Resultado da pesquisa (202)

Termo utilizado na pesquisa leite

#1 - Refractory feline sporotrichosis: a comparative analysis on the clinical, histopathological, and cytopathological aspects

Abstract in English:

Sporotrichosis is a chronic fungal infection caused by Sporothrix species. The occurrence of cases that are resistant to long-term treatment, especially in the nasal planum of cats, emphasizes the importance of studying its pathogenesis. The purpose of this study was to analyze and compare the inflammatory process of cutaneous lesions of feline refractory sporotrichosis to clinical aspects through cytopathological and histopathological examination. Moreover, the study included 13 cats with cutaneous lesions that had been resistant to itraconazole treatment for more than a year. Cutaneous lesions samples were collected for cytopathological, histopathological, and fungal culture analyses. Tissue fragments were processed and stained with hematoxylin-eosin (HE) and Grocott methenamine silver (GMS). Further, two clinical presentations had the highest occurrence: the localized cutaneous form in animals with good general condition and stable disease (n=9, 69.2%) and the disseminated cutaneous form in cats with poor general condition (n=4, 30.8%). In cats with refractory sporotrichosis, the nasal planum (84.6%) was the most common location of lesions. In the cytopathological study, cats with fewer than two lesions and in good general condition (n=9, 69.2%) showed absence or mild yeast intensity (up to 5 yeasts per field), lower intensity of macrophages and neutrophils, and higher intensity of epithelioid cells, lymphocytes, plasma cells, and eosinophils. On the other hand, (n=4, 30.8%) of the cats with disseminated sporotrichosis and a poor general condition had a marked intensity of yeasts, which were mostly phagocytosed by an increased number of macrophages and neutrophils. Of those animals with good general condition, the majority (n=6, 66.7%) had higher eosinophil intensity. In histopathology, malformed suppurative granuloma was the predominant type (n=9, 69.2%) in feline sporotrichosis lesions, followed by well-formed granulomas (n=4, 30.8%). Malformed granulomas showed mild to moderate fungal intensity (55.6%) in animals with good general condition and localized lesions while marked fungal intensity (44.4%) in cats with the disseminated form of the disease and poor general condition. Well-formed granulomas (n=4, 30.7%) had mild to moderate intensity of fungal load, and 75% of the animals with this type of granuloma had only one lesion and were in good general condition. Long-term itraconazole treatment in these cats with refractory sporotrichosis can keep the infection under control and localized lesions stable; however, fungus reactivation can occur, resulting in an exuberant and inefficient immune response.

Abstract in Portuguese:

A esporotricose é uma infecção fúngica crônica causada por espécies do gênero Sporothrix. A ocorrência de casos refratários ao tratamento de longo prazo, especialmente na região nasal de gatos, alerta para a importância do estudo de sua patogênese. Este estudo teve como objetivo analisar o processo inflamatório das lesões cutâneas de esporotricose felina refratária ao tratamento, por meio de exames citopatológico e histopalógico, e comparar com aspectos clínicos. Treze gatos com lesões cutâneas refratárias ao tratamento com Itraconazol por mais de um ano foram incluídos no estudo. Amostras de lesões cutâneas foram coletadas para análises citopatológicas, histopatológicas e cultura fúngica. Fragmentos de tecidos foram processados e corados pela hematoxilina-eosina (HE) e Prata Metenamina de Grocott (GMS). Duas apresentações clínicas tiveram maior ocorrência: a forma localizada cutânea em animais com bom estado geral e doença estável (n=9, 69,2%); e a forma disseminada cutânea em gatos com estado geral ruim (n=4, 30,8%). A região nasal (84,6%) foi a localização mais frequente das lesões nos gatos com esporotricose refratária ao tratamento. No estudo citopatológico, felinos com menos de duas lesões, e em bom estado geral, (n=9, 69,2%) revelaram ausência ou leve intensidade de leveduras (até 5 leveduras por campo), menor intensidade de macrófagos e neutrófilos, e maior intensidade de células epitelióides, linfócitos, plasmócitos e eosinófilos. Enquanto, (n=4, 30,8%) dos felinos que apresentavam a forma disseminada da esporotricose associada a um estado geral ruim, revelaram acentuada intensidade de leveduras em sua maioria fagocitadas por acentuado número de macrófagos e neutrófilos. Dos animais com bom estado geral, a maioria (n=6, 66,7%) apresentava maior intensidade de eosinófilos. Na histopatologia, o granuloma supurativo mal formado foi o tipo predominante (n=9, 69,2%) nas lesões de esporotricose felina, e (n=4, 30,8%) foram de granulomas bem formados. Granulomas mal formados apresentaram leve a moderada intensidade fúngica (55,6%) nos animais com bom estado geral e lesões localizadas, e acentuada intensidade fúngica (44,4%) nos gatos com a forma disseminada da doença e estado geral ruim. Granulomas bem formados (n=4, 30,7%) apresentaram leve a moderada intensidade de carga fúngica, sendo 75% dos animais com esse tipo de granuloma com apenas uma lesão e bom estadogeral. O tratamento de longo prazo com itraconazol, nesses gatos com esporotricose refratária, pode manter a infecção controlada e lesões localizadas estáveis de forma temporária, contudo a reativação do fungo pode ocorrer levando a uma resposta imunológica exuberante e ineficiente.


