Abstract in English:
One hundred twenty-six milk samples from 63 apparently healthy cows, but positive in the California Mastitis Test were submitted to determinations of pH, acidity, density, butter-fat, total solids, non-fat solids, cryoscopic point, caseine level, chloride level And polymorphonuclear leukocytes. Forty-one cows were infected by coagulase-positive Staphylococcus and 22 by coagulase-negative Staphylococcus. The results obtained in the milk sample analysis from the healthy quarters and infected by coagulase-positive Staphylococcus showed variations of all constituents investigated. However only the pH values (F=4.17*) and the polymorphonuclear leukocytes (F=ll.35**) showed significant differences. On the other hand, between the milk samples from healthy quarters and infected quarters by coagulase-negative Staphylococcus, only the polymorphonuclear leukocytes (F=16.29**) showed significant differences.
Abstract in Portuguese:
Foram submetidas às determinações do pH, acidez titulável, densidade, teor de gordura, extrato seco total, extrato seco desengordurado, ponto crioscópico, teor de cloreto, teor de caseína e às contagens de leucócitos polimorfonucleares, 126 amostras de leite procedentes de 63 vacas aparentemente sadias, porém, positivas ao Califórnia Mastitis Test, das quais 41 mostraram-se infectadas por cepas de Staphylococcus coagulase positiva e 22 por cepas de Staphylococcus coagulase negativa. Apesar de ter sido observada a variação de todos os constituintes investigados entre as amostras de leite procedentes de quartos sadios e infectados por Staphylococcus coagulase positiva, apenas os valores de pH (F=4,17*) e das contagens de leucócitos polimorfonucleares (F=ll,35**), mostraram diferenças estatisticamente significativas. Por outro lado, verificou-se, também, que entre as amostras de leite oriundas de quartos sadios e infectados por Staphylococcus coagulase negativa, apenas os valores das contagens de leucócitos polimorfonucleares (F=l6,29**) apresentaram diferenças estatisticamente significativas.
Abstract in English:
An epidemiological survey on dairy goats in the state of Pernambuco, Brazil, was carried out to determine the prevalence of caprine arthritis-encephalitis virus (CAEV) infection. A total of 397 serum samples was examined by the agar gel immunodiffusion test using Maedi/Visna virus antigen. The prevalence was 17.6% (70/397), with at least one positive sample in 19 of 40 studied flocks. Significant differences (X2; p<0.05) were found between the rates of positivity recorded in pure bred (21.1%) (Saanen, Toggemburg and Alpine) and crossbred (9.8%) goats; also between animals older (40.0%) or younger (15.1-16.1%) than 4 and a half years. No differences were observed when the sampled population was grouped according to sex or flock composition (bucks, dams and kids).
Abstract in Portuguese:
Com o objetivo de determinar a prevalência da artrite-encefalite caprina em criações de caprinos leiteiros no Estado de Pernambuco, amostras de soro foram testadas pela imunodifusão em ágar gel, utilizando-se antígeno do vírus Maedi/Visna. A prevalência observada foi de 17,6% (70/397), ocorrendo pelo menos um animal positivo em 19 das 40 criações estudadas. Foi observada maior frequência (X2; p<0,05%) de soropositivos nos animais puros (21,1 %) (Saanen, Toggemburg e Parda Alpina) que nos mestiços (9,8%), bem como o estrato de idade superior a 4 anos e meio (40%) que nos mais jovens (15,1-16,1%). Não houve diferença significativa entre as frequências observadas nos estratos formados segundo os critérios sexo e composição do rebanho (reprodutor, matriz e cabrito(a)).
