class A, and these enzymes can be inhibited by clavulanic acid, sulbactam, tazobactam, and avibactam. The spread of these resistant strains is largely attributed to clonal expansion and horizontal gene transfer, with CTX-M, SHV, and TEM-derived ESBLs being the most clinically significant. Despite advances in molecular diagnostic methods, correlating phenotypic and genotypic data remains a significant challenge. The present findings highlight discrepancies between the phenotypic resistance patterns and the presence of resistance genes, illustrating the complexity of diagnosing and treating infections caused by Acinetobacter species. Further studies are necessary to better understand the mechanisms of resistance, improve diagnostic accuracy, and address the increasing threat of MDR bacteria in the veterinary field.
Abstract in Portuguese:
O complexo Acinetobacter calcoaceticus-Acinetobacter baumannii (Acb) é uma grande preocupação na medicina veterinária devido à sua resistência intrínseca a diversos agentes antimicrobianos, incluindo ampicilina, amoxicilina, amoxicilina-clavulanato e carbapenêmicos. A crescente prevalência de cepas multirresistentes (MDR), especialmente aquelas produtoras de beta-lactamases de espectro estendido (ESBLs) e carbapenemases, tem sido observada em animais, com um número significativo de infecções do trato urinário associadas a esses patógenos. O presente estudo identificou cepas do complexo Acb que abrigam um ou mais genes de resistência responsáveis pela produção de ESBLs e carbapenemases, destacando o crescente problema da resistência bacteriana na prática clínica veterinária. A análise fenotípica da resistência revelou que algumas cepas do complexo Acinetobacter são capazes de hidrolisar uma ampla gama de beta-lactâmicos, incluindo penicilinas e cefalosporinas de terceira e quarta geração, permanecendo resistentes às cefamicinas e aos carbapenêmicos. A maioria das ESBLs pertence à classe A de Ambler, e essas enzimas podem ser inibidas por ácido clavulânico, sulbactam, tazobactam e avibactam. A disseminação dessas cepas resistentes é atribuída, em grande parte, à expansão clonal e à transferência horizontal de genes, sendo as ESBLs derivadas dos genes CTX-M, SHV e TEM as mais clinicamente relevantes. Apesar dos avanços nos métodos moleculares de diagnóstico, correlacionar os dados fenotípicos e genotípicos ainda é um grande desafio. Os achados deste estudo evidenciam discrepâncias entre os padrões fenotípicos de resistência e a presença de genes de resistência, ilustrando a complexidade do diagnóstico e tratamento de infecções causadas por espécies de Acinetobacter. Estudos adicionais são necessários para compreender melhor os mecanismos de resistência, melhorar a precisão diagnóstica e enfrentar a crescente ameaça das bactérias multirresistentes no campo veterinário.
#2 - Mass spectrometry-based identification reveals the complexity of microorganisms involved in umbilical infections in lambs clinically scored
Abstract in English:
We investigated the microbiological etiology of umbilical infections in clinically scored lambs. A total of 128 lambs showing signs of umbilical infection and 41 showing no umbilical signs were sampled. All microorganisms were identified by mass spectrometry (MALDI-TOF MS), and the in vitro antimicrobial susceptibility/resistance patterns of bacteria were assessed. Among the diseased animals and those without umbilical signs, 214 and 116 species of microorganisms (bacteria and yeasts) were identified, respectively. Escherichia coli (11.21%) was the most prevalent microorganism and showed a significant association (p = 0.0039) with moderate (score 2) and severe (score 3) scores for umbilical infection. In lambs without clinical signs of umbilical infection, a predominance of Desemzia incerta was observed. Diseased lambs that exhibited clinical complications showed a high mortality rate (58%). Additionally, a significant association (p < 0.001) was observed between moderate and severe scores and poor prognosis. Bacterial multidrug resistance was observed in 20% (36/182) of isolates. To our knowledge, some bacteria were identified for the first time as primary agents of umbilical infections in lambs, and clinical scoring was applied for the first time in newborn lambs with omphalopathies. Our findings reveal a high complexity of microorganisms in umbilical infections in lambs, identified by mass spectrometry, with a predominance of E. coli in cases of moderate to severe severity scores, and an association between clinical complications and high mortality.
