PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

Lymph node status is considered an important clinical prognostic factor in canine mammary carcinomas and women’s breast neoplasms. However, occult isolated tumor cells (ITCs) can be missed during hematoxylin and eosin (HE) analyses. Immunohistochemistry (IHC) for cytokeratin can be used to detect carcinomatous occult ITCs in mammary drainage lymph nodes. However, brown pigments, such as hemosiderin and ceroid in lymph nodes, may hinder the search for occult metastases by IHC utilizing DAB (3,3′-diaminobenzidine) as the chromogen. The aim of this study was to identify ITCs in canine lymph nodes of cases in which it was not detectable by routine HE evaluation through IHC for cytokeratin (AE1/AE3) combined with histochemistry techniques, such as Perls’ Prussian blue and periodic acid-Schiff (PAS), to improve the detection of occult metastases when hemosiderin and ceroid were present in these lymph nodes. For this, 25 tubulopapillary mammary carcinomas with their respective submitted 29 regional lymph nodes, previously given as free of tumor cells by HE analyses, were selected. Mammary tumors were graduated, and vascular invasion was investigated in these tumors. The submitted lymph nodes were reevaluated in HE, looking for occult metastases. IHC for cytokeratin (AE1/AE3) was used to detect occult metastases in mammary lymph nodes. Subsequently, a combined technique of IHC with Perl’s Prussian blue (for hemosiderin) or PAS (for ceroid) was performed to optimize the detection of ITCs by IHC, distinguishing them from pigments. Occult metastases were classified by their microanatomical location in subcapsular, cortical and medullary. Hemosiderin and ceroid were searched in lymph nodes and quantified as low, moderate, or high. The amount of pigments with a percentage of ITCs was also compared. Isolated tumor cells were found in 24.1% (7/29) of mammary lymph nodes. These ITCs were located mainly in subcapsular sinuses (4/7; 57.1%), followed by cortical (2/7; 28.5%) and medullary sinuses (1/7; 14.3%). There were concomitant lymph nodes with ITCs in 33.4% (2/6) of cases with vascular invasion. Hemosiderin and ceroid were present in about 90% of the 29 lymph nodes analyzed. In 42.8% (3/7) of lymph nodes with ITCs, hemosiderin and/or ceroid were in the same location as ITCs. It was found that lymph nodes in which ITCs were detected also present high amounts of hemosiderin (3/7; 42.9%) and low amounts of ceroid (5/7; 71.4%). In this study, IHC for cytokeratin (AE1/AE3) was an efficient method to detect occult tumor cells. IHC combined with Perls’ Prussian blue or with PAS proved to be a helpful way to investigate the presence of occult metastases in the lymph nodes of mammary canine tumors. It allowed distinguishing hemosiderin and ceroid, respectively, from ITCs in the same slide of IHC (immunostained by DAB), favoring a more accurate analysis by pathologists, which can be useful for the oncological staging of these patients.

• Immunohistochemistry isolated tumor cells cytokeratin lymph nodes mammary tumors

Abstract in Portuguese:

O status nodal é considerado um importante fator prognóstico clínico em cães com carcinomas mamários e em mulheres com neoplasmas mamários. No entanto, durante a análise histopatológica convencional (coloração de hematoxilina e eosina - HE), células neoplásicas podem permanecer ocultas no linfonodo. Imuno-histoquímica (IHQ) para citoqueratina pode ser utilizada para detectar células carcinomatosas isoladas ocultas em linfonodos de drenagem mamária. Entretanto, a presença de pigmentos marrons, como a hemossiderina e o ceroide em linfonodos, pode dificultar a procura por metástases ocultas durante a análise por IHQ utilizando o DAB (3,3′-diaminobenzidina) como cromógeno. O objetivo deste estudo foi identificar células tumorais isoladas (CTIs), não detectadas pela avaliação de rotina (HE), em linfonodos de cães, através de IHQ para citoqueratina (AE1/AE3) combinada com técnicas histoquímicas, como azul da Prússia e ácido periódico Schiff (PAS), para otimizar a detecção de metástases ocultas, quando os pigmentos hemossiderina e ceroide estavam presentes nos linfonodos. Para esta finalidade, 25 carcinomas mamários túbulo-papilares com seus respectivos 29 linfonodos regionais remetidos, previamente diagnosticados como livres de células neoplásicas pelo HE foram selecionados. Os tumores mamários foram graduados e a presença de invasão vascular foi investigada nestes tumores. Os linfonodos submetidos foram reavaliados histologicamente no HE, à procura de metástases ocultas. IHQ para citoqueratina (AE1/A3) foi utilizada para detectar metástases ocultas nos linfonodos mamários. Subsequentemente, técnicas combinadas de IHQ com azul da Prússia (para hemossiderina) ou PAS (para ceroide) foram realizadas para otimizar a detecção de CTIs através da IHQ, distinguindo-as dos pigmentos. As metástases ocultas foram classificadas pela sua região microanatômica nodal em subcapsular, cortical e medular. Hemossiderina e ceroide foram identificados no linfonodo e classificados de acordo com sua quantidade em baixa, moderada e alta. Também foram comparadas a quantidade de pigmentos com a porcentagem de CTIs. Foram encontradas CTIs em 24,1% (7/29) dos linfonodos mamários. Estas CTIs estavam localizadas principalmente em seios subcapsulares (4/7; 57,1%), seguido pela cortical (2/7; 28,5%) e seios medulares (1/7; 14,3%). Em 33,4% (2/6) dos casos com invasão vascular havia, concomitantemente, linfonodos de drenagem com CTIs. Hemossiderina e ceroide estavam presentes em cerca de 90% dos 29 linfonodos analisados. Em 42,8% (3/7) dos linfonodos com CTIs, hemossiderina e/ou ceroide estavam na mesma localização das CTIs. Os linfonodos que apresentaram CTIs também apresentavam grande quantidade de hemossiderina (3/7; 42,9%) e pequena quantidade de ceroide (5/7; 71,4%). Neste estudo, IHQ para citoqueratina (AE1/AE3) foi um método eficiente para detecção de células tumorais ocultas. A técnica combinada de IHQ com azul da Prússia ou com o ácido periódico de Schiff (PAS) mostrou ser uma maneira útil de investigar a presença de metástases ocultas em linfonodos de cães com tumores mamários caninos, distinguindo a hemossiderina e o ceroide, respectivamente, de CTIs na mesma lâmina de IHQ (imunomarcadas por DAB), favorecendo uma análise mais acurada pelos patologistas, o que pode ser útil no estadiamento oncológico destes pacientes.

