Resultado da pesquisa (341)
Termo utilizado na pesquisa ovine
#11 - Indirect ELISA as a complementary diagnostic method of bovine tuberculosis
Abstract in English:
Bovine tuberculosis is an economic and health problem, requiring precise diagnostic methods for its control and eradication. The aim of this study was to evaluate the performance of a commercial enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) test for the diagnosis of bovine tuberculosis. A total of 1,644 cattle from eight dairy herds were evaluated using the comparative cervical tuberculin test (CCTT). Three of the herds had no recent tuberculosis infection, and the other five had shown positive results in a previous tuberculin test. For the serological diagnosis of tuberculosis, a commercial ELISA antibody test kit for Mycobacterium bovis was used. Serum samples from 846 cattle from the eight herds were evaluated using ELISA for M. bovis. Animals that were positive based on either CCTT or ELISA for M. bovis or both were sent to slaughter. Samples of their lungs, livers, and lymph nodes were collected and stored under refrigeration for microbiological culture and subsequent confirmation by polymerase chain reaction. Samples from the same tissues were also fixed with 10% formaldehyde in bottles for histopathological examination and stained with hematoxylin and eosin (HE). Of the 1,644 cattle, 61 were considered positive and 65 inconclusive based on CCTT. Retesting of the inconclusive samples identified an additional 19 positive cases, totaling 80 (4.8%) CCTT-positive animals from five herds. ELISA for M. bovis identified 4.2% (36/846) positive cattle, of which 35 were considered negative and one inconclusive based on CCTT. Of the 36 positive cases identified by ELISA for M. bovis, 27 were euthanized, 11% (3/27) showed suggestive lesions of tuberculosis on macroscopic examination, and two were confirmed by histological, microbiological, and PCR methods. The weak association of ELISA for M. bovis with the results obtained by macroscopic, histological, and microbiological isolation indicates the fragility of ELISA performance in field conditions. Therefore, it is suggested that its use as a complementary method for herd sanitation be based on the local epidemiological situation.
Abstract in Portuguese:
A tuberculose bovina é um problema econômico mundial e de saúde, que requer métodos de diagnóstico precisos para controle e erradicação. Objetivou-se com este estudo avaliar o desempenho de um teste comercial de ELISA no diagnóstico da tuberculose bovina. Foram avaliados pelo teste cervical comparativo (TCC) 1644 bovinos, provenientes de oito rebanhos de exploração leiteira, sendo três deles sem histórico recente da doença, e outros cinco com resultados positivos no último exame de tuberculinização. Para o diagnóstico sorológico da tuberculose utilizou-se um kit comercial de ELISA Mycobacterium bovis antibody test (ELISA M. bovis). Amostras de soro sanguíneo de 846 bovinos provenientes dos mesmos rebanhos foram também avaliadas no ELISA M. bovis. Os bovinos positivos no TCC e/ou ELISA M. bovis foram encaminhados para o abate sanitário. Dos positivos no ELISA para M. bovis foi realizado o exame macroscópico das carcaças e classificação das mesmas em: com presença ou ausência de lesões. Amostras de pulmão, fígado, e linfonodos, foram colhidas em duplicata para realização dos exames de cultivo microbiológico com posterior confirmação por PCR, e exame histopatológico com coloração de hematoxilina e eosina (HE). Dos 1,644 bovinos, 61 foram considerados positivos e 65 inconclusivos no TCC. O reteste dos inconclusivos identificou mais 19 positivos. No total, 80 (4,8%) bovinos positivos no TCC, provenientes de 5 rebanhos foram encaminhados para abate. O ELISA para M. bovis identificou 4,2% (36/846) de bovinos positivos, sendo 36 considerados negativos e um inconclusivo no exame de tuberculinização. Dos positivos no ELISA para M. bovis, 27 foram eutanasiados, e no exame macroscópico das carcaças 11% (3/27) dos animais apresentaram lesões sugestivas de tuberculose, e em apenas dois houve confirmação da doença pelos métodos histológico, microbiológico e PCR. A baixa associação dos resultados obtidos no ELISA para M. bovis com os exames macroscópico, histológico e isolamento microbiológico apontam para a fragilidade do desempenho do ELISA para o diagnóstico de tuberculose. Sugere-se assim que seu uso como método complementar para saneamento de rebanhos, seja adotado com cautela e considere a situação epidemiológica local.
