PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- Crepaldi C.R., Merighe G.K.F., Laure H.J., Rosa J.C., Meirelles F.V. & Cerqueira César M. 2013. [Isolation and culture of neurons and neurospheres from chicken brain cortex.] Isolamento e cultivo de neurônios e neuroesferas de córtex cerebral aviar. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(Supl.1):45-50. Laboratório de Neurociência e Proteômica, Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos, Universidade de São Paulo, Av. Duque de Caxias Norte 225, Pirassununga, SP 13635-900, Brazil. E-mail: mccesar@usp.br Cell culture methods are used for studies of protein interactions in neural cells, helping to detect the interactome of proteins linked to generation of central nervous system diseases. For this reason, neural cells and neurospheres isolated from cortical chicken brain are a current model for studies of neurological diseases, such as epilepsy. Chicken brain has key characteristics on its proteome, with a differential expression of proteins linked to energy metabolism, some of them (VDAC 1 and VDAC 2) play an important role in understanding mechanism of refractory epilepsy. Using the methods described, we found neurospheres, in which cells grow in structures with the ideal diameter of 100-200µm within seven days after isolation. Neurospheres differentiation was obtained after adhesion of these cells to surfaces coated with poly-D-Lysine, detected by migration of fibers inside them. Unlike neurospheres, neurons extended neurites after 11 days of isolation. Here we describe a method to isolate and culture neurons and neurospheres from chicken cerebral cortex. Such “in vitro” model can be utilized on studies of neuronal protein differential expression and interaction. Cultures of isolated neurons represent an accessible model on studies of apoptosis and channel blockers of key proteins linked to brain metabolism.

• Brain cortex neuron neurosphere córtex cerebral neurônio neuroesferas

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Crepaldi C.R., Merighe G.K.F., Laure H.J., Rosa J.C., Meirelles F.V. & Cerqueira César M. 2013. [Isolation and culture of neurons and neurospheres from chicken brain cortex.] Isolamento e cultivo de neurônios e neuroesferas de córtex cerebral aviar. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(Supl.1):45-50. Laboratório de Neurociência e Proteômica, Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos, Universidade de São Paulo, Av. Duque de Caxias Norte 225, Pirassununga, SP 13635-900, Brazil. E-mail: mccesar@usp.br Métodos de cultivo celular são convenientes na realização de análises funcionais de alterações/interações protéicas das células neuronais, auxiliando a decifrar o interactoma de proteínas chaves na neurogênese de doenças do Sistema Nervoso Central. Por esse motivo, culturas de neurônios e neuroesferas isolados do córtex cerebral aviar representam um modelo acessível para o estudo de diversas doenças neurológicas, tal como a epilepsia. A espécie aviar apresenta peculiaridades em seu proteoma neuronal, visto a presença de uma expressão diferenciada de proteínas chaves no metabolismo energético cerebral, algumas destas (VDAC1 e VDAC2) desempenham papel importante na compreensão do mecanismo da epilepsia refratária. A metodologia estabelecida no presente estudo obteve cultivo de neuroeferas, onde as células cresceram tipicamente em aglomerados atingindo, dentro de 7 dias, o diâmetro ideal de 100-200 µm. A diferenciação celular das neuroesferas foi obtida após a aderência destas às placas tratadas com poli-D-lisina, evidenciada pela migração de fibras do interior da neuroesfera. Ao contrário das neuroesferas, os neurônios em cultivo extenderam seus neuritos após 11 dias de isolamento. Tal modelo in vitro pode ser utilizado com sucesso na identificação das variáveis neuroproteômicas, propiciando uma avaliação global das alterações dinâmicas e suas interações protéicas. Tal modelo pode ter aplicações em estudos dos efeitos de indutores da morte celular e bloqueadores de canais de membrana mitocondriais em proteínas chaves do metabolismo energético cerebral.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Borges K.A., Furian T.Q., Borsoi A., Moraes H.L.S., Salle C.T.P. & Nascimento V.P. 2013. Detection of virulence-associated genes in Salmonella Enteritidis isolates from chicken in Southern Brazil. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(12):1416-1422. Centro de Diagnóstico e Pesquisa em Patologia Aviária, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Avenida Bento Gonçalves 8824, Porto Alegre, RS 91540-000, Brazil. E-mail: karen.borges@ufrgs.br Salmonella spp. are considered the main agents of foodborne disease and Salmonella Enteritidis is one of the most frequently isolated serovars worldwide. The virulence of Salmonella spp. and their interaction with the host are complex processes involving virulence factors to overcome host defenses. The purpose of this study was to detect virulence genes in S. Enteritidis isolates from poultry in the South of Brazil. PCR-based assays were developed in order to detect nine genes (lpfA, agfA, sefA, invA, hilA, avrA, sopE, sivH and spvC) associated with the virulence in eighty-four isolates of S. Enteritidis isolated from poultry. The invA, hilA, sivH, sefA and avrA genes were present in 100% of the isolates; lpfA and sopE were present in 99%; agfA was present in 96%; and the spvC gene was present in 92%. It was possible to characterize the isolates with four different genetic profiles (P1, P2, P3 and P4), as it follows: P1, positive for all genes; P2, negative only for spvC; P3, negative for agfA; and P4, negative for lpfA, spvC and sopE. The most prevalent profile was P1, which was present in 88% of the isolates. Although all isolates belong to the same serovar, it was possible to observe variations in the presence of these virulence-associated genes between different isolates. The characterization of the mechanisms of virulence circulating in the population of Salmonella Enteritidis is important for a better understanding of its biology and pathogenicity. The frequency of these genes and the establishment of genetic profiles can be used to determine patterns of virulence. These patterns, associated with in vivo studies, may help develop tools to predict the ability of virulence of different strains.