• Imuno-histoquímica células tumorais isoladas citoqueratina linfonodos tumores mamários

Abstract in English:

ABSTRACT.- Braz P.H., Brum K.B., Souza A.I. & Abdo M.A.G.S. 2016. [Comparison between cytopathology with fine needle biopsy and histopathology for the diagnosis of cutaneous and subcutaneous neoplasm of dogs.] Comparação entre a citopatologia por biopsia com agulha fina e a histopatologia no diagnóstico das neoplasias cutâneas de cães. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(3):197-203. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Laboratório de Patologia Clínica Veterinária. Universidade Federal de Mato Grosso do Sul, Campo Grande, MS 79074-460, Brazil. E-mail: pauloh.braz@hotmail.com The cutaneous cancers are among the most frequently diagnosed in veterinary medicine before it is sought that the diagnosis of these tumors are fast and effective. In veterinary medicine the use of cytology as a method for diagnosis has increased. Therefore is necessary that studies demonstrate the technical efficiency so that it can be used as only tool. This study aimed to compare the diagnosis made by cytological and histological techniques. Skin and subcutaneous tumors of dogs and their neoplastic type are more easily diagnosed by cytology and are the most prevalent tumors in this animal spécies, attended by two veterinary hospitals in Campo Grande/MS from March 2012 to December 2013. Tumor cell samples were collected by fine needle aspiration and surgical punch of 91 dogs. The cytological results showed an efficacy of 69.69% in relation to histopathology. For differentiating between neoplastic and non-neoplastic growth, the efficiency increases to 91.91%. In order to differentiate benign from malignant tumors, it was possible to find an agreement in the order of 68.13%. The most prevalent tumors were mastocytoma, followed by lipoma, fibrosarcoma and basal cell tumor.

• Cytopathology neoplasm tumor cells citopatologia neoplasias cutâneas células tumorais

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Braz P.H., Brum K.B., Souza A.I. & Abdo M.A.G.S. 2016. [Comparison between cytopathology with fine needle biopsy and histopathology for the diagnosis of cutaneous and subcutaneous neoplasm of dogs.] Comparação entre a citopatologia por biopsia com agulha fina e a histopatologia no diagnóstico das neoplasias cutâneas de cães. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(3):197-203. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Laboratório de Patologia Clínica Veterinária. Universidade Federal de Mato Grosso do Sul, Campo Grande, MS 79074-460, Brazil. E-mail: pauloh.braz@hotmail.com Os neoplasmas cutâneos estão entre os mais diagnosticados em medicina veterinária, diante disso busca-se que o diagnóstico desses tumores seja rápido e eficaz. Em medicina veterinária o uso da citopatologia como método para diagnóstico tornou-se crescente. Diante disso, é necessário que estudos comprovem a eficiência da técnica para que a mesma possa ser usada de maneira isolada. Este trabalho teve como objetivo comparar o diagnóstico obtido pelas técnicas citopatológica e histopatológica de tumores cutâneos e subcutâneos de cães, determinar qual o tipo neoplásico mais facilmente diagnosticado pela citopatologia e a neoplasia mais prevalente nesses animais, atendidos em dois hospitais veterinários de Campo Grande/MS, no período de março de 2012 a dezembro de 2013. Foram coletadas amostras celulares de tumores de 91 cães, através de punção aspirativa por agulha fina e punch cirúrgico Os resultados citopatológicos demonstraram uma eficácia de 69,69%, em relação à histopatologia. Para a diferenciação entre tumores neoplásicos e não neoplásicos, a eficiência aumenta, com resultados iguais em 91,91%. Para diferenciar tumores benignos de malignos, foi possível chegar a uma concordância na ordem de 68,13%. Os tumores mais prevalentes foram o mastocitoma, seguido do lipoma, fibrossarcoma e tumor de célula basal.