Abstract in English:
The habits and characteristics of the vampire bat Desmodus rotundus rotundus (E. Geoffroy, 1810) were studied in 17 natural housings in the States of Ceará, Paraíba, Pernambuco, Alagoas and Sergipe. During one year, 2,901 bats were captured with nets and identified by ringing during 7 periods, with intervals from 49 to 73 days; 1,413 (48.7%) were recaptured from the 2nd to the 6th period, this is 32.5%, 11.2%, 2.9%, 1.1% and 0.1% respectively. The population of each housing varied from 57 to 884 bats, with an average of 343 animals per housing. Each colony had an average of 48.4 males and 51.5 females; the sarne proportions occurred in adult and young animals. The different physiological phases regarding reproduction of the bats were found during the 7 periods, indicating that reproduction occurs continuously troughout the year. Leaving and entering their housings occurred from 6 p.m. to 4 a.m., with a peak between 7 and 11 p.m. No migration of bats was observed, but only little local and isolated moving of a few animals. The average weight of the females was 37.8 g and the males 35.3 g, and the average length of the forearm in the females was 63.1 mm and in the males 60.6 mm. The average blood consumption by the females was 18.9 g and the males 9.6 g, as judged by the average weight difference at leaving and entering the housing. The temperature in two of the housings varied from 21.8 to 29.0ºC, at an average of 22.3 and 25.5ºC; the average relative humidity was 79.5 and 89.0%. This study confirmed the habits and physiological characteristics of D.r. rotundus and showed that in the semiarid conditions of northeastern Brazil the bat colonies maintain themselves well in housings with medium temperatures above those encountered in southern and northern Latin America.
Abstract in Portuguese:
Foram avaliados hábitos e características fisiológicas do morcego hematófago Desmodus rotundus rotundus (E. Geoffroy, 1810) em 17 abrigos naturais localizados nos estados do Ceará, Paraíba, Pernambuco, Alagoas e Sergipe. Procedeu-se a captura, por meio de redes e anilhamento de 2.901 morcegos, durante 7 etapas com intervalo de 49 a 73 dias, no decurso de um ano. Deste total foram recapturados 1.413 (48,7%) morcegos, assim distribuídos da 2ª a 6ª etapa: 32,5%, 11,2%, 2,9%, 1,1% e 0,1% respectivamente. O número estimado das populações de morcegos de cada abrigo variou entre 57 e 884 animais, perfazendo a média de 343 indivíduos por abrigo. Cada colônia de morcegos era composta em média por 48,4% de machos e de 51,5% de fêmeas, sendo a mesma proporção entre adultos e jovens. Nas 7 etapas foram encontrados os diferentes estágios fisiológicos relativos à reprodução, indicando que esta ocorre continuamente durante todo o ano. A movimentação de saída e entrada dos morcegos nos abrigos ocorre das 18 às 4 horas da manhã, com maior intensidade entre as 19 e 23 horas. Não foi observada a migração de morcegos, mas apenas movimentos locais com deslocamentos isolados de alguns indivíduos. O peso médio foi de 37,8 g para as fêmeas e de 35,3 g para os machos e o comprimento médio do antebraço de 63,1 mm para as fêmeas e de 60,6 mm para os machos. A média de sangue consumida por morcego foi de 18,9 g para as fêmeas e de 9,6 g para os machos a julgar pela diferença média do pêso na saída e na entrada dos abrigos. As condições ecológicas de dois abrigos revelaram temperaturas que oscilaram entre 21,8 e 29,0ºC, com médias de 22,3 e 25,5 ºC nos dois abrigos; a umidade relativa do ar média foi de 79,5 e 89,0%. A presente pesquisa, além de confirmar hábitos e características fisiológicas de D.r. rotundus, revelou que nas condições semiáridas do Nordeste do Brasil, as colônias de morcegos mantem-se bem em abrigos com temperaturas médias acima das encontradas no sul e norte da América Latina.