Abstract in Portuguese:
A etiologia microbiana das infecções umbilicais em cordeiros, com avaliação dos escores de gravidade clínica, foi investigada em 128 animais com sinais de infecção umbilical e 41 aparentemente sadios. Todos os microrganismos foram identificados por espectrometria de massas (MALDI-TOF MS), assim como foi investigado o perfil in vitro de sensibilidade/resistência aos antimicrobianos dos isolados bacterianos. Nos animais com e sem infecção umbilical foram identificadas 214 e 116 espécies de microrganismos (bactérias e leveduras), respectivamente. Escherichia coli (11,21%) foi o microrganismo mais prevalente e mostrou associação significante (p = 0,0039) com escores moderados (escore 2) e graves (escore 3) para infecção umbilical. Em cordeiros sem sinais clínicos de infecção umbilical observou-se o predomínio de Desemzia incerta. Cordeiros com infecção umbilical que apresentaram complicações clínicas apresentaram elevada mortalidade (58%). Foi observada ainda associação significante (p < 0,001) entre escores de gravidade clínica moderado e grave e prognóstico desfavorável. A multirresistência bacteriana foi observada em 20% (36/182) dos isolados. Na literatura consultada, certas bactérias foram identificadas pela primeira vez como agentes primários de infecções umbilicais em cordeiros, bem como escores de gravidade clínica foram adotados pioneiramente em cordeiros neonatos com onfalopatias. O presente estudo revelou alta complexidade de microrganismos nas infecções umbilicais em cordeiros indetificados por espectrometria de massas, com predomínio de E. coli nos casos moderados e graves e alta taxa de mortalidade nas infecções umbilicais com complicações clínicas.
#3 - An acidified product with zinc, copper and tea tree oil compounds: a strategy to treat digital dermatitis in dairy cattle using HoofCare®
Abstract in English:
This study aimed to evaluate the effectiveness of an antibiotic-free footbath protocol with the product HoofCare® for the treatment, prevention, and control of digital dermatitis (DD) lesions in dairy cows, when used in combination with brushing the lesions with the same product. The study was conducted on a large commercial dairy farm in Brazil and lasted 15 weeks. The entire lactating herd, estimated at over 2,200 Holstein cows, was included. As this study was a continuation of the first investigation of the efficacy of this product in footbaths, the protocol was based on preliminary results on the optimal number of passages using pH changes and the effect of intensive footbathing with the product. The protocol consisted of a footbath with 10% HoofCare® applied once per day, three times a week, along with topical treatment of the DD lesions by brushing them three times a week on alternate days with the footbath. Data collection focused on the number of affected hind limbs and lesion classification (non-existent, inactive, and active) at eight inspection points. The results showed a significant reduction in the prevalence and incidence of DD lesions, from 49.85% to 17.17% and 20.91% to 1.80%, respectively. Furthermore, at the end, most hind limbs had no lesions (82.83%), followed by inactive lesions (13.22%), and active lesions (3.95%). Logistic regression analysis showed there was no significant impact of days in milk and lactation on lesion development (p > 0.8). Our findings demonstrated that this footbath protocol with HoofCare® combined with brushing lesions with the same product is effective in preventing, controlling, and treating DD lesions on a dairy farm.
Abstract in Portuguese:
O objetivo do presente estudo foi determinar a eficácia do protocolo de pedilúvio sem antibióticos com o produto HoofCare® para o tratamento, prevenção e controle de lesões de dermatite digital (DD) em vacas leiteiras quando combinado com o pincelamento das lesões utilizando o mesmo produto. Este estudo foi realizado em uma grande fazenda leiteira comercial do Brasil durante 15 semanas. Todo o rebanho lactante estimado em mais de 2.200 vacas da raça Holandês foi incluído. Como este estudo foi uma continuação da primeira investigação da eficácia deste produto em pedilúvios, baseou-se o protocolo em resultados, o número ideal de passagens usando variações de pH, e o efeito do uso de pedilúvio intensivo com o produto. O protocolo consistiu em pedilúvio com HoofCare® 10% aplicado uma vez ao dia, três vezes por semana, associado ao tratamento tópico das lesões de DD pelo pincelamento três vezes por semana em dias alternados ao pedilúvio. A coleta de dados incluiu os membros pélvicos afetados e classificação das lesões (inexistente, inativa e ativa) em oito momentos de inspeção. Os resultados demonstraram uma redução significativa na prevalência e incidência de lesões de DD de 49,85% para 17,17% e de 20,91% para 1,80 respectivamente. Além disso, no final, a maioria dos membros pélvicos não apresentavam lesões (82,83%), seguido por lesões inativas (13,22%) e lesões ativas (3,95%). A análise de regressão logística mostrou que não houve impacto significativo dos dias em lactação no desenvolvimento da lesão (p > 0,8). Nossos resultados demonstraram que este protocolo de pedilúvio com HoofCare® combinado com pincelamento com o mesmo produto em ordenha rotativa é eficaz em prevenir, controlar e tratar lesões de DD na fazenda leiteira.