• Salmonella Enteritidis

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Borges K.A., Furian T.Q., Borsoi A., Moraes H.L.S., Salle C.T.P. & Nascimento V.P. 2013. Detection of virulence-associated genes in Salmonella Enteritidis isolates from chicken in Southern Brazil. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(12):1416-1422. Centro de Diagnóstico e Pesquisa em Patologia Aviária, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Avenida Bento Gonçalves 8824, Porto Alegre, RS 91540-000, Brazil. E-mail: karen.borges@ufrgs.br Salmonella spp. estão entre os principais agentes causadores de doenças transmitidas por alimentos, e o sorovar Salmonella Enteritidis é o mais frequentemente isolado no mundo. A virulência de Salmonella spp. e a sua interação com o hospedeiro são processos complexos que envolvem fatores de virulência para sobreviver às defesas do hospedeiro. O objetivo deste estudo foi detectar genes de virulência em cepas de S. Enteritidis isoladas a partir de fontes avícolas no sul do Brasil. Ensaios de PCR foram desenvolvidos para a detecção de nove genes (lpfA, agfA, sefA, invA, hilA, avrA, sopE, sivH e spvC) associados à virulência em oitenta e quatro amostras de S. Enteritidis. Os genes invA, hilA, sivH, sefA e avrA estavam presentes em 100% dos isolados; lpfA e sopE estavam presentes em 99%; agfA em 96%; e o gene spvC estava presente em 92%. Foi possível caracterizar os isolados em quatro perfis genéticos distintos (P1, P2, P3 e P4), sendo P1 positivo para todos os genes; P2 negativo apenas para spvC; P3 negativo para agfA e P4 negativo para lpfA, spvC e sopE. O perfil de maior frequência foi P1, presente em 88% dos isolados. Apesar de todos os isolados pertencerem ao mesmo sorovar, foi possível observar variações na presença de genes associados à virulência entre os mesmos. A caracterização dos mecanismos de virulência circulantes na população de Salmonella Enteritidis é importante para um maior entendimento da sua biologia e patogenicidade. A frequência destes genes e o estabelecimento de perfis genéticos podem ser utilizados para determinar os padrões de virulência dos isolados. Estes padrões, associados a estudos in vivo, podem auxiliar na elaboração de ferramentas que permitam predizer a capacidade de virulência das diferentes cepas.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Guerra N.R., Monteiro M.F.M., Sandes H.M.M., Cruz N.L.N., Ramos C.A.N., Santana V.L.A., Souza M.M.A. & Alves L.C. 2013. [Detection of IgG antibodies against Trypanosoma vivax in cattle by indirect immunofluorescence test.] Detecção de anticorpos IgG anti-Trypanosoma vivax em bovinos através do teste de Imunofluorescência indireta. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(12):1423-1426. Laboratório de Doenças Parasitárias dos Animais Domésticos, Departamento de Medicina Veterinária, Universidade Federal Rural de Pernambuco, Rua Dom Manuel de Medeiros s/n, Dois Irmãos, Recife, PE 52171-900, Brazil. E-mail: leucioalves@gmail.com Trypanosoma vivax infects a wide range of wild and domestic ungulates, causing important losses for the livestock industry. The aim of the present study was to assess the detection of IgG antibodies against T. vivax in cattle from the state of Pernambuco, Brazil. Therefore, we analyzed 2.053 blood serum samples from cattle herds of municipalities in Pernambuco, what was made by Immunofluorescence Assay. The overall seroprevalence of IgG antibodies against T. vivax in cattle was 13.93% (286/2053). The frequencies, by region, varied from 11.90% to 15.99%. Thus, the data obtained allowed to characterize the state of Pernambuco as an area of enzootic instability for T. vivax. The frequency herein reported (i.e., 13.93%) indicates that Pernambuco is an endemic area for T. vivax, this parasite being spread throughout the state.