Abstract in English:
Ihe research was carried out to determine values for rumen functions in goats under pasture conditions in the Baixada Fluminense, Rio de Janeiro. Ruminal samples were colleted using an esophageal tube, from 16 goats during the month of November (spring). The macroscopic characteristics showed that the variation in color was from green to mit-brown, the smell was aromatic, the consistency was slightly viscous, and there was no sedimetation or floating. In the physicochemical evaluations, the average values were: pH measured with a pH meter 7.13 ± 0.06, and with a special indicator paper 7.04 ± 0.07; methylene-blue reduction, 6.21 ± 0.65 minutes; nitrite reduction, 7.55 ± 0.98, 19.68 ± 2.74, and 31.38 ± 4.38 minutes in the tubes with 0.2, 0.5 and 0.7 ml of KN02, respectively; acidity 18.04 ± 1.63 units; glucose fermentation, 0.21 ± 0.06 and 0.47 ± 0.08 ml gas measured at 30 and 60 minutes; cellulose digestion, 50.84 ± 2.58 hours; and chloride 39.26 ± 2.41 mEq/1. Ruminal rcicrobiotic analysis revealed variations in size, density, and active motility of the protozoa, and a mixed population of bacteria with a predominance of the Gram negative forrns.
Abstract in Portuguese:
Esta pesquisa teve o objetivo de determinar valores para as funções ruminais em caprinos sob condições de pastagem na Baixada Fluminense, Rio de Janeiro. Amostras de fluido ruminal foram coletadas através de sonda esofágica, de 16 caprinos, durante o mês de novembro (primavera). As características macroscópicas mostraram que a variação na coloração foi entre o verde e castanho, o odor foi aromático, a consistência levemente viscosa e não houve sedimentação ou flotação. Nos exames físico-químicos, os valores médios foram: pH medido com pH metro 7,13 ± 0.06 e com papel indicador especial 7,04 ± 0,07; redução do azul de metileno 6,21 ± 0,65 minutos; redução de nitritos 7,55 ± 0,98, 19,68 ± 2,74 e 31,38 ± 4,38 minutos em tubos com 0,2, 0,5 e 0,7 ml de KN02, respectivamente; acidez total titulável 18,84 ± 1,63 unidades; fermentação da glicose 0,21 ± 0,06 e 0,47 ± 0,08 ml de gás medidos em 30 e 60 minutos; digestão da celulose 50,84 ± 2,58 horas e cloretos 39,29 ± 2,41 mEq/1. A análise microbiológica ruminal revelou variações no tamanho, densidade e motilidade ativa de protozoários e uma população bacteriana mista com o predonúnio de formas Gram negativas.
Abstract in English:
The recovery of lst stage larvae within 18h of collecting cattle faeces has made it possible to diagnose the common genera of cattle nematode parasites. Morphologically they vary as follows: _ Short larvae (mean length 235-363 μm) are: Strongyloides - oesophagus 30% total length, no tail sheath (In all other larvae the oesophagus is short and tail sheath, i.e. extension of sheath of the tail beyond the tail tip, is present); Dictyocaulus - parenthesis shaped, intestinal cells black, tail sheath 15 μm; Trichostrongylus - straight slightly curved, tail sheath 31 μm, triangular. Medium length larvae (366-376 μm): Haemonchus - caudal end wedge shaped, tail sheath fine filamentous curved or coiled; Cooperia - tail sheath conical, anterior end 2 refringent bodies. Long larvae (437-472 μm and width 22-23 μm at the levei of the oesophageal bulb): Ostertagia - intestinal cells semi-transparent grey or silver coloured; dark brown or black Bunostomum - tail sheath slightly curved or straight in line with the long axis, oesophageal bulb may be prominent; Oesophagostomum - very long (414 μm), tail sheath long (93 μm) curved or coiled.