#4 - Mass spectrometry-based identification of 26 Pasteurella species and in vitro antimicrobial susceptibility pattern of isolates recovered from diseased domestic cats
Abstract in English:
Pasteurella species are well-known opportunistic bacteria that inhabit the microbiota of the oral cavity and upper respiratory tract of cats and have been related to a set of pet-associated diseases in addition to humans. Most studies involving feline pasteurellosis have been described as case reports and species identification based on classic phenotypic methods. In turn, a lack of comprehensive studies involving a great number of cats with pasteurellosis has been described, especially where diagnosis at the species level has been performed by molecular-based methods. In this scenario, we investigated the molecular identification of Pasteurella species isolated from 26 diseased domestic cats (i.e., cutaneous abscesses, pneumonia, conjunctivitis, open wounds, urinary tract infections, pleural effusion, pyometra, and infection secondary to neoplasia) based on proteomic diagnosis, using mass spectrometry (matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry – MALDI-TOF MS). The in vitro antimicrobial susceptibility patterns of isolates and selected epidemiological data (with emphasis on the outcome) were assessed as well. MALDI-TOF MS identified predominantly P. multocida (23/26=88.5%), followed by P. dagmatis (2/26=7.7%) and P. canis (1/26=3.8%). The isolates revealed 100% susceptibility to beta-lactams (amoxicillin/clavulanic acid, ampicillin, cephalexin, ceftriaxone), tetracyclines (tetracycline, doxycycline) and fluoroquinolones (ciprofloxacin, levofloxacin, marbofloxacin) groups of antimicrobials. Conversely, the highest resistance of the isolates was observed for amikacin (10/26=38%). Data on outcomes were available for 61% (16/26) of cats, of which 50% (8/16) died or were subjected to euthanasia due to severe complications (e.g., sepsis, pneumonia, and pleural effusion) secondary to disseminated/systemic infections, although no significant association was observed between Pasteurella species and the clinical-epidemiological findings studied. Our results contribute to the molecular identification of Pasteurella species and vigilance of multidrug-resistant bacteria that infect cats. Also, it highlights the need for the early diagnosis and therapy of feline pasteurellosis due to high mortality rates.
Abstract in Portuguese:
As espécies de Pasteurella são bactérias oportunistas que habitam a microbiota da cavidade oral e do trato respiratório superior de gatos, relacionadas a vários sinais clínicos em animais de companhia e humanos. A maioria dos estudos envolvendo pasteurelose felina têm sido descritos como relatos de casos, e a identificação de espécies baseada em métodos clássicos de classificação fenotípica. No entanto, número restrito de estudos têm focado grande número de gatos com pasteurelose, nos quais métodos moleculares tenham sido utilizados para o diagnóstico dos patógenos em nível da espécie. Neste cenário, foi investigada a identificação molecular de espécies de Pasteurella isoladas de 26 gatos domésticos com diferentes manifestações clínicas (e.g., abscessos cutâneos, pneumonia, conjuntivite, feridas, infecções do trato urinário, derrame pleural, piometra e infecção secundária à neoplasia), com base no diagnóstico por proteômica, utilizando a espectrometria de massas (Matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry – MALDI-TOF MS). O perfil de sensibilidade microbiana in vitro dos isolados e dados epidemiológicos dos animais (com ênfase no desfecho dos casos) também foram avaliados. MALDI-TOF MS identificou predominantemente P. multocida (23/26=88,5%), seguido por P. dagmatis (2/26=7,7%) e P. canis (1/26=3,8%). Os isolados revelaram 100% de sensibilidade aos grupos de antimicrobianos beta-lactâmicos (amoxicilina/ácido clavulânico, ampicilina, cefalexina, ceftriaxona), tetraciclinas (tetraciclina, doxiciclina) e fluoroquinolonas (ciprofloxacino, levofloxacino, marbofloxacino). Por outro lado, a maior resistência dos isolados foi observada para a amicacina (10/26=38%). Os dados de desfecho estavam disponíveis para 61% (16/26) dos gatos, dos quais 50% (8/16) morreram ou foram submetidos à eutanásia devido a graves complicações secundárias a infecções disseminadas/sistêmicas, embora nenhuma associação estatística tenha sido observada entre as espécies de Pasteurella e os achados clínico-epidemiológicos estudados. Os resultados do presente estudo contribuem para a identificação molecular de espécies de Pasteurella e para a vigilância de bactérias multirresistentes que infectam gatos, indicando a necessidade de diagnóstico e tratamento precoces da pasteurelose felina devido às altas taxas de mortalidade.