• Trypanosoma vivax trypanosomiasis tripanossomíase

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Guerra N.R., Monteiro M.F.M., Sandes H.M.M., Cruz N.L.N., Ramos C.A.N., Santana V.L.A., Souza M.M.A. & Alves L.C. 2013. [Detection of IgG antibodies against Trypanosoma vivax in cattle by indirect immunofluorescence test.] Detecção de anticorpos IgG anti-Trypanosoma vivax em bovinos através do teste de Imunofluorescência indireta. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(12):1423-1426. Laboratório de Doenças Parasitárias dos Animais Domésticos, Departamento de Medicina Veterinária, Universidade Federal Rural de Pernambuco, Rua Dom Manuel de Medeiros s/n, Dois Irmãos, Recife, PE 52171-900, Brazil. E-mail: leucioalves@gmail.com Trypanosoma vivax infecta uma grande variedade de animais ungulados selvagens e domésticos, podendo causar grande impacto na produção de ruminantes. Este trabalho teve como objetivo avaliar a detecção de anticorpos IgG anti-Trypanosoma vivax em bovinos provenientes do estado de Pernambuco, Brasil. Para tanto, foram analisadas 2,053 amostras de soro sanguíneo de bovinos provenientes de rebanhos de municípios do estado de Pernambuco, os quais foram analisados através da Reação de Imunofluorescência Indireta. Das amostras testadas 13,93% (286/2.053) foram reagentes para anticorpos IgG anti-Trypanosoma vivax. As freqüências, por mesorregião, variaram de 11,90% a 15,99%. Assim, os dados obtidos permitiram a caracterização do estado de Pernambuco como uma área de instabilidade enzoótica e sugere que o estado Pernambuco é área endêmica para Trypanosoma vivax e este parasito está distribuído por todo o estado.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Cassenego A.P.V., Ellwanger J., d’Azevedo P.A., Ribeiro A.M.L., frazzon J. & frazzon A.P.G. 2013. [Virulence and biofilm formation by Enterococcus faecalis isolates from cloacal swabs of broilers infected with Eimeria spp.] Virulência e formação de biofilme microbiano por Enterococcus faecalis isolados de swabs cloacais de frangos de corte infectados com Eimeria spp. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(12):1433-1440. Departamento de Microbiologia, Instituto de Ciências Básicas da Saúde, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Rua Sarmento Leite 500, Porto Alegre, RS 90050-170, Brazil. E-mail: ana.cassenego@ufrgs.br The microbiota dynamics in the gastrointestinal tract (GT) of animals can be disrupted by pathogens, such as Eimeria spp. Enterococci are saprophytic bacteria that colonize the GT of mammals and birds. The influence on the intestinal microbiota is related to the adaptive capacity of bacteria to adhere to host cells and colonize the mucosal cells. The aim of this study was to analyze the frequency of virulence genes ace, agg and bopABCD operon in Enterococcus faecalis isolated from cloacal swabs of broilers challenged with Eimeria spp. and fed with a standard diet supplemented or not with anticoccidial (monensin), and, also to evaluate for the ability of these strains to form biofilms under in vitro conditions. A total of 70 E. faecalis were selected and the agg gene was more frequent in strains isolated from the broilers treated with anticoccidial (92.3%) when compared to the group that not received anticoccidial (70.5%). On the other hand, the ace and bopABCD operon genes showed no significant difference between the two groups of broilers (P>0.005). The E. faecalis isolated from the broilers treated with anticoccidial showed a higher frequency of strong biofilm formation when growing in medium supplemented with glucose (92.3-88.5%) and urine (77%) when compared with enterococci isolated from broilers that not received anticoccidial. It was observed that E. faecalis isolated from broilers treated with anticoccidial showed a higher frequency of virulence factors genes and stronger biofilms formation, indicating better adaptation of the isolates in healthy intestinal environment.

• Enterococcus faecalis Eimeria spp.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Cassenego A.P.V., Ellwanger J., d’Azevedo P.A., Ribeiro A.M.L., frazzon J. & frazzon A.P.G. 2013. [Virulence and biofilm formation by Enterococcus faecalis isolates from cloacal swabs of broilers infected with Eimeria spp.] Virulência e formação de biofilme microbiano por Enterococcus faecalis isolados de swabs cloacais de frangos de corte infectados com Eimeria spp. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(12):1433-1440. Departamento de Microbiologia, Instituto de Ciências Básicas da Saúde, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Rua Sarmento Leite 500, Porto Alegre, RS 90050-170, Brazil. E-mail: ana.cassenego@ufrgs.br A dinâmica da microbiota no trato gastrointestinal (TG) de animais pode ser afetada por patógenos, tais como Eimeria spp. Os enterococos são bactérias saprófitas que colonizam o TG de mamíferos e aves. A influência sobre a microbiota intestinal está relacionada com a capacidade de adaptação das bactérias em se aderir às células hospedeiras e de colonizar as células das mucosas. O objetivo deste estudo foi analisar a frequência de genes de virulência ace, agg e operon do bopABCD em Enterococcus faecalis isolados de swabs cloacais de frangos de corte desafiados com Eimeria spp e alimentados com dietas padrões suplementadas ou não com anticoccidiano (monesina) e também avaliar a capacidade dessas cepas em formar biofilmes sob condições in vitro. Um total de 70 E. faecalis foram selecionadas e o gene agg foi mais freqüente em cepas isoladas de frangos de corte alimentados com anticoccidiano (92,3%) quando comparado ao grupo que não recebeu anticoccidiano (70,5%). Por outro lado, os genes ace e do operon bopABCD não demostraram nenhuma diferença significativa entre os dois grupos de frangos (P>0,005). Os E. faecalis isolados de frangos de corte alimentados com anticoccidiano demostraram uma maior frequência de fortes aderentes quando crescendo em meio suplementado com glicose (92,3-88,5%) e urina (77%), quando comparado com enterococos isolados de frangos que não receberam anticoccidiano. Observou-se que E. faecalis isolados de frangos tratados com anticoccidiano mostraram uma maior frequêencia dos genes dos fatores de virulência e de perfil de fortes formadores de biofilme, o que indica uma melhor adaptação dos isolados em ambiente intestinal saudável.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Berto B.P., Borba H.R., Lima V.M., Flausino W., Teixeira-Filho W.L. & Lopes C.W.G. 2013. Eimeria spp. from Japanese quails (Coturnix japonica): new characteristic features and diagnostic tools. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(12):1441-1447. Departamento de Biologia Animal, Instituto de Biologia, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropédica, RJ 23897-970, Brazil. E-mail: bertobp@ufrrj.br The Japanese quail Coturnix japonica originated from North Africa, Europe and Asia, is used worldwide as an experimental animal and model for aviculture. The current paper characterizes Eimeria bateri, Eimeria tsunodai and Eimeria uzura recovered from C. japonica. Based on the fact that quails have a global distribution, as are their coccidia, the findings of this study should provide the means for diagnosis of those Eimeria spp. in other regions and continents. Eimeria bateri showed the greatest intensity of infection and shed oocysts from the fourth day after infection; in contrast, E. tsunodai and E. uzura shed oocysts from the fifth day after infection. The three species shared a high degree of similarity and were all polymorphic. Yet, the application of line regressions, histograms and ANOVA provided means for the identification of these species. Finally, the algorithm was very efficient since verified that resultant values were not superimposed.