#2 - Species identification and antimicrobial susceptibility profile of bacteria associated with cow mastitis in southern Brazil

Abstract in English:

Bovine mastitis is the most common disease in dairy cattle and responsible for economic losses in the milk industry. The present study aimed to identify the main species and to evaluate the antimicrobial susceptibility of bacterial isolates from cow herds with mastitis in dairy farms from southern Brazil. A total of 107 milk samples were collected from different cow herds in one important dairy producing region in southern Brazil, including farms located in ten cities from the Northeast region in the Rio Grande do Sul state. Bacterial strains were isolated and submitted to presumptive identification by classical bacteriological methods. Bacterial species were also identified by MALDI-TOF MS and antimicrobial susceptibility testing was performed with 12 antimicrobials commonly used in dairy farms. Fifty-one bacterial strains were isolated and the presumptive identification demonstrated the occurrence of Staphylococcus spp. (82.3%), Bacillus spp. (3.9%), Klebsiella spp. (3.9%), Streptococcus spp. (3.9%), Corynebacterium sp. (2%), Enterococcus sp. (2%) and Serratia sp. (2%). Forty-one isolates were successfully identified in the MALDI-TOF analysis, including 35 isolates from eleven different bacterial species. Importantly, there were eight different Staphylococcus species, with a high frequency of Staphylococcus chromogenes (48.6%) and Staphylococcus aureus (20%). Overall, bacterial isolates demonstrated resistance to penicillin (46.3%), tetracycline (39%), amoxicillin (36.6%), ampicillin (34.1%) and sulfamethoxazole/trimethoprim (31.7%). Enrofloxacin was the unique antimicrobial that all isolates were susceptible. In addition, there were six multidrug resistant isolates (five S. chromogenes and one S. aureus). This study highlights that bacterial pathogens with resistance to several antimicrobials were identified in cows from dairy farms in a very important milk producing region located in southern Brazil. Microbial identification of the bovine mastitis pathogens and determination of the antimicrobial profile is necessary for the rational use of the medicines.

Abstract in Portuguese:

A mastite bovina é a doença mais comum em gado leiteiro e responsável por perdas econômicas na indústria de laticínios. O presente estudo teve como objetivo identificar as principais espécies e avaliar a suscetibilidade antimicrobiana de isolados bacterianos de rebanhos bovinos com mastite em fazendas leiteiras no sul do Brasil. Um total de 107 amostras de leite foram coletadas em diferentes rebanhos bovinos em uma importante região produtora de leite do sul do Brasil, incluindo fazendas localizadas em 10 cidades da região Nordeste do estado do Rio Grande do Sul. As cepas bacterianas foram isoladas e submetidas à identificação presuntiva por métodos bacteriológicos clássicos. A identificação bacteriana foi confirmada por MALDI-TOF MS e o teste de sensibilidade antimicrobiana foi realizado com antimicrobianos comumente usados em fazendas leiteiras. Cinquenta e uma cepas bacterianas foram isoladas e a identificação presuntiva demonstrou a ocorrência de Staphylococcus spp. (82,3%), Bacillus spp. (3,9%), Klebsiella spp. (3,9%), Streptococcus spp. (3,9%), Corynebacterium sp. (2%), Enterococcus sp. (2%) e Serratia sp. (2%). Os 41 isolados foram identificados com sucesso na análise MALDI-TOF, incluindo 35 isolados de onze espécies bacterianas diferentes. É importante ressaltar que houve a ocorrência de oito espécies diferentes de Staphylococcus, com alta frequência de Staphylococcus chromogenes (48,6%) e Staphylococcus aureus (20%). No geral, os isolados bacterianos tiveram alta resistência à penicilina (46,3%), tetraciclina (39%), amoxicilina (36,6%), ampicilina (34,1%) e sulfametoxazol/trimetoprima (31,7%). A enrofloxacina foi o único antimicrobiano que todos os isolados foram suscetíveis. Além disso, havia seis isolados multirresistentes (cinco S. chromogenes e um S. aureus). Este estudo destaca que os patógenos bacterianos com resistência aos antimicrobianos estão presentes em fazendas leiteiras de subsistência em uma importante região produtora no sul do Brasil. É necessário o monitoramento constante dos patógenos da mastite bovina e a determinação de seu perfil antimicrobiano para o uso racional dos medicamentos.


#3 - Poisonous plants for ruminants in the dairy region of Pernambuco, Northeastern Brazil

Abstract in English:

A survey carried out in the dairy region of Pernambuco was conducted to determine the most important poisonous plants for ruminants in the region. A total of 95 farmers from 19 municipalities were interviewed and the grazing areas of ruminants were inspected. According to the survey, the most important poisonous plants for ruminants were Manihot esculenta, Palicourea aeneofusca, Brachiaria decumbens, Indigofera suffruticosa, Ricinus communis and Cestrum axillare. Less reported classes of poisonous plants included nephrotoxic plants and plants that cause abortions or congenic malformations. Psychotria hoffmannseggiana, Psychotria colorata and Psychotria capitata were reported by farmers as the cause of sudden death in cattle. These plants should be better investigated to evaluate their importance as the cause of cattle deaths.

Abstract in Portuguese:

Neste estudo prospectivo, realizou-se um levantamento sobre a ocorrência das principais plantas tóxicas e a ocorrência de intoxicações por plantas em ruminantes na bacia leiteira de Pernambuco. Para isso, foram entrevistados 95 produtores rurais de 19 municípios e as áreas de pastagem de ruminantes foram inspecionadas. De acordo com o levantamento, as plantas tóxicas mais importantes para ruminantes foram Manihot esculenta, Palicourea aeneofusca, Brachiaria decumbens, Indigofera suffruticosa e Ricinus communis. As classes menos importantes de plantas tóxicas incluíram plantas nefrotóxicas e plantas que causam abortos e malformações congênitas. Psychotria hoffmannseggiana, Psychotria colorata e Psychotria capitata foram relatadas por produtores rurais como a causa de mortes súbitas em bovinos. Essas plantas devem ser investigadas melhor para avaliar sua importância como a causa de mortes de bovinos.