#5 - Identification of enteropathogenic Escherichia coli as the cause of mastitis in cows from Brazil
Abstract in English:
Escherichia coli is recognized as one of the main microorganisms responsible for triggering clinical mastitis, a disease that causes considerable economic losses in the dairy industry. In this context, this study aimed to identify E. coli isolates present in individual milk samples collected from cows diagnosed with clinical mastitis from various regions of Brazil. Additionally, through polymerase chain reaction (PCR), the presence of virulence genes eae, bfpB, escN, aatA, aggR, ipaH, stx1, stx2, est, and eltA was investigated; all associated with the pathotypes of diarrheagenic Escherichia coli (DEC). As an integral part of the study, a comprehensive assessment of the sensitivity profile of the isolates to 11 different antimicrobials widely used in mastitis treatment was also conducted. A total of 198 milk samples were collected from cows diagnosed with clinical mastitis. Among these samples, 12 isolates (6.07%) demonstrated bacterial growth greater than three Colony-Forming Units (CFU) when grown on MacConkey agar medium and morphological characteristics of E. coli. The disc-diffusion test was used to evaluate the susceptibility of these isolates to antimicrobials, and the most predominant resistance was observed concerning streptomycin and tetracycline, affecting 16.67% of the strains analyzed. Notably, all isolates investigated did not demonstrate the presence of the genes eae, aatA, aggR, ipaH, stx1, stx2, est, and eltA. These results indicate that these isolates do not fit the pathotypes known as diarrheagenic Escherichia coli (DEC). However, one of the isolates tested was positive for the bfpB and escN genes. The detection of resistant E. coli associated with clinical mastitis points to possible gaps in the treatment of the disease. Additionally, the presence of resistance genes in E. coli strains indicates the potential to transmit these genes between animals and, perhaps, along the food chain.
Abstract in Portuguese:
Escherichia coli é reconhecida como um dos principais microrganismos responsáveis pelo desencadeamento da mastite clínica, doença que causa perdas econômicas consideráveis na indústria de laticínios. Neste contexto, este estudo teve como objetivo principal a identificação de isolados de E. coli presentes em amostras individuais de leite coletadas de vacas com diagnóstico de mastite clínica, de diversas regiões do Brasil. Adicionalmente, por reação em cadeia da polimerase (PCR), foi investigada a presença dos genes de virulência eae, bfpB, escN, aatA, aggR, ipaH, stx1, stx2, est e eltA, todos associados aos patótipos de E. coli diarreiogênica (DEC). Como parte integrante do estudo, foi realizada uma avaliação abrangente do perfil de sensibilidade dos isolados a 11 antimicrobianos diferentes amplamente utilizados no tratamento da mastite. Foram coletadas 198 amostras de leite de vacas com diagnóstico de mastite clínica. Dentre essas amostras, 12 isolados (6,07%) demonstraram crescimento bacteriano superior a três Unidades Formadoras de Colônia (UFC) quando cultivadas em meio ágar MacConkey e características morfológicas de E. coli. Para avaliar a suscetibilidade desses isolados aos antimicrobianos foi utilizado o teste de disco-difusão, sendo observada a resistência mais predominante em relação à estreptomicina e à tetraciclina, afetando 16,67% das cepas analisadas. É relevante ressaltar que todos os isolados investigados não demonstraram a presença dos genes eae, aatA, aggR, ipaH, stx1, stx2, est e eltA. Estes resultados indicam que estes isolados não se enquadram nos patótipos conhecidos como Escherichia coli diarreiogénica (DEC). Porém, um dos isolados testados apresentou positividade para os genes bfpB e escN. A detecção de E. coli resistente associada à mastite clínica aponta para possíveis lacunas no tratamento da doença. Além disso, a presença de genes de resistência em estirpes de E. coli indica a capacidade potencial de transmitir estes genes entre animais e talvez ao longo da cadeia alimentar.