• Coccidiosis diagnostic Eimeria bateri Eimeria tsunodai Eimeria uzura coccidiose

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Berto B.P., Borba H.R., Lima V.M., Flausino W., Teixeira-Filho W.L. & Lopes C.W.G. 2013. Eimeria spp. from Japanese quails (Coturnix japonica): new characteristic features and diagnostic tools. [Eimeria spp. de codornas japonesas (Coturnix japonica): novas características e ferramentas de diagnóstico.] Pesquisa Veterinária Brasileira 33(12):1441-1447. Departamento de Biologia Animal, Instituto de Biologia, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropédica, RJ 23897-970, Brazil. E-mail: bertobp@ufrrj.br A codorna japonesa Coturnix japonica originária do norte da África, Europa e Ásia, é utilizada mundialmente como um animal experimental e modelo para avicultura. O presente trabalho caracteriza Eimeria bateri, Eimeria tsunodai e Eimeria uzura recuperadas de C. japonica. Baseado no fato de que as codornas têm uma distribuição global, como são os seus coccídios, os resultados deste estudo devem propiciar o diagnóstico destas Eimeria spp. em outras regiões e continentes. Eimeria bateri demonstrou a maior intensidade de infecção e eliminaram oocistos a partir do quarto dia após infecção, em contraste E. tsunodai e E. uzura eliminaram oocistos a partir do quinto dia após infecção. As três espécies foram morfometricamente semelhantes e polimórficas. No entanto, a aplicação da regressão linear, histogramas e ANOVA proveram meios para a identificação destas espécies. Finalmente, o algoritmo foi totalmente eficiente uma vez que valores resultantes não foram sobrepostos.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Camargo C.M.S., Duarte J.M.B., Fagliari J.J., Santana A.M., Simplício K.M.M.G & Santana A.E. 2013. Effect of sex and seasons of the year on hematologic and serum biochemical variables of captive brown brocket deer (Mazama gouazoubira). Pesquisa Veterinária Brasileira 33(11):1364-1370. Departamento de Clínica e Cirurgia, Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias, Universidade Estadual Paulista, Júlio de Mesquita Filho, Unesp-Jaboticabal, Via de Acesso Prof. Paulo Donato Castellane s/n, Jaboticabal, SP 14884-900, Brazil. E-mail: santana@fcav.unesp.br The Brown brocket deer (Mazama gouazoubira) is the most common free-living and captive deer in South America, especially in Brazil, and has great ecological and scientific significance. However, data on hematological and biochemical parameters in brown brocket deer are scarce. The goal of this study was to establish reference ranges for hematological and biochemical parameters of Mazama gouazoubira, comparing differences during the seasons of the year and between sex. Blood samples from ten adult healthy brown brocket deer (6 female and 4 male) were collected during daytime, monthly, during 12 months. The animals were maintained in individual stable, protected from noise and fed ad libitum with commercial ration and green fodder. For blood collection, animals were submitted to physical restrain for no longer than 2 minutes. The following parameters were determined: red blood cell count (RBC), haemoglobin concentration, packed cell volume (PCV), mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular haemoglobin (MCH), mean corpuscular haemoglobin concentration (MCHC), white blood cell count (WBC), platelet count, enzyme activity of alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST) and gamma-glutamyl transferase (GGT) and serum levels of alkaline phosphatase (ALP), creatine kinase (CK), total protein (TP), albumin, cholesterol, total calcium, ionic calcium, sodium, potassium, magnesium, triglycerides, creatinine and urea. Values were compared according to season and sex. RBC count, WBC count and MCV suggested seasonal influence. Haemoglobin concentration, PCV and MCV were influenced by sex. Serum concentration of total calcium, ionic calcium, sodium, potassium and magnesium were influenced by season. Serum magnesium was also influenced by sex. The blood parameters herein reported may be useful as reference values for diagnostic and prognostic purposes in captive brown-brocket deer.