Abstract in Portuguese:
A obtenção de larvas de primeiro estágio no período de 18 horas da coleta de fezes possibilitou a identificação dos principais gêneros de nematódeos que comumente parasitam bovinos. Morfologicamente variaram como segue: - Larvas curtas (média de comprimento de 235-363 μm): Strongyloiles - o esôfago ocupa aproximadamente 30% do comprimento total da larva, cauda sem bainha (em todas as outras larvas o esôfago é curto e a cauda da bainha presente); Dictyocaulus- formade parênteses ou encurvada, células intestinais negras, bainha da cauda 15 μm; Trichostrongylus – larva ligeiramente curva, bainha da cauda 31 μm, triangular. Larvas de comprimento médio (366-376 μm): Haemonchus - cauda da larva em forma de cunha, bainha da cauda fina, filamentosa, curva ou enrolada; Cooperia - bainha da cauda em forma cônica, extremidade anterior termina com 2 corpos refringentes. Comprimento da larva entre 437-472 μm e largura 22-23 μm ao nível do bulbo esofagiano: Ostertagia - células intestinais semi-transparentes de coloração acinzentada ou prateada; Bunostomum - células intestinais escuras, marrons ou negras, cauda da bainha ligeiramente curva ou reta em linha com o eixo longo, bulbo esofagiano pode ser proeminente; Oesophagostomum - larva muito longa ( 414 μm), bainha da cauda longa (93 μm) curva ou enrolada.
Abstract in English:
"Cara inchada" (swollen face), a periodontal disease of cattle (CI), is considered to be of dietetic origin. Several nutritional factors have been investigated as possible causes, including pasture micronutrient imbalances. The present study includes the assessment of microelement levels in liver and pasture samples from CI farms in central-westem and northem Brazil. Copper, molybdenum, cobalt, zinc, manganese and iron levels were determined in 83 liver samples, of which 61 were from CI animals, 17 from healthy and 4 from recovered ones. The 17 healthy bovines were also from farms positive for CI and the 4 recoverd bovines had been transferred to CI negative farms. Copper, molybdenum, sulphur, zinc, manganese and iron were analysed in 76 pasture samples, 48 from CI positive and 28 from CI negative farms. Results indicate low levels of copper in liver samples of both the diseased and healthy animals. High levels of zinc found in the livers of CI animals probably reflect their poor condition. Analysis of Cu, Mo and S in pasture samples indicate a possible influence of sulphur concentration on copper availability. It was concluded that a copper deficiency exists in the pastures where most samples were obtained, independent of the occurrence of CI in the animals. This copper deficiency, predominant in areas of fertile soils, is probably related to a Cu-Mo-S interaction and is not associated with the occurrence of CI.
Abstract in Portuguese:
A "cara inchada" dos bovinos (CI) é considerada como doença peridentária de origem alimentar. Várias hipóteses foram aventadas, levando em conta um possível desequilíbrio de microelementos na dieta animal. No presente estudo foram determinadas as concentrações de microelementos em amostras de fígado e pastagens de fazendas onde ocrre a CI, nas regiões Centro-Oeste e Norte do Brasil. Teores de cobre, molibdênio, cobalto, zinco, manganês e ferro foram dosados em 83 amostras de fígado bovino, sendo 61 amostras de animais afetados pela CI, 17 de animais sadios e 4 de animais curados. Os 17 animais sadios eram também de fazendas CI-positivas e os 4 animais curados tinham sido transferidos para fazendas indenes. Foram coletadas 48 amostras de pastos onde ocorreu a CI, e 28 de pastegens indenes. Os teores de cobre, molibdênio, enxofre, manganês e ferro foram analisados. Os resultados mostraram teores baixos de cobre tanto nos fígados de bovinos com CI, como nos bovinos sadios. Teores altos de zinco foram encontrados nos fígados dos bovinos com CI, provavelmente resultantes do mau estado nutricional dos animais. Os teores de cobre, molibdênio e enxofre encontrados nas amostras de pastagens mostraram a possível influência da concentração do enxofre sobre a disponibilidade do cobre. Concluiu-se que existe deficiência de cobre na região de onde a maioria das amostras foram coletadas, independente da ocorrência da CI. Esta deficiência, predominantemente nas regiões de terras férteis, está provavelmente relacionada à interação Cu-Mo-Se não é fator desencadeador da CI nos bovinos.