#6 - The use of WhatsApp to identify previously undiagnosed and underreported ruminant and equine diseases in Mato Grosso do Sul
Abstract in English:
This study explores the use of WhatsApp as a tool for identifying previously undiagnosed and underreported diseases in ruminants and horses in Mato Grosso do Sul, Brazil. The research, carried out from January 2022 to December 2023, involved a WhatsApp group of 302 public service and private sector veterinarians. The contacts were categorized as those that resulted in a necropsy by the veterinary diagnostic laboratory, the sending of a sample for histopathological analysis, or the non-sending of material. The results demonstrate the efficiency of using WhatsApp for diagnosing underreported diseases such as anaplasmosis, haemonchosis, rabies, blackleg disease, Mannheimia haemolytica pneumonia, bovine herpesvirus encephalitis, multiple mineral deficiency in cattle and copper poisoning in sheep, thus increasing diagnostic efficiency for veterinary laboratories. The tool also facilitated communication, resulting in an increase in conclusive diagnoses, the identification of previously undiagnosed diseases such as Chlamydia pecorum encephalomyelitis in buffalo, peripheral neuropathy in cattle, phosphorus deficiency in cattle, vitamin A deficiency, and perinatal pneumonia caused by Salmonella enterica subsp. arizonae in cattle. In addition, it was possible to identify underreported occurrences, such as cases of abortion and neonatal diarrhea and to implement the correction of diagnostic approaches in real-time via WhatsApp. The study concludes that WhatsApp improves communication between field veterinarians and diagnostic laboratories, providing valuable information on disease occurrence and diagnostic challenges.
Abstract in Portuguese:
Este estudo explora o uso do WhatsApp como ferramenta para identificação de doenças até então não diagnosticadas e subnotificadas em ruminantes e equinos em Mato Grosso do Sul, Brasil. A pesquisa, realizada de janeiro de 2022 a dezembro de 2023, envolveu um grupo de WhatsApp composto por 302 veterinários do serviço público e da iniciativa privada. Os contatos foram categorizados naqueles que resultaram em necropsia pelo laboratório de diagnóstico veterinário, ao envio de amostra para análise histopatológica ou ao não envio de material. Os resultados demonstram a eficiência do uso do WhatsApp para o diagnóstico de doenças subnotificadas como a anaplasmose, hemoncose, raiva, carbúnculo sintomático, pneumonia por Mannheimia haemolytica, encefalite por herpesvírus bovino, deficiência mineral múltipla em bovinos e intoxicação por cobre em ovinos, ampliando assim a eficiência diagnóstica para os laboratórios veterinários. A ferramenta também facilitou a comunicação, resultando em aumento de diagnósticos conclusivos, identificação de doenças não diagnosticadas previamente como a encefalomielite por Chlamydia pecorum em búfalos, neuropatia periférica em bovinos, deficiência de fósforo em bovinos, deficiência de vitamina A e a pneumonia perinatal por Salmonella enterica subsp. arizonae em bovinos. Além disso, foi possível identificar ocorrências subnotificadas como casos de aborto e diarreia neonatal, e implementar a correção de abordagens diagnósticas em tempo real via WhatsApp. O estudo conclui que o WhatsApp melhora a comunicação entre veterinários de campo e laboratórios de diagnóstico, fornecendo informações valiosas sobre a ocorrência de doenças e desafios de diagnóstico.