• Brown brocket deer Mazama gouazoubira veado-catingueiro

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Camargo C.M.S., Duarte J.M.B., Fagliari J.J., Santana A.M., Simplício K.M.M.G & Santana A.E. 2013. Effect of sex and seasons of the year on hematologic and serum biochemical variables of captive brown brocket deer (Mazama gouazoubira). [Efeito do sexo e estações do ano sobre as variáveis hematológicas e bioquímico-séricas de veados-catingueiro (Mazama gouazoubira) criados em cativeiro.] Pesquisa Veterinária Brasileira 33(11):1364-1370. Departamento de Clínica e Cirurgia, Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias, Universidade Estadual Paulista, Júlio de Mesquita Filho, Unesp-Jaboticabal, Via de Acesso Prof. Paulo Donato Castellane s/n, Jaboticabal, SP 14884-900, Brazil. E-mail: santana@fcav.unesp.br O veado-catingueiro (Mazama gouazoubira) é o cervídeo de vida livre mais comum na América do Sul, especialmente no Brasil, e tem grande importância ecológica e científica. No entanto, dados sobre parâmetros hematológicos e bioquímicos nesta espécie animal são escassos. O objetivo deste trabalho foi estabelecer valores de referência hematológica e bioquímica do Mazama gouazoubira, comparando diferenças entre as estações do ano e entre sexo. Amostras sanguíneas de dez veados-catingueiros (6 fêmeas e 4 machos), todos adultos hígidos, foram mensalmente colhidas pela manhã, durante 12 meses, e prontamente analisadas. Os animais foram mantidos em baias individual, protegidos de barulho e alimentados ad libitum com ração comercial e forragem verde. Para obtenção das amostras, os animais foram submetidos à contenção física por, no máximo, 2 minutos. Os seguintes parâmetros foram determinados: Contagem total de hemáceas, concentração de hemoglobina, volume globular (VG), volume corpuscular médio (VCM), hemoglobina corpuscular média (HCM), concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM), contagem total de leucócitos, contagem de plaquetas, atividade das enzimas alanina aminotransferase (ALT), aspartato aminotransferase (AST), gama glutamiltransferase (GGT) e concentrações séricas de fosfatase alcalina (FA), creatino quinase (CK), proteína total (PT), albumina, colesterol, cálcio total, cálcio iônico, sódio, potássio, magnésio, triglicérides, creatinina e uréia. Os valores foram comparados de acordo com o sexo e sazonalidade. A contagem total de hemáceas, de leucócitos e VCM sugeriu influência das estações do ano sobre estes parâmetros. A concentração de hemoglobina, VG e VCM foram influenciados pelo sexo. Concentrações séricas de cálcio total, cálcio iônico, sódio, potássio e magnésio também foram influenciados pelas estações do ano. O teor sérico de magnésio sofreu influência, ainda, do sexo. Os parâmetros sanguíneos obtidos e aqui reportados podem ser úteis como valores de referência nesta espécie para fins diagnóstico e prognóstico.

Abstract in English:

ABTRACT.- Rodarte-Almeida A.C.V., Machado M., Baldotto S.B., Leigue dos Santos L., Lima L., Lange R.R., Froes T.R. & Montiani-Ferreira F. 2013. [The eye of the striped owl: morphologic observations, biometric findings and reference values for selected ophthalmic diagnostics tests.] O olho da coruja-orelhuda: observações morfológicas, biométricas e valores de referência para testes de diagnóstico oftálmico. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(10):1275-1289. Setor de Oftalmologia Veterinária, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal do Paraná, Rua dos Funcionários 1540, Cabral, Curitiba, PR 80035-050, Brazil. E-mail: acrodarte@gmail.com The investigation aimed to describe the most relevant morphological characteristics of the eyes of the striped owl (Asio clamator) and determine normal values for selected ophthalmic diagnostic tests. A total of 32 eyes of 16 young and adult free-ranging healthy striped owls of both sexes were investigated. Data of different morphological observations of the skull, eye globe and adnexa, clinical tests and parameters were collected, including Schirmer Tear Test (STT), normal conjunctival bacterial microbiota, esthesiometry, intraocular pressure (IOP), central corneal thickness (CCT), horizontal palpebral fissure length, horizontal, corneal diameter and fundoscopy. Twenty two types of bacteria were identified in twelve owls, the most frequent bacteriae were the Gram-positive. The mean value found for the STT was 5.03±3.28mm/min; horizontal palpebral fissure lengths was 21.24±1.17mm, and 15.7±2.74mm for horizontal corneal diameter. The mean value for the esthesiometry was 0.80±0.59cm, IOP was 13.81±5.62mmHg and CCT was 0.28±0.03cm. This study contributes to establish reference values for selected ophthalmic diagnostic tests in the striped owl, as well as for morphological characterization of the eyeball of Asio clamator; but it is still necessary to characterize furthermore its histologic features.

