Abstract in English:
Scrapie is a disease in sheep that manifests with neurological signs and involves prion deposition in the central nervous system. This study aimed to describe an atypical case of scrapie in a sheep and to measure vacuolar changes in the central nervous system. A 3-year-old Dorper ram presented with kyphosis, difficulty standing still, fasciculations, proprioceptive deficits in the pelvic limbs, and a positive scratch test. The lymphoid tissue biopsy from the third eyelid and rectal mucosa, and the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) were positive for the scrapie isoform of the prion protein (PrPsc). Immunohistochemical and western immunoblot analyses were positive, and the ram genotype was naturally susceptible (ARQ/ARQ). A necropsy revealed no macroscopic changes. After fixation of the brain in 10% buffered formalin, eight serial transverse sections of the brain and one longitudinal section of the cerebellum were obtained. Histological measurement of the number of vacuoles was performed for each region. The vacuoles were counted with a 40x objective, counting three to four randomly selected regions and obtaining the average. The degree of vacuolization was evaluated descriptively on a scale of 0 to 3. The second classification was performed based on the number of affected regions. Histopathological examination revealed multiple well-delimited, round vacuoles of varying sizes in the perikarya of neurons and neuroparenchyma. The areas with the highest average of vacuoles in neuroparenchyma were in the thalamus (average 8), medulla oblongata at the level of the obex (average 6.25) and colliculi (5.5). In neurons, the highest average was observed in the thalamus (average 1), the rostral colliculi (average 0.5), and the medulla oblongata at the level of the obex (average 0.25). This study describes a case of scrapie in a sheep with atypical clinical signs, highlighting the need to consider scrapie when any neurological signs appear. Vacuolizations were most pronounced in the thalamus, rostral colliculi and medulla oblongata at the level of the obex, with degrees of severity ranging from moderate to severe. The distribution of vacuolization, predominantly in the neuropil, reinforces the neuropathological characteristics associated with scrapie. The ARQ/ARQ genotype, linked to susceptibility, was identified, and diagnostic analyses confirmed PrPsc deposition in the brain. These findings highlight the importance of genetic screening and early diagnosis to help control scrapie in sheep populations.
Abstract in Portuguese:
Scrapie é uma doença de ovinos que apresenta sinais neurológicos e envolve a deposição de príons no sistema nervoso central. Este estudo teve como objetivo descrever um caso atípico de scrapie em um carneiro e realizar a mensuração de alterações vacuolares no sistema nervoso central. Um carneiro Dorper de três anos apresentou cifose, dificuldade de manter-se em estação, fasciculações, déficits proprioceptivos dos membros pélvicos e com teste de coçar positivo. A biópsia do tecido linfoide da terceira pálpebra e da mucosa retal, o ensaio imunoenzimático (ELISA) foi positivo para a isoforma de scrapie da proteína príon (PrPsc). As análises imuno-histoquímica e western immunoblot foram positivas e o genótipo do carneiro foi considerado naturalmente suscetível (ARQ/ARQ). Na necropsia não houve alterações macroscópicas. Após a fixação do cérebro em formalina tamponada a 10%, foram obtidas oito secções transversais seriadas do cérebro e uma secção longitudinal do cerebelo. Foi realizada a mensuração histológica do número de vacúolos para cada região. Os vacúolos foram contados com uma objetiva de 40x, contando de três a quatro regiões selecionadas aleatoriamente e obtendo a média. O grau de vacuolização foi avaliado descritivamente em uma escala de 0 a 3. A segunda classificação foi realizada com base no número de regiões afetadas. O exame histopatológico revelou múltiplos vacúolos redondos, bem delimitados, de tamanhos variados nos pericários dos neurônios e neuroparênquima. As áreas com maior média de vacúolos no neuroparênquima foram no tálamo (média 8), medula oblonga no nível do óbex (média 6,25) e coliculos (5,5). Nos neurônios, a maior média foi observada no tálamo (média 1), colículos rostrais (média 0,5) e medula oblonga no nível do obex (média 0,25). Este relato descreve um caso de scrapie em um carneiro com sinais clínicos atípicos, destacando a necessidade de considerar scrapie quando sinais neurológicos aparecem. As vacuolizações foram mais pronunciadas no tálamo, colículos rostrais e medula oblongata no nível do óbex, com graus de gravidade variando de moderado a grave. A distribuição da vacuolização, predominantemente no neuropilo, reforça as características neuropatológicas associadas ao scrapie. O genótipo ARQ/ARQ, ligado à suscetibilidade, foi identificado, e análises diagnósticas confirmaram a deposição de PrPsc no cérebro. Essas descobertas destacam a importância da triagem genética e do diagnóstico precoce para auxiliar a controlar o scrapie em populações de ovinos.