#7 - Compressive lesions of the central nervous system in goats and sheep: A retrospective study of 11 cases in the Amazon biome
Abstract in English:
This paper describes, within the framework of a retrospective study, the epidemiological and clinicopathological findings in goats and sheep with compressive lesions of the central nervous system (CNS) in Pará. This study included eight sheep and three goats from 2005 to 2022 by reviewing the clinical files of animals with CNS compressive lesions managed by the team of the Carlos Tokarnia Veterinary Hospital of the Institute of Veterinary Medicine of the Federal University of Pará. The animals with clinical signs were subjected to a general and specific clinical examination of the nervous system. All animals included in the study were necropsied, and the clinical signs were found to vary according to the location of the lesion. At necropsy, changes such as an abscess with osteomyelitis of the vertebral body with pathologic fracture and spinal cord compression, submeningeal abscess in the skull floor, subarachnoid hematoma, and congenital bone changes causing spinal cord compression and ankylosing spondylitis were noted. These findings indicate that a comprehensive clinical examination of the CNS in conjunction with necropsy findings is essential to characterize the clinical picture, localize the lesion, and determine the cause of the disease. The most affected medullary segment was between T3 and L3. Therefore, these diseases should be included in the list of differential diagnoses in farm animals with nervous system symptoms.
Abstract in Portuguese:
O presente trabalho descreve, através de estudo retrospectivo, os achados epidemiológicos e clínico-patológicos em caprinos e ovinos com lesões compressivas no sistema nervoso central (SNC) no estado do Pará. O estudo retrospectivo compreendeu as observações realizadas em oito ovinos e três caprinos no período de 2005 a 2022, por meio da revisão dos arquivos de fichas clínicas de animais com lesões compressivas no SNC, atendidos pelo Hospital Veterinário Carlos Tokarnia do Instituto de Medicina Veterinária da Universidade Federal do Pará. Os animais atendidos com sintomatologia clínica foram submetidos a exames clínicos geral e específico do sistema nervoso. Todos os animais incluídos no estudo foram necropsiados. Os sinais clínicos variaram de acordo com a localização da lesão. Os achados de necropsia revelaram alterações como abscesso com osteomielite do corpo da vértebra com fratura patológica e compressão da medula espinhal; abscesso sub-meningeano no assoalho do crânio; hematoma subaracnoideo e alteração óssea congênita causando compressão medular e espondilite anquilosante. A realização de um minucioso exame clínico do SNC, associado aos achados de necropsia foi importante para caracterizar o quadro clínico, localizar a lesão e determinar a causa da enfermidade. O segmento medular mais acometido foi entre T3-L3. Torna-se importante incluir estas enfermidades na lista de diagnósticos diferenciais em animais de produção que apresentem sintomatologia nervosa.
#8 - Straightforward identification of structures of the striatum in bovine and equine forebrains: Guidance to trimming
Abstract in English:
Standardizing trimming the brain for histological diagnosis of neurological diseases is challenging for veterinary pathologists. The striatum is a set of subcortical nuclei of the forebrain, formed by bundles of nerve fibers and gray matter, which consist of the internal and external capsules, caudate, lentiform, and claustrum nuclei. The striatum is related to motricity, which refers to the neural circuits of the extrapyramidal pathways. In domestic animals, the extrapyramidal pathways are of great importance in gait. From the ventral surface of the brain, they are located deep in a strip of the telencephalon corresponding to the olfactory trigone. Bovine and equine brains were routinely formalin-fixed, weighed and measured. Herein, we report a guide for bovine and equine brains’ neuroanatomic trimming and striatum histomorphology. Trimming was performed, and the sections were routinely processed for histology. We used the cross-section rostral to the optic chiasm as the site of choice for histologic sampling to identify the striatum structures. The forebrains were sectioned, and the standard histologic cassette was positioned horizontally or vertically to frame a greater diversity of structures. The histologic slides were labeled with structures of the striatum (caudate nucleus, internal capsule, lentiform nucleus, external capsule and claustrum). Regarding the brain size, handing the cassette orientation over to the forebrain allows the verification to shift the position or collect a second striatum sample for histology.