Abstract in English:
Rabbits of both sexes were uosed daily either orally or intravenously with an aqueous extract of Solanum malacoxylon equivalent to 100 mg of the dried leaves of the plant per kilogram of body weight. The rabbits developed a gastropathy associated with loss of appetite, depression and diarrhea. All rabbits were necropsied within 14 days after treatment. Gross lesions consisted of hyperemia and edema of the mucosa with occasional hemorrhages and necrotic foci in the fundus region of the stomach; white streaks could be observed through its serosal surface. Slicing of these areas revealed hard, granular and dry mineral deposits. The main microscopic lesions consisted of marked mineralization of the muscle layers of the stomach and arterial walls, edema of the lamina propria and submucosa and hemorrhages in the mucosa. Nurnerous multinucleated giant cells were observed in the gastric mucosa, some of which containing mineral deposits in their cytoplasm. Early changes were observed by electron microscopical examination in the smooth muscle cells of the muscle layers, muscularis mucosae and lamina propria of the stomach and of the arterial walls. The morphological changes in the smooth muscle cells could possibly result as an expression of genes activated by 1,25 (OH)2D3 contained in the plant. In the more advanced stages these modified muscle cells suffered degeneration, necrosis and mineralization. In the extracellular matrix calcium cristals were observed associated with membrane-bound cellular fragments which varied in size rrom 200nm to 1 μm. These were interpreted as matrix vesicles. The multinucleated giant cells contained needle-like mineral deposits resembling apatite cristals which were found loose in their cytoplasm as endocellular products. Rarely these deposits were membrane-bound. Affected mitochondria had granular mineral precipitations on the cristae which suggests this organelle as the initial site of calcium precipitation in the giant cells. This type of giant cells was also observed in the mucosa of the stomachs which showed no calcification.
Abstract in Portuguese:
Trinta coelhos jovens de ambos os sexos foram dosificados por via oral ou por via endovenosa com extrato aquoso de Solanum malacoxylon equivalente a 100 mg de folhas dessecadas por kg de peso vivo. Os animais desenvolveram uma gastropatia com sintomas de anorexia, depressão e diarréia; todos os animais, mortos espontaneamente ou sacrificados, foram necropsiados em um período de até 14 dias após a administração do extrato. Foram feitos estudos de microscopia ótica e eletrônica de transmissão em espécimes do estômago. As lesões macroscópicas observadas nos animais intoxicados consistiram em hiperemia e edema da mucosa gástrica, ocasionais áreas de necrose na mucosa fúndica e estriações esbranquiçadas nas capas musculares, visíveis através da serosa. O corte sobre estas áreas revelou depósitos minerais de aspecto granular, secos e de consistência dura. As principais lesões microscópicas consistiram de uma marcada mineralização das camadas musculares do estômago e das paredes arteriais, edema da lâmina própria, particularmente da zona foveolar e da submucosa e hemorragias capilares na mucosa. Um grande número de células gigantes multinucleadas foram observadas na mucosa, algumas das quais continham minerais no seu citoplasma. As alterações ultraestruturais apareceram precocemente nas células musculares lisas e se caracterizaram por dilatação do retículo endoplasmático, aumento do número de mitocôndrias, diminuição das vesículas pinocitóticas das miofibrilas e densificações citoplasmáticas. Estas alterações morfológicas poderiam ser o resultado da expressão de gens ativados pelo l .25(OH)2D3 contido na planta. Na matriz extracelular foram observados cristais de cálcio associados a fragmentos celulares recobertos por membranas de tamanhos variáveis - entre 200 nanômetros e um micrômetro, interpretadas como vesículas matriciais. As células gigantes presentes em abundância na lâmina própria exibiam depósitos minerais em forma de agulhas, em alguns casos rodeados por membranas e, em outros, no interior do citoplasma como um produto endocelular. As mitocôndrias afetadas apresentavam depósitos minerais de aspecto granular sobre as cristas. Este tipo celular também foi observado na mucosa de estômagos que até o momento não tinham sofrido o processo de calcificação.