#4 - Prevalence of bovines persistently infected with bovine viral diarrhea virus (BVDV) in dairy cattle herds in Paraná State, Brazil

Abstract in English:

This study aimed to establish the prevalence of animals persistently infected (PI) with bovine viral diarrhea virus (BVDV) in dairy farms at Parana State, Brazil. Samples were collected from 6,465 female Holstein Friesian Dairy Cattle, including animals less than two years old, females over two years old who had not given birth at the farm, and mothers of calves diagnosed as persistently infected. The cattle came from 40 dairy herds distributed in 10 municipalities in the State of Paraná. The samples were obtained from May 2015 to August 2018. The diagnosis of PI animals was made with an antigen-capture ELISA test. We detected PI animals in fifteen herds sampled (37.5%), ranging from one to sixteen animals per herd. The prevalence in Parana State’s municipalities was 1.78%, ranging from 0.3 to 8.9% at positive herds. The analysis of the individual herds shows significant dissemination of the BVDV in Parana’s municipalities, including endemic areas. With this, we highlight the need for measures to raise awareness among producers about the existence and importance of bovine viral diarrhea (BVD) in dairy herds, reinforcing the PI animals’ role in disease epidemiology and the economic impact caused by the maintenance of these farm animals.

Abstract in Portuguese:

Com o intuito de se estabelecer a prevalência de animais persistentemente infectados (PI) com o BVDV em propriedades leiteiras no estado do Paraná. Foram coletadas amostras de 6.465 bovinos, fêmeas, da raça Holandês Preto e Branco (HPB). Amostraram-se animais com idade inferior a dois anos, fêmeas com mais de dois anos que não haviam tido partos na propriedade, e mães de bezerros que foram diagnosticados como persistentemente infectados. Os bovinos foram provenientes de 40 rebanhos leiteiros, distribuídos em 10 municípios no Estado do Paraná. A coleta deu-se no período de maio de 2015 a agosto de 2018. O diagnóstico dos animais PI foi feito por meio do teste de ELISA de captura de antígeno. Animais PI foram detectados em quinze rebanhos amostrais (37,5%), oscilando entre um e dezesseis animais por rebanho. A prevalência nos municípios do estado Paraná foi de 1,78%, oscilando entre 0,3 a 8,9% nos rebanhos positivos. Com a alta prevalência de animais PI observada, quando analisados os rebanhos amostrais individualmente, é possível afirmar que há uma disseminação importante do BVDV em municípios paranaenses, destacando inclusive áreas endêmicas. Com isso, vê-se a necessidade de medidas de conscientização dos produtores sobre a existência e importância da BVD nos rebanhos, destacando o papel dos animais PI na epidemiologia da doença, bem como o impacto econômico causado pela manutenção desses animais nos rebanhos.


#5 - Cloning and expression of Neospora caninum rhoptry 2 and its potential as an immunobiological for neosporosis control

Abstract in English:

The protozoan Neospora caninum is known worldwide as one of the main causes of abortion in cattle. During infection, rhoptry proteins present in the apical complex of the parasite play important roles in adhesion and parasitophorous vacuole formation. The use of N. caninum ROP2 in experimental vaccines has shown promising protective results. In our study we performed cloning and expression in Escherichia coli of an antigenic portion of N. caninum ROP2. The recombinant protein (rROP2) was obtained in insoluble form, and the purified protein showed a size of approximately 18kDa. Even being a small truncate NcROP2 region, it was possible to conserve the antigenic epitopes which were recognized by bovine serum naturally infected with N. caninum. Vaccination with rROP2 on aluminum hydroxide adjuvant induced high levels of rROP2-specific IgG antibodies capable of recognizing native protein in tachyzoite lysates. In conclusion, our approaches were effective in obtaining the rROP2 protein, which induced specific mouse immune response and was also recognized by sera from N. caninum naturally infected cattle. These results suggest that it is a promising antigen for the development of neosporosis subunit vaccines as well as a suitable antigen for use in immunodiagnosis.