Abstract in Portuguese:
Padronizar a clivagem do encéfalo para diagnóstico histológico de doenças neurológicas é um desafio para os patologistas veterinários. O corpo estriado é um conjunto de núcleos subcorticais do prosencéfalo, formado por feixes de fibras nervosas e substância cinzenta, que consistem nas cápsulas interna e externa, núcleos caudado, lentiforme e claustro. O corpo estriado está relacionado à motricidade, que se refere aos circuitos neurais das vias extrapiramidais. Nos animais domésticos, as vias extrapiramidais são de grande importância na marcha. Da superfície ventral do cérebro, eles estão localizados profundamente em uma faixa do telencéfalo correspondente ao trígono olfatório. Encéfalos de bovinos e equinos foram rotineiramente fixados em formalina, pesados e medidos. Neste trabalho, relatamos um guia para a clivagem neuroanatômica e histomorfológica do corpo estriado dos cérebros de bovinos e equinos. A clivagem foi realizada e as seções foram processadas rotineiramente para histologia. Utilizamos o corte rostral e tangente ao quiasma óptico como local de escolha para amostragem histológica para identificar as estruturas do corpo estriado. Os prosencéfalos foram seccionados e o cassete histológico padrão foi posicionado horizontal ou verticalmente para enquadrar uma maior diversidade de estruturas. As estruturas do corpo estriado foram identificadas nas lâminas histológicas (núcleo caudado, cápsula interna, núcleo lentiforme, cápsula externa e claustro). Conforme o tamanho do encéfalo, o manuseio do cassete sobre o prosencéfalo permite orientar a necessidade de alterar a posição ou a coleta de uma segunda amostra do corpo estriado para histologia.
#9 - Viability of Toxoplasma gondii in cattle semen cryopreserved with different concentrations of cryoprotectant
Abstract in English:
Toxoplasma gondii can be eliminated in bovine semen. Cryopreserved semen is often used due to the fact that artificial insemination in dairy and beef cattle provides benefits in terms of production. However, little is known regarding the viability and infectivity of T. gondii tachyzoites in cryopreserved bovine semen. In the present study, cattle semen negative for T. gondii were contaminated with 1 x 106 tachyzoites (RH strain) and cryopreserved with and without different cryoprotectants, such as DMSO (concentrations of 2.5%, 5.0%, 7.5%, 8.0% and 10.0%) and glycerol (2.25%, 2.5%, 3.0%, 5.0%, 7.5% and 10.0%), followed by freezing in liquid nitrogen (-196°C). After 24 hours, the samples were thawed and inoculated in 10 mice per cryoprotectant concentration. The mice were evaluated for clinical signs of toxoplasmosis (rough coat, diarrhea, hypoactivity and sudden death) as well as serum titers of IgM and IgG and the presence of tachyzoites in the peritoneal lavage. The results revealed that T. gondii remained infective in all samples. Clinical signs of toxoplasmosis were observed in the mice beginning with the 6th day post-inoculation (DPI) and 100% lethality was found between the 7th and 9th DPI. Viable tachyzoites were recovered from peritoneal exudate of dead mice (except for the control group), with higher mean of tachyzoite counts in the intraperitoneal lavage for 5% DMSO (±3.32 x 106), 8% DMSO (±3.53 x 106), 3% glycerol (±4.75 x 106), 7.5% glycerol (±6.26 x 106) and the absence of cryoprotectant (±3.11 x 106). Seroconversion occurred in the treated groups, with titers of IgG from 1:16 to 1:128 and IgM from 1:16 to 1:512. T. gondii viability and infectivity were maintained in cattle semen during 24 hours of cryopreservation at -196°C with and without cryoprotectant. However, further studies are necessary to determine whether cryopreserved semen contributes to the spread of toxoplasmosis through artificial insemination.
Abstract in Portuguese:
Sabe-se que Toxoplasma gondii pode ser eliminado no sêmen bovino. A inseminação artificial em bovinos leiteiros e de corte proporcionou avanços e benefícios nas produções e para isso o sêmen criopreservado é frequentemente utilizado. No entanto, pouco se sabe sobre a viabilidade e infectividade dos taquizoítos de T. gondii em sêmen bovino criopreservado. Para isso o sêmen bovino, negativo para T. gondii, foi contaminado com 1x106 taquizoítos (cepa RH), criopreservados com ou sem diferentes crioprotetores como DMSO (2.5%, 5.0%, 7.5%, 8.0% e 10.0%) e Glicerol (2.25%, 2.5%, 3.0%, 5.0%, 7.5% e 10.0%) e congelados em nitrogênio líquido (-196°C). Após 24 horas, essas amostras foram descongeladas e inoculadas em 10 camundongos por diluente de concentração de crioprotetor. Os camundongos foram avaliados quanto a sinais clínicos de toxoplasmose (pele áspera, diarreia, hipoatividade e morte súbita), títulos séricos de IgM e IgG e presença de taquizoítos no lavado peritoneal. Os resultados mostraram que T. gondii se manteve infectante em todas as amostras, inclusive naquelas sem crioprotetor. Sinais clínicos de toxoplasmose foram observados nos camundongos a partir do 6º dia pós-inoculação (DPI) e 100% de letalidade foi verificada entre o 7º ao 9º DPI. Nos camundongos mortos, exceto no grupo controle, taquizoítos viáveis foram recuperados do exsudato peritoneal, com maior média de taquizoítos quantificados na lavagem intraperitoneal para DMSO a 5% (±3.32x106), 8% (±3.53x106) e glicerol 3% (±4.75x106), 7,5% (±6.26x106) e livre de crioprotetor (±3.11x106). A soroconversão ocorreu nos grupos tratados com títulos de IgG (1:16 a 1:128) e IgM (1:16 a 1:512). A viabilidade e infectividade do T. gondii no sêmen bovino durante as 24 horas de criopreservação a -196°C foram mantidas com ou sem crioprotetor. No entanto, mais estudos são necessários para verificar se o sêmen criopreservado contribui para a disseminação da toxoplasmose na inseminação artificial.