Abstract in English:
Mille samples from tbree goat breads (Dusk Alpine, Saanem and Toggenburg) with milk production averaging 2.66 kg/day and from crossbred goats were examined during 12 months for physic-chemical features. The results for individual milk and the mixture were respectively: density 1,030.5 and 1,033.5 at 15ºC; acidity 15.67 and 15,84°D; average percentage of fat 4.00 and 4.1 %; total dry extract 12.42 and 12.95%; fatty dry extract 8.83 and 8.73%; cryoscopic indexes -0.569 and -0.585ºC. The average percentage of chlorides was normal (0.21 and 0.19%); lactose 3.27 and 3.42%; caseíne (PTN) 2.68 and 2.52%; total proteine (PTN) 3.59 and 3.43%. The results obtained with milk from goats with mastitis showed the following alterations caused by experimental infection by Staphylococcus aureus: lowered values for density (1,022.5 and 1,023.0 at 15ºC) and acidity (14.50 and 6.1 ºD); increased values for chlorides (0.34 and 0.39%); and reduced values for lactose (1.00 and 1.12%).
Abstract in Portuguese:
Amostras de leite de cabras de três raças selecionadas (Parda Alpina, Saanem e Toggenburg) com produtividade média de 2,66 kg/ dia e amostras de leite de cabras mestiças, foram examinados durante 12 meses, quanto às características físico-químicas, obtendo-se limites para o leite individual e de mistura, respectivamente, relativos à densidade entre 1.030,5 a 1.033,5 a 15ºC; a acidez entre 15,67 e 15,84°D; aos percentuais médios de gordura 4,00 e 4,1 %; ao extrato seco total entre 12,42 e 12,95%; ao extrato seco desengordurado entre 8,83 e 8,73%; aos índices criosc6picos entre -0,569 e -0,585ºC. As médias anuais referentes a porcentagem de cloretos se apresentaram dentro de limites discretamente acima da normalidade (0,21 e 0,19%); a lactose entre 3,27 e 3,42%; a caseína (PTN) entre 2,68 e 2,52% e o PTN total entre 3,33 e 3,43%; O leite proveniente de cabras com mastite, provocada experimentalmente com Staphylococcus aureus, apresentou alterações quanto à densidade (1.022,5 a 1.023,0 a 15ºC) e acidez (6,1º a 14,50°D); cloretos bastante aumentados (0,39 e 0,34%), e a lactose com valores bastante reduzidos (1,00 e 1,12%).
Abstract in English:
Aqueous and hydroalcoholic extracts of Ateleia glazioviana Baill. leaves, of Tetrapterys multiglandulosa Adr. Juss. aerial parts, of Dimorphandra mollis Benth. pods, and of Enterolobium contortisiliquum (Vell.) Morong. fruits were studied for their potential abortive and/or infertilizing activity on pregnant albino rats. These plants are among those which farmers suspect to induce abortion in cattle. Extracts were prepared from the dried (at room temperature) finely chopped plant material and given to rats daily, from the first until the last day of pregnancy, per os, at doses of the dried plant material equivalent to the administration of 10 g.kg-1 (aqueous extract) or 2 g.kg·1 (hydroalcoholic extract in proportion of 2: 1). A. glazioviana leaves, in aqueous extract, induced 100% embryonic mortality and resorption (no rats were born, no pregnant rats carne to labour); two treated rats died before the 22nd pregnancy day. At necropsies the fetus were amorphous hemorrhagic masses in decomposition undergoing resorption. T. multiglandulosa aqueous extract induced resorption (9 out of 42 embryos), stillbirth (26 out of 33 fetus), perinatal death (7 rats born alive died 72 h or less after birth) and reduction of natality rate to 21 %. Similar findings were obtained with the hydroalcoholic extract. D. mollis hydroalcoholic extract reduced the number of embryonic implants and consequently the number of offspring, but did not affect the other reproductive parameters. E. contortisiliquum hydroalcoholic extract was less toxic: resorption occurred in 3 out of 71 embryos, and stillbirth in 2 out of 68 fetuses. Other reproductive parameters were not significantly affected. All extracts reduced the rats weight. The aqueous extract of A. glazioviana was the most potent reducing the weight by 27.1 % in relation to the 1st day of pregnancy. It is concluded that leaves from A. glazioviana and aerial parts of T. multiglandulosa contain active substances which are able to affect reproductive parameters of pregnant rats in accordance with farmers' suspitions, and also cause a toxic systernic effect. The pods of D. mollis and fruits of E. contortisiliquum, in spite of reducing the ponderal development during pregnancy, induced only a small interference on reproductive parameters.