Abstract in Portuguese:

O protozoário Neospora caninum é conhecido mundialmente como uma das principais causas de aborto em bovinos. Durante a infecção, as proteínas rhoptry presentes no complexo apical do parasita desempenham papel importante na adesão e formação de vacúolos parasitóforos. O uso de ROP2 de N. caninum em vacinas experimentais tem mostrado resultados de proteção promissores. Em nosso estudo, realizamos a clonagem e expressão em Escherichia coli de uma porção antigênica de N. caninum ROP2. A proteína recombinante (rROP2) foi obtida na forma insolúvel, e a proteína purificada apresentou tamanho aproximado de 18kDa. Mesmo sendo uma pequena região truncada de NcROP2, foi possível conservar os epítopos antigênicos que foram reconhecidos pelo soro de bovinos naturalmente infectados com N. caninum. A vacinação com rROP2 adsorvida no adjuvante de hidróxido de alumínio induziu altos níveis de anticorpos IgG anti-rROP2, capazes de reconhecer a proteína nativa em lisados ​​de taquizoítos. Em conclusão, nossas abordagens foram eficazes na obtenção da proteína rROP2, que induziu resposta imune específica em camundongos e também foi reconhecida por soros de bovinos naturalmente infectados com N. caninum. Estes resultados sugerem que rROP2 é um antígeno promissor para o desenvolvimento de vacinas de subunidades de neosporose, bem como um antígeno adequado para uso em imunodiagnóstico.


#6 - Spontaneous poisoning by Cestrum intermedium in dairy cattle

Abstract in English:

Acute hepatotoxicity caused by plants poisoning is responsible for economic losses in farm animals in Brazil. Reports of Cestrum intermedium natural poisoning in cattle are not commonly described in Rio Grande do Sul (RS). This study aimed to document an outbreak of spontaneous C. intermedium poisoning in dairy cattle in the Central-Eastern Mesoregion of RS. Three nine-month-old Holstein and Jersey heifers were affected after they were placed in a small paddock with shortage forage. In this area, specimens of C. intermedium Sendtn with signs of consumption were observed. Morbidity and lethality rates were 100% and clinical courses ranged from 9 to 12 hours. At post mortem examination of the three heifers, there was predominance of acute liver lesions. The liver was moderately enlarged and on the cut surface there was a marked accentuation of the lobular pattern and hemorrhage. Inside the rumen, partially digested C. intermedium Sendtn leaves were observed. The histological aspects of the liver were mostly centrilobular coagulative necrosis and hemorrhage, frequently extended to the midzonal region. The immunohistochemistry technique was performed, in which the polyclonal antibody caspase 3 was used in liver fragments. Moderate to marked immunolabeling was observed in the cytoplasm and nucleus of hepatocytes, predominantly on the periphery of areas of hepatic necrosis indicating cell apoptosis. The diagnosis of C. intermedium Sendtn poisoning in dairy cattle in this study was based on epidemiological, clinical and anatomopathological findings. Since the C. intermedium poisoning is uncommon in dairy cattle, we are describing it for the first time in the Central-Eastern Mesoregion of RS, and represents a differential diagnosis of other acute toxic liver diseases in cattle.

Abstract in Portuguese:

Intoxicações por plantas que causam hepatotoxicidade aguda são responsáveis por prejuízos econômicos em animais de produção no Brasil. Relatos de intoxicações naturais por Cestrum intermedium em bovinos não são comumente descritos no Rio Grande do Sul (RS). Este trabalho teve como objetivo documentar um surto de intoxicação espontânea por C. intermedium em bovinos leiteiros ocorrido na região Centro-Oriental do RS. Três bovinos com nove meses de idade, das raças Holandês e Jersey, foram acometidos depois de serem introduzidos em um pequeno piquete com escassez de forragem. Nessa área foram observados exemplares de Cestrum intermedium Sendtn com sinais de consumo. As taxas de morbidade e letalidade foram de 100% e os cursos clínicos variaram de 9 a 12 horas. Na necropsia dos três bovinos, observou-se predomínio de lesões hepáticas agudas. O fígado dos animais acometidos estava moderadamente aumentado de tamanho e na superfície de corte havia marcada acentuação do padrão lobular e hemorragia. Na abertura do rúmen, foram observadas folhas de Cestrum intermedium Sendtn parcialmente digeridas. Histologicamente, o fígado apresentava necrose coagulativa centrolobular e hemorragia. Frequentemente, essas alterações se estendiam para a região mediozonal. Foi realizada a técnica de imuno-histoquímica, na qual utilizou-se o anticorpo policlonal caspase 3 em fragmentos de fígado. Notou-se marcação moderada a acentuada em citoplasma e núcleo de hepatócitos, predominantemente na periferia das áreas de necrose hepática indicando apoptose celular. O diagnóstico de intoxicação por Cestrum intermedium Sendtn nos bovinos leiteiros desse estudo, foi realizado com base nos achados epidemiológicos, clínicos e anatomopatológicos. A intoxicação por C. intermedium é incomum em bovinos leiteiros, sendo descrita pela primeira vez na região centro oriental do RS e representa um diagnóstico diferencial de outras hepatopatias tóxicas agudas.