#12 - Diagnosis and phylogenetic analysis of bovine viral diarrhea virus in cattle (Bos taurus) and buffaloes (Bubalus bubalis) from the Amazon region and Southeast Brazil
Abstract in English:
Bovine viral diarrhea virus (BVDV) is a highly infectious pathogen that affects bovines worldwide leading to great economic impact. Although Brazil has the largest commercial cattle population throughout the world and an increasing buffalo breeding industry, the country has no control or eradication program for BVDV. In this perspective, the aim of this study was to evaluate the occurrence of BVDV in cattle and buffaloes from two Brazilian states. Four different ELISA tests were performed and confirmed by virus neutralization testing (VNT). The presence of BVDV antibodies in the serum or plasma from 77 cattle from six herds (ELISA-1 and ELISA-4) and from 89 buffaloes from three herds (ELISA-1 through ELISA-4) was detected. Extraction of viral RNA was performed from the serum or plasma samples for the detection of BVDV by RT-PCR analysis. Amplified nucleotide sequences were used to construct a phylogenetic tree. In cattle, ELISA-1 detected 49.4% of seropositive animals, while ELISA-4 detected 37.7%. In buffaloes, ELISA-1 failed to detect any seropositive animals, while ELISA-2 and ELISA-3 detected 20.2% of seropositive animals, and ELISA-4 detected 21.3%. Eight of the nine herds tested had seropositive animals. The rate of PCR positive animals was 6.5% in cattle and 9% in buffaloes. Subtype 1d was found in cattle, and subtypes 1d and 1f were found in buffaloes. This is the first-time subtype 1f has been reported in Brazil. The absence of a control and eradication program seems to be favoring the spread of BVDV in the Brazilian herds. In addition, the improvement of diagnostic strategies for BVDV in buffaloes are required.
Abstract in Portuguese:
Diarreia viral bovina (BVDV) é um patógeno altamente infeccioso que afeta bovinos em todo o mundo elevando o impacto econômico. Apesar de o Brasil possuir a maior população bovina comercial em todo o mundo e uma indústria de criação bubalina em ascendência, o país não tem programa de controle e erradicação para BVDV. Nessa perspectiva, o objetivo deste estudo é avaliar a ocorrência do BVDV em bovinos e bubalinos de dois estados brasileiros. Quatro testes de ELISA foram realizados e confirmados por teste de vírus neutralização (VNT). A presença de anticorpos contra BVDV no soro ou plasma de 77 bovinos de seis rebanhos (ELISA-1 e ELISA-4) e de 89 búfalos de três rebanhos (ELISA-1 ao ELISA-4) foi detectada. Extração de RNA viral foi realizada em amostras de soro ou plasma para detecção de BVDV por análise de RT-PCR. Sequências de nucleotídeos amplificadas foram utilizadas para construção de uma árvore filogenética. Em bovinos, o ELISA-1 detectou 49.4% dos animais soropositivos, enquanto ELISA-4 detectou 37.7%. Em búfalos, o ELISA-1 falhou em detectar animais soropositivos, enquanto o ELISA-2 e o ELISA-3 detectaram 20.2% dos animais soropositivos e o ELISA-4 detectou 21.3%. Oito de nove rebanhos continham animais soropositivos. A frequência de animais PCR positivos foi de 6.5% em bovinos e 9% em búfalos. Os subtipos 1d foi encontrado em bovinos e os subtipos 1d e 1f foram encontrados em búfalos. Este é o primeiro relato da presença do subtipo 1f no Brasil. A ausência de um programa de controle e erradicação parece favorecer a disseminação de BVDV nos rebanhos brasileiros. Além disso, a melhora de estratégias de diagnóstico para BVDV em búfalos é necessária.