Abstract in Portuguese:
Avaliaram-se a atividade abortiva e infertilizante e o desenvolvimento ponderal de ratas gestantes tratadas com extratos aquosos e hidroalcoó1icos das folhas de Ateleia glazioviana Baill. (timbó de palmeira), das partes aéreas de Tetrapterys multiglandulosa Adr. Juss. (cipó-ruão, cipó-preto ou cipó-vermelho) e dos frutos de Dimorphandra mollis Benth. (faveira) e Enterolobium contortisiliquum (Vell.) Morong. (timbaúva, orelha de macaco ou tamboril da mata) sobre as quais recai a suspeita de causar aborto em bovinos. Os extratos foram preparados a frio, pelo acréscimo de 1 1 do solvente a 100 g do material vegetal, seco ,a temperatura ambiente e moído, com agitação vigorosa por 5 min. no caso do aquoso e maceração de 72 h no hidroalcoólico (proporção 2:1) seguido de concentração até 100 ml a 55ºC e baixa pressão. As ratas foram tratadas por via oral, desde o primeiro dia até o último dia de gestação (22º dia em média) com: a) o extrato aquoso na dose equivalente à administração de 10 g.kg·1 do material vegetal (folha, planta total ou fruto) ou b) o extrato hidroalcoólico (2: 1) na base equivalente à administração de 2 g.kg-1 do material vegetal. Os resultados mostraram que: a) os extratos aquosos de A. glazioviana e T. multiglandulosa reduziram acentuadamente os parâmetros reprodutivos das ratas tratadas. Nenhuma das ratas tratadas com A. glazioviana chegou ao parto sendo que duas morreram antes do 22º dia (taxa de parto e taxa de natalidade nulas). À necrópsia os fetos revelaram-se como massas amorfas, hemorrágicas, em processo de decomposição/reabsorção; b) as ratas tratadas com o extrato aquoso de T. multiglandulosa apresentaram taxa de natalidade de 21 % (p < 0,05 em relação ao controle). Nove de 42 embriões foram reabsorvidos, a maioria dos filhotes nasceram mortos (26/33) e os demais (7/33) morreram em até 72 h após o parto; c) os extratos aquosos de D. mollis e E. contortisiliquum não alteraram os parâmetros reprodutivos em relação aos animais controle; d) os extratos hidroalco6licos de D. mollis e de T. multiglandulosa reduziram, discreta mas significativamente (p < 0,05) o número médio de filhotes nascidos. O de T. multiglandulosa provocou, ainda, 5/85 natimortos e 3/80 mortes perinatais. Os demais parâmetros reprodutivos não foram afetados significativamente; e) as ratas tratadas com o extrato hidroalcoólico de E. contortisiüquum apresentaram 3 reabsorções dos 71 implantes, 2 natimortos dentre 68 filhotes nascidos mas, sem afetar significativamente os parâmetros reprodutivos e, afinal, f) o desenvolvimento ponderal das ratas no período de gestação foi menor, em todo os grupos tratados com extratos, independente da natureza aquosa ou hidroalcoólica, quando comparado com o desenvolvimento observado nas respectivas ratas controle. O efeito mais acentuado foi verificado nas ratas tratadas com o extrato aquoso de A. glazioviana, as quais perderam 27;1 % da massa corporal que tinham no início da gestação. Conclui-se que: a) nas folhas de A. glazioviana e nas partes aéreas de T. multiglandulosa há substâncias ativas capazes de afetar intensamente a performance reprodutiva de ratas mas, de forma inespecífica pois que o desenvolvimento ponderal dos animais também foi comprometido; b) nos frutos de D. mollis e