#7 - Acute necrotic hepatotoxicity caused by Lantana camara L. ingestion in dairy cattle

Abstract in English:

This study describes an outbreak of acute necrotic hepatopathy associated with spontaneous poisoning by Lantana camara L. in dairy cattle. A herd of 15 cows and heifers was introduced into a native pasture with limited food supply, and, sixteen days later, eight animals had spontaneous nasal hemorrhage, fever, lethargy, jaundice, and dry, dark stools with mucus and blood. The clinical course varied from two to five days. In the pasture where the cattle were kept, abundant adult specimens of L. camara L. with evident signs of consumption were observed. In total, seven cattle died and necropsy was performed in three of them. All animals had moderate jaundice, hemorrhage in the subcutaneous tissue and on the surface of different organs. The liver was slightly enlarged, with orange discoloration and enhanced lobular pattern. Histologically, multifocal areas of coagulative necrosis of hepatocytes in the centrilobular area, occasionally extending to the midzonal area, were observed, as well as marked hepatocellular degeneration and prominent cholestasis. The current study suggests that L. camara L. poisoning should be considered a differential diagnosis of acute and necrotic hepatotoxicity in cattle, despite the absence of photosensitization.

Abstract in Portuguese:

Esse estudo descreve um surto de hepatopatia necrótica aguda associada a intoxicação espontânea por Lantana camara L. em bovinos leiteiros. Um lote de 15 vacas e novilhas foram introduzidas em um piquete com campo nativo, com escassa oferta de alimento. Após dezesseis dias, oito animais manifestaram epistaxe, febre, apatia, icterícia, fezes ressecadas e escuras com muco e sangue. A evolução do quadro clínico variou de dois a cinco dias. No piquete em que os bovinos estavam alojados havia grande quantidade de L. camara L. com sinais evidentes de consumo. No total, sete bovinos morreram, e destes, o exame post mortem foi realizado em três. Os bovinos exibiam moderada icterícia, hemorragias no tecido subcutâneo e na superfície de diferentes órgãos. O fígado estava discretamente aumentado, com coloração alaranjada e padrão lobular evidente. As lesões histológicas consistiam em acentuada necrose de coagulação de hepatócitos em região centrolobular, por vezes se estendendo a região mediozonal, além de acentuada degeneração dos hepatócitos e evidente Colestase. O presente trabalho alerta para que intoxicação por L. camara L. seja levada em consideração nos diagnósticos diferenciais de hepatotoxicidade necrótica aguda em bovinos, mesmo sem indícios de fotossensibilização.


#8 - Immunogenicity of Streptococcus equi subsp. equi recombinant SeM protein and bacterin in mice

Abstract in English:

The infection caused by Streptococcus equi, known as strangles, affects the respiratory system of horses, causing high morbidity and rapid spread among the herd. Bacterin vaccines, composed of inactivated whole cells of S. equi, have variable efficacy and duration. Infected animals produce specific antibodies against SeM, the immunodominant antigen of S. equi. This makes it a promising target for vaccine development. In this context, the objective of this work was to evaluate a vaccine combining S. equi bacterin and recombinant SeM protein. Mice were vaccinated with bacterin (S. equi ~1.2 × 108CFU/ml); rSeM protein (20µg); bacterin-rSeM combination; or PBS (Control Group) and challenged with a suspension of S. equi, containing 10 × LD50. All vaccinated mice survived the challenge and produced anti-rSeM and anti-S. equi antibodies, which were assessed by indirect ELISA. The Control Group reached endpoint criteria 96 h after infection. These results demonstrate that a vaccine combining the S. equi bacterin with rSeM protein protects mice against strangles. This combination vaccine could potentially protect horses and overcome the limitations of currently available strangle vaccines.