• Asio clamator Schirmer tear test teste lacrimal de Schirmer

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Rodarte-Almeida A.C.V., Machado M., Baldotto S.B., Leigue dos Santos L., Lima L., Lange R.R., Froes T.R. & Montiani-Ferreira F. 2013. [The eye of the striped owl: morphologic observations, biometric findings and reference values for selected ophthalmic diagnostics tests.] O olho da coruja-orelhuda: observações morfológicas, biométricas e valores de referência para testes de diagnóstico oftálmico. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(10):1275-1289. Setor de Oftalmologia Veterinária, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal do Paraná, Rua dos Funcionários 1540, Cabral, Curitiba, PR 80035-050, Brazil. E-mail: acrodarte@gmail.com Objetivou-se relatar características morfológicas do bulbo ocular e determinar valores de referência para testes oftálmicos selecionados em corujas-orelhudas (Asio clamator). Foram estudados 32 olhos de 16 corujas (Asio clamator), adultas e jovens, machos e fêmeas, de vida livre. Sendo compilados dados referentes a observações morfológicas do crânio, bulbo ocular e anexos, além de mensuração de testes oftálmicos, incluindo, Teste Lacrimal de Schirmer (TLS), cultura da microbiota normal da conjuntiva, estesiometria, pressão intraocular (PIO), espessura de córnea central (ECC), diâmetro horizontal da rima palpebral, diâmetro horizontal da córnea e oftalmoscopia indireta. Vinte e dois tipos de bactérias foram identificados em 12 corujas havendo predominância de microrganismos Gram-positivos. A média encontrada para o TLS foi de 5,03±3,28mm/min, para o diâmetro horizontal da rima palpebral em 16 corujas foi 21,24±1,17mm, e 15,7±2,74mm para o diâmetro horizontal da córnea. O valor médio para o teste de estesiometria foi de 0,80±0,59cm, a PIO média de 13,81±5,62mmHg e ECC média de 0,28±0,03cm. O estudo contribuiu para a caracterização da morfologia ocular e para o estabelecimento de valores de referências de testes diagnósticos oftálmicos em corujas-orelhudas, sendo necessário ainda o desenvolvimento de estudos complementares sobre histologia ocular desta espécie.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Baptista A.A.S., Donato T.C., Souza, E.E., Gonçalves G.A.M., Garcia, K.C.O.D., Rodrigues J.C.Z., Sequeira J.L. & Andreatti Filho R.L. 2013. Induction of immune response in broiler chickens immunized with recombinant FliC and challenged by Salmonella Typhimurium. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(10):1215-1221. Departamento de Clínica Veterinária, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Unesp-Botucatu, Distrito de Rubião Júnior s/n, Botucatu, SP 18608-970, Brazil. E-mail: angelita_sampaio@yahoo.com.br The study examined (1) the immune response in broiler chickens after oral immunization with recombinant flagellin (rFliC) from Salmonella Typhimurium conjugated with sodium alginate microparticles, and the immune response enhancement in association with recombinant cholera toxin B subunit protein (rCTB) and pool of Lactobacillus spp. (PL). The immune responses were evaluated by dosage of IgY serum and IgA from intestinal fluid and immunostaining of CD8+ T lymphocytes in the cecum. The immunized animals were challenged with Salmonella Typhimurium (ST) 21 days after treatment. In all immunized groups, a significant increase (p<0.05) was observed in IgA levels (mg/mL), especially three weeks after immunization. The serum IgY levels (mg/mL) were little affected by the treatments and differed significantly among groups only in the second post-immunization week (p<0.05). After the challenge, the number of CD8+ T cells differed significantly between the treatments and negative control. Retrieval of Salmonella Typhimurium was not detected at 48 hours after the challenge in T2 (rFliC+rCTb), T3 (rFliC+PL) and T4 (rFliC+rCTB PL). The rFliC administered orally with or without rCTB and Lactobacillus spp. produces significant induction of humoral immune response, and the immunized chickens were more effective in eliminating Salmonella after challenge.