#10 - Mutations of the c-KIT gene in canine mast cell tumors and respective nodal metastases classified according to mast cell infiltration
Abstract in English:
The molecular background of canine mast cell tumors (MCT) has been extensively investigated; however, the dynamic molecular changes that occur during carcinogenesis and metastasis are not fully understood. This study aimed to evaluate the incidence of mutations in the c-KIT proto-oncogene in canine MCTs and relative draining regional lymph nodes. Suspected or confirmed lymph node metastasis was classified accordingly to the HN Weishaar classification. The study included 34 dogs diagnosed with MCT; 19 patients were enrolled prospectively. These dogs had the primary MCT and regional lymph node resected and analyzed simultaneously. The second group was evaluated retrospectively and included fifteen patients resectioning the primary MCT without evaluation of regional lymph node. Analyzes of c-KIT mutation were performed for all primary MCTs and, in the first group, compared between primary MCT and HN-classified metastasis. Internal tandem duplications (ITD) in exon 11 of the c-KIT gene were detected in 20% of patients. Ten of the nineteen patients (52%) in the first group presented mast cell infiltration in the regional lymph node, and ITD in exon 11 of the c-KIT gene was detected in five and two dogs from Groups 1 and 2, respectively. ITD c-KIT mutations are common in canine MCT and may be found in the draining lymph node metastases/mast cell infiltrates in the absence of mutation of the primary tumor. Evaluation of c-KIT mutation in the primary tumor and metastases may be informative for defining both prognosis and therapeutic options in MCT cases.
Abstract in Portuguese:
O perfil molecular do mastocitoma (MCT) tem sido bastante investigado, no entanto as dinâmicas moleculares que ocorrem durante a carcinogênese e metástase desta neoplasia não estão bem esclarecidas. O objetivo desse estudo foi avaliar a incidência de mutações no proto-oncogene c-KIT em MCTs caninos e respectivos linfonodos regionais. Os casos suspeitos ou confirmados de metástase para os linfonodos, foram classificados de acordo com a classificação HN de Weishaar. O estudo incluiu 34 cães diagnosticados com MCT e, desses, 19 pacientes foram avaliados de maneira prospectiva, em que o tumor primário e o linfonodo regional foram ressecados e analisados simultaneamente. O segundo grupo foi avaliado retrospectivamente e incluiu quinze pacientes que tiveram ressecção do MCT primário sem avaliação de linfonodo regional. A análise da mutação c-KIT foi realizada para todos os MCTs primários e, no primeiro grupo, comparados entre MCT primário e metástase classificada pelo sistema HN. Duplicações internas em tandem (DIT), no exon 11 do gene c-KIT, foram detectadas em um total de 20% dos pacientes. Dez dos dezenove pacientes (52%) do primeiro grupo apresentavam infiltração de mastócitos no linfonodo regional, e DIT no exon 11 do gene c-KIT foram identificadas em cinco e dois cães dos Grupos 1 e 2, respectivamente. Mutações do tipo DIT no gene c-KIT são comuns no MCT canino e podem estar presentes nas metástases/infiltrados de mastócitos na ausência de mutação do tumor primário. A avaliação da mutação no gene c-KIT no tumor primário e metástases pode ser informativa para definir tanto o prognóstico quanto as opções terapêuticas em casos de MCT.