Abstract in Portuguese:

A infecção causada por Streptococcus equi, denominada adenite, atinge o sistema respiratório de equinos, causando alta morbidade e rápida disseminação entre o rebanho. Vacinas bacterinas, compostas de células inteiras inativadas de S. equi apresentam eficácia e duração variáveis. Animais infectados apresentam anticorpos específicos à proteína SeM, antígeno imunodominante de S. equi, o que a torna um alvo promissor para o desenvolvimento de vacinas. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar uma vacina baseada na administração simultânea da bacterina e da proteína SeM recombinante. Camundongos foram vacinados com a bacterina (S. equi ~1.2 × 108CFU/ml); a proteína rSeM (20µg); a bacterina e rSeM simultaneamente; ou PBS (Grupo Controle) e, posteriormente, foram desafiados com uma suspensão de S. equi contendo 10 × LD50. Todos os animais vacinados apresentaram anticorpos anti-rSeM e contra S. equi, avaliados através de ELISA indireto, e mantiveram-se e sobreviveram ao desafio letal. O Grupo Controle atingiu critérios de endpoint 96 h após a infecção. Estes resultados demonstram que uma vacina constituída de células inteiras de S. equi com rSeM protege camundongos contra adenite, sugerindo a capacidade de proteção a equinos e, possivelmente, superando as limitações das vacinas contra adenite atualmente disponíveis.


#9 - Antimicrobial properties of heterocyclic compounds against clinical mastitis isolates

Abstract in English:

ed to evaluate the antibacterial properties of 39 heterocyclic derivatives (1,3-thiazoles and 4-thiazolidinones) against clinical mastitis isolates from dairy cows. Milk samples were collected from cows with clinical mastitis and the bacterial species were identified by PCR. Antibacterial activity was assessed using the broth microdilution method. First, 39 heterocyclic compounds were tested against four bacterial isolates (Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Corynebacterium bovis and Escherichia coli) randomly chosen from those recovered from the milk samples (Study 1). Subsequently, the compounds with the strongest antibacterial activity were tested against all the bacterial isolates recovered from the milk samples (Study 2). 1,3-thiazoles showed the strongest antibacterial activity, specially compounds 30 and 38, which also showed bactericidal properties according to their minimal inhibitory concentration (MIC) and minimal bactericidal concentration (MBC) values. Corynebacterium spp. and Enterobacteriaceae isolates were the most susceptible to compounds 30 and 38. Compounds 30 and 38 are promising targets for new antimicrobial agents.

Abstract in Portuguese:

A mastite causa significativas perdas econômicas à indústria leiteira bovina. O presente estudo teve como objetivo avaliar as propriedades antibacterianas de 39 derivados heterocíclicos (1,3-tiazóis e 4-tiazolidinonas) contra isolados clínicos de mastite em vacas leiteiras. Amostras de leite foram coletadas de vacas com mastite clínica e as espécies bacterianas isoladas foram identificadas por PCR. A atividade antibacteriana foi avaliada pelo método de microdiluição em caldo. Primeiramente, os 39 compostos heterocíclicos foram testados contra quatro isolados bacterianos (Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Corynebacterium bovis e Escherichia coli) escolhidos aleatoriamente dentre os recuperados das amostras de leite (Estudo 1). Posteriormente, compostos com atividade antibacteriana mais forte foram testados contra todos os isolados bacterianos recuperados das amostras de leite (Estudo 2). Os compostos 1,3-tiazóis apresentaram a maior atividade antibacteriana, principalmente os compostos 30 e 38, que também apresentaram propriedades bactericidas de acordo com seus valores de concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM). Os isolados Corynebacterium spp. e Enterobacteriaceae foram os mais suscetíveis aos compostos 30 e 38. Os compostos 30 e 38 mostraram-se promissores como novos agentes antimicrobianos.