Abstract in English:
ABSTRACT.- Silva T.G.F.S.L., Oliveira F.M., Fracaro L., Silva C.E., Rebelatto C.L.K., Pimpão C.T., Brofman P.R.S. & Vill Junior J.A. 2018. [Sensory, motor and cystometric evaluation of dogs with chronic spinal cord injury submitted to mesenchymal stem cell transplantation.] Avaliação sensitiva, motora e cistométrica de cães com lesão medular crônica, submetidos ao transplante de células-tronco mesenquimais derivadas de tecido adiposo. Pesquisa Veterinária Brasileira 38(10):1955-1965. Departamento de Medicina Veterinária, Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Rua Imaculada Conceição 1155, Prado Velho, Curitiba, PR 80215-901, Brazil. E-mail: thais.gabi.ferreira@gmail.com
The use of stem cells in injury repair has been extensively investigated. In this study, we examined the therapeutic effects of two transplants (12x106 cells/transplantation) of allogenic adipose-derived stem cells (ASCs) in 11 dogs with chronic spinal cord injury. ASC were cultured in vitro, proliferation and cell viability were evaluated. Cell suspensions were prepared and administered in the intradural space, with a one-week interval between transplants. The animals were submitted to clinical, laboratory, radiographic, tomographic, sensory, motor and cystometric evaluations. Most of the animals were not a breed defined (63.63%), the same proportion for females affected, predominance of vertebral subluxation fracture was observed (81.81%). Before and after the transplants no hematological changes were observed, three animals (27.27%) presented bacterial cystitis, and in relation to motor, cystometry and sensitivity, no improvement was observed; the rates were maintained before and after transplants, predominance of nociceptive absence in most animals (72.73%), and paraplegia and urinary incontinence in the same proportion. In this study it was concluded that the use of ADSCs for the treatment of dogs with chronic spinal cord injury is safe, with a slight improvement in bladder function, but without significantly clinical improvement.
Abstract in Portuguese:
RESUMO.- Silva T.G.F.S.L., Oliveira F.M., Fracaro L., Silva C.E., Rebelatto C.L.K., Pimpão C.T., Brofman P.R.S. & Vill Junior J.A. 2018. [Sensory, motor and cystometric evaluation of dogs with chronic spinal cord injury submitted to mesenchymal stem cell transplantation.] Avaliação sensitiva, motora e cistométrica de cães com lesão medular crônica, submetidos ao transplante de células-tronco mesenquimais derivadas de tecido adiposo. Pesquisa Veterinária Brasileira 38(10):1955-1965. Departamento de Medicina Veterinária, Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Rua Imaculada Conceição 1155, Prado Velho, Curitiba, PR 80215-901, Brazil. E-mail: thais.gabi.ferreira@gmail.com
A utilização de células-tronco na reparação de lesões tem sido extensivamente investigada. Neste estudo, examinamos os efeitos terapêuticos de dois transplantes (12x106 céls/transplante) de células-tronco mesenquimais alogênicas derivadas do tecido adiposo (CTDAs) em 11 cães com lesões crônicas traumáticas toracolombares da medula espinhal. As CTDAs foram foram cultivadas in vitro, a proliferação e a viabilidade foram avaliadas. As suspensões foram expandidas e administradas no espaço intradural com intervalo de uma semana entre transplantes. Os cães foram submetidos à avaliações clínicas, laboratoriais, radiográficas, tomográficas, sensitivas, motoras e cistométricas. A maioria dos animais não tinha raça definida (63,63%), mesma proporção para o acometimento de fêmeas e foi observada predominância de fratura com subluxação vertebral (81,81%). Na comparação dos cães pré e pós-transplante não foram observadas alterações hematológicas e três animais (27,27%) apresentaram cistite bacteriana. Em relação a sensibilidade, motricidade e cistometria, também não houve alterações significativas dos índices antes e pós transplantes, sendo observado a ausência nociceptiva na maioria dos animais (72,73%), paraplegia e incontinência urinária na mesma proporção. Neste estudo concluiu-se que o protocolo utilizado de transplante de CTDAs, demonstrou ser um tratamento seguro para cães com lesão medular crônica, com melhora discreta da funcionalidade vesical, porém sem melhora clínica significativa.
Abstract in English:
This study aimed to evaluate the effects of dantrolene (DAN) and mesenchymal stem cells (MSCs) in acute spinal cord injury (SCI). Sixty Wistar rats were divided into groups MSCs, MSCs + DAN, DAN, trauma and placebo (TP) and no trauma and placebo (STP). Laminectomy was performed at T12 level in all animals, followed by a weight-drop model of SCI, except for the STP group. An hour later, the MSCs + DAN and DAN groups received 10mg/kg of DAN. After seven days, the MSCs and MSCs + DAN groups received 1x106 cells intravenously. Behavioral tests were performed to assess functional recovery for 28 days. Traumatized animals showed paraplegia. There was a significant improvement in groups MSCs, DAN and MSCs + DAN compared to TP (p<0.05). It was concluded that DAN and MSCs for the treatment of SCI in rats have neuroprotection effect and promote functional neurological improvement.
Abstract in Portuguese:
Objetivou-se avaliar o efeito do dantrolene (DAN) e das células-tronco mesenquimais (CTM) no trauma espinhal agudo (TEA). Sessenta ratos Wistar foram divididos nos grupos CTM, DAN + CTM, DAN, trauma e placebo (TP) e sem trauma e placebo (STP). Realizou-se laminectomia de T12 em todos os grupos, seguida de TEA contusivo ∕ compressivo, com exceção do grupo STP. Uma hora depois, os grupos DAN + CTM e DAN receberam 10mg/kg de DAN. Após sete dias os grupos CTM e DAN + CTM receberam 1x106 células, por via intravenosa. Testes comportamentais foram realizados para avaliar a recuperação funcional durante 28 dias. Os animais traumatizados apresentaram paraplegia. Houve melhora funcional significativa nos grupos tratados com CTM, DAN ou associação DAN + CTM em comparação ao grupo TP (p<0,05). Conclui-se que o DAN e as CTM para tratamento de TEA em ratos apresentam efeitos neuroprotetores e promovem melhora neurológica funcional.