• Salmonella Typhimurium FliC

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Baptista A.A.S., Donato T.C., Souza, E.E., Gonçalves G.A.M., Garcia, K.C.O.D., Rodrigues J.C.Z., Sequeira J.L. & Andreatti Filho R.L. 2013. Induction of immune response in broiler chickens immunized with recombinant FliC and challenged by Salmonella Typhimurium. [Indução de resposta imune em frangos de corte imunizados com FliC recombinante e desafiados por Salmonella Typhimurium.] Pesquisa Veterinária Brasileira 33(10):1215-1221. Departamento de Clínica Veterinária, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Unesp-Botucatu, Distrito de Rubião Júnior s/n, Botucatu, SP 18608-970, Brazil. E-mail: angelita_sampaio@yahoo.com.br Este estudo investigou a resposta imunitária de frangos de corte após a imunização oral com flagelina recombinante (rFliC) de Salmonella Typhimurium conjugada com micropartículas de alginato de sódio, e como intensificador de resposta imune foi associada a proteína subunidade B da toxina colérica (rCTB) e pool de Lactobacillus spp. (PL). As respostas imunes foram avaliadas por dosagem de IgY sérica e IgA do fluído intestinal e imunomarcação de linfócitos T CD8+ presentes no ceco. Os animais imunizados foram desafiados aos 21 dias após tratamento com Salmonella Typhimurium (ST). Foi observado em todos os grupos imunizados um aumento significativo (p<0,05) nos níveis de IgA (mg/mL) principalmente três semanas após as imunizações. Os níveis de IgY sérica (mg/mL) foram pouco influenciados pelos tratamentos, apenas na segunda semana após imunização observou-se diferenças significativas (p<0,05) entre os grupos. Observou-se que o número de linfócitos T CD8+ apresentou diferença significativa entre os tratamentos e o controle negativo após o desafio. Quanto a recuperação de Salmonella Typhimurium, observou-se que 48 horas após o desafio já não havia detecção do agente nos grupos T2 (rFliC+rCTb), T3 (rFliC+PL) e T4 (rFliC+rCTB+PL). Concluí-se que rFliC administrada, via oral, associada ou não a Lactobacillus spp e rCTB, demonstrou induzir significativamente a resposta imune humoral e que as aves imunizadas foram mais eficientes na eliminação de Salmonella após desafio.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Tavares T.C.F., Soares P.M., Neves J.H.F.F., Soares M.M., Ferreira Junior Á., Souza D.L.N., Ávila V.M.R. & Lima-Ribeiro A.M.C. 2013. [Production and purification of polyclonal anti-Leptospira immunoglobulin Y.] Produção e purificação de imunoglobulinas Y policlonais anti-Leptospira spp. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(9):1097-1102. Centro Colaborador de Defesa Agropecuária do Brasil Central, Universidade Federal de Uberlândia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Rua Ceará s/n, Bloco 2D, sala 33, Uberlândia, MG 38400-902, Brazil. E-mail: tcftavares@yahoo.com.br The aim was to determine whether hens immunized with an inactivated suspension of Leptospira and a solution of outer membrane proteins extracted from the serovar Hardjo, could produce specific polyclonal antibodies to Leptospira, detected in ELISA assay. Eight hens White Leghorn race with 25-weeks-old were immunized, three with an inactivated suspension of Leptospira, three with a solution of outer membrane proteins (OMP) extracted from the serovar Hardjo and two controls immunized with saline. Blood samples were collected fortnightly and eggs daily. The IgY was purified from the egg yolk using the method for the delipidation of dilution with water acidic and ammonium sulfate precipitation. The ELISA assay was performed to verify the specificity of the IgY, these was possible to observe the production of specific antibody to Leptospira both in serum and purified egg yolk. The specific antibody titers peaked in the fifth week post immunization. The production of polyclonal IgY was effective for producing high titers of specific antibodies.

• Leptospira interrogans leptospirosis immunoglobulin Y leptospirose imunoglobulinas Y

Abstract in Portuguese:

RESUMO- Tavares T.C.F., Soares P.M., Neves J.H.F.F., Soares M.M., Ferreira Junior Á., Souza D.L.N., Ávila V.M.R. & Lima-Ribeiro A.M.C. 2013. [Production and purification of polyclonal anti-Leptospira immunoglobulin Y.] Produção e purificação de imunoglobulinas Y policlonais anti-Leptospira spp. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(9):1097-1102. Centro Colaborador de Defesa Agropecuária do Brasil Central, Universidade Federal de Uberlândia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Rua Ceará s/n, Bloco 2D, sala 33, Uberlândia, MG 38400-902, Brazil. E-mail: tcftavares@yahoo.com.br Objetivou-se verificar se galinhas imunizadas com uma solução de Leptospira interrogans inativadas e proteínas de membrana externa do sorovar Hardjo, poderiam produzir anticorpos policlonais específicos anti-leptospiras, detectáveis em testes ELISA. Foram imunizados oito galinhas com 25 semanas de idade, da raça White Leghorn, sendo três imunizadas com uma suspensão de leptospiras inativadas, três com uma solução de proteínas de membrana externa extraída do sorovar Hardjo e duas controle. Coletas de sangue foram realizadas quinzenalmente e de ovos diariamente. A IgY foi purificada a partir da gema dos ovos utilizando para a delipidação o método de diluição em água ácida e a precipitação com sulfato de amônio. Nos testes ELISA realizados para verificar a especificidade da IgY, foi demonstrada a produção de anticorpos anti-Leptospira, tanto no soro quanto nas gemas purificadas. O pico de produção de anticorpos específicos ocorreu na 5º semana após a primeira imunização. Ficou demonstrada a possibilidade da indução da produção de anticorpos específicos em galinhas imunizadas com leptospiras do sorovar Hardjo inativadas, bem como, com proteínas de membrana externa (PME) extraidas desse sorovar. As galinhas imunizadas com uma suspensão de leptospiras inativadas ou com PME de Leptospira interrogans do sorovar Hardjo produziram anticorpos reativos a PME Hardjo detectáves por teste ELISA.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Jönck F., Gava A., Traverso S.D., Lucioli J., Furlan F.H. & Gueller E. 2013 [Spontaneous and experimental poisoning by nitrate/nitrite in cattle fed Avena sativa (oat) and/or Lolium spp. (ryegrass).] Intoxicação espontânea e experimental por nitrato/nitrito em bovinos alimentados com Avena sativa (aveia) e/ou Lolium spp. (azevém). Pesquisa Veterinária Brasileira 33(9):1062-1070. Departamento de Medicina Veterinária, Centro de Ciências Agroveterinárias, Universidade do Estado de Santa Catarina, Lages, SC 88520-000, Brazil. E-mail: a2ag@cav.udesc.br Epidemiological data, clinical and pathological findings of the spontaneous andexperimental poisoning by nitrate and nitrite in cattle fed oats (Avena sativa) and/or ryegrass (Lolium spp.), diphenylamine test, and the nitrate content in the samples of the pasture where the outbreaks occurred, are described. The disease occurs in different regions of the State of Santa Catarina, in which pastures have exuberant growth, after receiving excessive amounts of chemical and/or organic fertilizer, mainly when raining occurs after a period of dry wheather. The animals grazing these pastures quickly develop brown mucosa, tachypnea, staggering gait, frequent urination, bloating, lateral recumbency and death in few minutes or hours. At necropsy of four animals that died spontaneously, the main lesions found were brown mucosa, dark color of the blood (chocolate), intense red color of the skeletal muscles and of the left part of the myocardium. The experimental reproduction of the disease was performed in seven cattle, with pastures from four farms where the disease occurred. The animals were fed with fresh oats and ryegrass and/or hay of it. Four animals died, two became ill and recovered, and one was treated with 2mg/kg per body weight of methylene blue 1%, and one cattle did not show changes. Clinical signs and lesions of the diseased animals that died were similar to natural cases. Microscopic changes were not observed in spontaneous and experimental poisoning. The diphenylamine test was positive in all the farms where the outbreaks occurred. The chemical analysis performed on samples of the pastures from several farms, in which outbreaks of the disease occurred, ranged from 0.30to 3.36% of nitrate in the dry matter. The disease is associated with the ingestion of oats and/or ryegrass pastures heavily fertilized, which accumulates high levels of nitrate after a period of rain and is characterized by rapid breathing, dark-colored blood, brown mucous and rapid death.