#10 - Indirect ELISA (iELISA) standardization for the diagnosis of bovine enzootic leukosis

Abstract in English:

Enzootic bovine leukosis (EBL) is an infectious disease caused by bovine leukemia virus (BLV) that affects cattle worldwide. Agar gel immunodiffusion (AGID) was the reference test for EBL diagnosis for many years, but enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) showed higher sensitivity, was faster to perform, and resulted in an objective reading. However, the importation of ELISA kits is lengthy and expensive, and currently, no AGID kits are available in Brazil. The aim of this work was to standardize an indirect ELISA (iELISA) for EBL diagnosis using BLV antigens produced in Tadarida brasiliensis lung (Tb1Lu) cells, which are Bovine viral diarrhea virus (BVDV) free, unlike fetal lamb kidney (FLK) cells, currently used for this purpose. Following standardization, iELISA results were compared with those obtained by AGID and the commercial Chekit Leucose-Serum ELISA. Compared to AGID, iELISA had 94,44% sensitivity, 75.68% specificity, 79.10% positive predictive value (PPV) and 93.30% negative predictive value (NPV), with 84% concordance and a Kappa index of 0.699. Compared to the Chekit Leucose-Serum ELISA, iELISA showed 92.60% sensitivity, 87.09% specificity, 90.27% PPV and 90,00% NPV, with 90.27% concordance and a Kappa index of 0.801. Taking into account the high agreement with the traditional tests and the absence of non-specific reactions with BVDV, the developed assay could be used as diagnostic method to control EBL in Brazil.

Abstract in Portuguese:

A leucose enzoótica bovina (LEB) é uma doença infecciosa natural dos bovinos com distribuição mundial causada pelo “bovine leukemia virus” (BLV). A imunodifusão em gel de ágar (IDGA) foi considerada por muitos anos o teste de eleição, porém ensaios imunoenzimáticos (ELISA) apresentam sensibilidade mais elevada e leitura mais rápida e objetiva. No entanto, a importação de kits de ELISA é um processo dispendioso e demorado, e atualmente não há kits de IDGA comercialmente disponíveis no Brasil. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi padronizar um ELISA indireto (iELISA) para diagnóstico da LEB utilizando antígenos produzidos a partir do cultivo do BLV em linhagem celular Tadarida brasiliensis “lung” (Tb1Lu) livre de “bovine viral diarrhea virus” (BVDV), diferentemente do que acontece com as linhagens “fetal lamb kidney” (FLK) atualmente utilizadas na produção desses antígenos para uso em ensaios sorológicos. Após a padronização do iELISA, os resultados foram comparados com aqueles obtidos por IDGA e pelo ELISA comercial “Chekit Leucose-Serum”. Comparado ao IDGA, o iELISA apresentou 94,44% de sensibilidade, 75,68% de especificidade, valor preditivo positivo (VPP) de 79,1% e valor preditivo negativo (VPN) de 93,3%, com concordância entre os testes de 84% e o índice Kappa 0,699. Quando comparado ao ELISA “Chekit Leucose-Serum”, o iELISA apresentou sensibilidade de 92,6%, especificidade de 87,09%, VPP de 90,27% e VPN de 90%, com concordância de 90,27% e o índice Kappa 0,801. Portanto, devido à alta concordância com os testes tradicionais e ausência da ocorrência de reações inespecíficas com BVDV, o ensaio desenvolvido pode ser utilizado como ferramenta diagnóstica para o controle da LEB no Brasil.


Colégio Brasileiro de Patologia Animal SciELO Brasil CAPES CNPQ UNB UFRRJ CFMV
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