E. contortisiliquum as substâncias ativas presentes e extraídas com àgua e solvente hidroalcoólico nas doses empregadas só afetam discretamente a performance reprodutiva, embora comprometem o desenvolvimento ponderal das ratas em gestação e c) ressalvadas as diferenças nas especies envolvidas, os resultados indicam a procedência das suspeitas de ação abortiva e/ou infertilizante de A. glazioviana e T. multiglandulosa levantadas por criadores de bovinos, mas não confirmam as suspeitas sobre D. mollis e E. contortisiliquum.
Abstract in English:
Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was developed for detection of botulinum type D toxin. The double antibody sandwich ELISA was performed with reference to botulinum type D antitoxin (Statens Seruminstitut, Denmark) as in the solid phase, to sensitize plastic surface, as in the production of the immunoenzymatic conjugate. The sensitivity of ELISA was evaluated by using various dilutions of botulinum type D toxin added to liquid culture or a pool of normal bovine serum. The reactivity was, respectively, 15.6 LD50\ml and 31.2 LD50\ml for mice, with absorbance measured spectrophotometrically at 450 nm using an ELISA microreader. The specificity was demonstrated by the absence of reactivity with botulinum type A, B and E, tetanic and diphteric toxins. However, botulinum type C toxin indicated a partial cross-reactivity dueto comparable common antigenic determinants between type C and D toxins. Considering the results presented in this paper it can be concluded that the assay is particulary useful as a sensitive, fast and efficient screening method for detection of botulinum type D toxin, but it has the sarne limitations for the direct diagnosis of botulism in cattle as encountered with the bioassay in mice, because of the low concentration of circtilating toxin.
Abstract in Portuguese:
Foi desenvolvido um teste imunoenzimático (ELISA) capaz de detectar toxina botulínica tipo D. A técnica empregada foi a de Duplo Anticorpo (ELISA "Sandwich") utilizando-se antitoxinas botulínicas tipo D de referência (Statens Seruminstitut, Dinamarca) tanto na fase de sensibilização das microplacas de polivinilcloreto como para a produção do conjugado imunoenzimático (antisoro botulínico tipo D ligado à peroxidase). A sensibilidade do teste foi verificada através de titulações de toxina botulínica tipo D em fluidos de cultura e adicionada a "pool" de soro bovino normal, resultando em reatividade correspondendo respectivamente a 15,6 DL50\ml e 31,2 DL50\ml para camundongos, determinada espectrofotometricamente em leitor de microplacas. A especificidade, por sua vez, foi demonstrada pela ausência de reatividade com os diferentes tipos de toxinas botulínicas A, B e E, toxinas tetânica e diftérica. Entretanto, foi observado reatividade cruzada parcial com a toxina botulínica tipo C, devido às semelhanças antigênicas entre as toxinas tipos C e D. A partir dos resultados obtidos, concluiu-se que o referido teste pode ser utilizado como um método de triagem, sensível, rápido e eficaz para a detecção de toxina botulínica tipo D, embora, especificamente para o diagnóstico direto do botulismo do bovino, o método tem as mesmas limitações do bioensaio em camundongos por causa da baixa concentração de toxina circulante.