• Nitrate/nitrite methemoglobinaemia oat Avena sativa ryegrass Lolium spp. diphenylamine test Nitrato/nitrito methemoglobina aveia azevém teste da difenilamina

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Jönck F., Gava A., Traverso S.D., Lucioli J., Furlan F.H. & Gueller E. 2013 [Spontaneous and experimental poisoning by nitrate/nitrite in cattle fed Avena sativa (oat) and/or Lolium spp. (ryegrass).] Intoxicação espontânea e experimental por nitrato/nitrito em bovinos alimentados com Avena sativa (aveia) e/ou Lolium spp. (azevém). Pesquisa Veterinária Brasileira 33(9):1062-1070. Departamento de Medicina Veterinária, Centro de Ciências Agroveterinárias, Universidade do Estado de Santa Catarina, Lages, SC 88520-000, Brazil. E-mail: a2ag@cav.udesc.br Descrevem-se os dados epidemiológicos, sinais clínicos e lesões da intoxicação espontânea e experimental por nitrato e nitrito em bovinos alimentados com pastagens de Avena sativa (aveia) e/ou Lolium spp (azevém). A enfermidade ocorre em diferentes regiões do Estado de Santa Catarina, quando as pastagens tem crescimento exuberante, após receberem quantidades excessivas de adubo químico e/ou orgânico, principalmente quando ocorrem condições climáticas de seca e posteriormente chuva. Os animais em contato com essas pastagens desenvolvem rapidamente mucosas de coloração marrom, taquipnéia, andar cambaleante, micção frequente, timpanismo, decúbito lateral e morte em poucos minutos, ou recuperação algumas horas após. Na necropsia de quatro animais que adoeceram espontaneamente, as principais alterações encontradas foram a coloração marrom das mucosas, a cor escura do sangue (cor de chocolate) e a coloração vermelho intensa da musculatura esquelética e do miocárdio esquerdo. A reprodução experimental da doença foi realizada em sete bovinos, com pastagens de quatro propriedades onde ocorreu adoença. Aveia e/ou azevém verdes e sob a forma de feno foram administradas aos bovinos. Destes bovinos quatro morreram, dois adoeceram e se recuperam, um naturalmente e outro com a aplicação de azul de metileno a 1%, na dose de 2mg/kg/peso vivo, e um bovino não apresentou alterações. Os sinais clínicos observados e as lesões nos animais que adoeceram e morreram foram idênticos aos casos naturais. Alterações microscópicas não foram observadas nos casos naturais e experimentais. O teste da difenilamina nas amostras de pastagens onde ocorreram os surtos resultou positivo em todas as propriedades. A análise bromatológica realizada em amostras coletadas de várias propriedades em que ocorreram surtos revelou de 0,30 a 3,36% de nitrato na matéria seca. A enfermidade caracterizou-se principalmente por respiração ofegante, sangue de coloração escura, mucosas de coloração marrom e morte rápida dos bovinos e está relacionada á ingestão de pastagens de aveia e/ou azevém super adubados, que acumularam alto teor de nitrato, após um período de chuvas precedido de seca.