#13 - Compressive lesions in the central nervous system of cattle: a retrospective study of 50 cases in the Amazon biome
Abstract in English:
The present study gathered epidemiological and clinical-pathological information about cattle with compressive lesions in the central nervous system (CNS). The retrospective study included observations made in 50 cattle from 1998 to 2021 by reviewing the clinical records of animals with compressive lesions in the CNS treated at the Veterinary Hospital of the Veterinary Medicine Institute of the Federal University of Pará. The animals had clinical signs and were subjected to general and specific clinical examination of the nervous system. Blood samples were collected from 13 animals for complete blood counts, and cerebrospinal fluid (CSF) samples were collected from four animals for physical evaluation. Twenty-nine cattle underwent necropsy. The most affected sites were the T3-L3 (46%, 23/50), C1-C5 (22%, 11/50), C6-T2 (14%, 7/50), sacrococcygeal vertebrae, (4%, 2/50), L4-S2 (2%, 1/50), brain (8%, 4/50) and cerebellum (4%, 2/50). The age of the affected cattle ranged from 20 days to 16 years, with a higher occurrence in animals younger than 12 months (56%, 28/50). More Females were affected (58%, 29/50) than males (42%, 21/50). The clinical signs varied according to the location of the lesion and were mainly represented by ataxia, paresis or paralysis of the limbs, inability to stand and walk, postural changes, hyperesthesia in the extremities, and loss of skin sensitivity at the location of the lesion. The necropsy findings revealed changes such as abscesses in the vertebral body; intervertebral space in the medullary canal, pituitary and cerebellum; granuloma in the arch of the vertebra; fractures of the body of the vertebrae; subarachnoid haematoma; congenital bone alteration causing spinal cord compression; and spondylitis. Detailed anamnesis and clinical examination of the CNS, associated with necropsy findings, were important to determine the cause of the disease, correlate with the clinical picture and locate the affected segments of the CNS in the cattle. It is important to include these diseases in the list of differential diagnoses in cattle with nervous symptoms.
Abstract in Portuguese:
O presente trabalho reúne informações epidemiológicas e clínicopatológicas de bovinos com lesões compressivas no sistema nervoso central (SNC). O estudo retrospectivo compreendeu as observações realizadas em 50 bovinos durante os anos de 1998 a 2021, por meio da revisão dos arquivos de fichas clínicas de animais com lesões compressivas no SNC atendidos pelo Hospital Veterinário do Instituto de Medicina Veterinária da Universidade Federal do Pará. Os animais atendidos com sinais clínicos foram submetidos a exame clínico geral e específico do sistema nervoso. Foram coletadas amostras de sangue de 13 animais para realização de hemograma e amostras de líquido cefalorraquidiano de quatro animais para avaliação física. Foram submetidos à necropsia 29 bovinos. Os locais mais acometidos foram as vértebras T3-L3 (46%, 23/50), C1-C5 (22%, 11/50), C6-T2 (14%, 7/50), sacrococcígea (4%, 2/50) e L4-S2 (2%, 1/50); cérebro (8%, 4/50) e cerebelo (4%, 2/50). A idade dos bovinos afetados variou de 20 dias a 16 anos, com maior ocorrência em animais com menos de 12 meses (56%, 28/50). As fêmeas foram mais acometidas (58%, 29/50) do que os machos (42%, 21/50). Os sinais clínicos variaram de acordo com a localização da lesão e foram representados principalmente por ataxia, paresia ou paralisia dos membros, incapacidade de se levantar e de ficar em estação, alterações posturais, hiperestesia nas extremidades, além de perda da sensibilidade cutânea relacionada com a localização da lesão. Os achados de necropsia revelaram alterações como abscessos no corpo vertebral, no espaço intervertebral, no canal medular, para-hipofisário e no cerebelo; granuloma no arco da vértebra, fraturas do corpo das vértebras; hematoma subaracnoide; alteração óssea congênita causando compressão medular e espondilite. Anamnese detalhada e exame clínico do SNC, associados aos achados de necropsia foram importantes para determinar a causa da doença, correlacionar com o quadro clínico e localizar os segmentos acometidos do SNC dos bovinos. Torna-se importante incluir estas enfermidades na lista de diagnósticos diferenciais em bovinos que apresentem sintomatologia nervosa.
#14 - Pathology of chronic ovine periodontitis
Abstract in English:
Periodontitis is an inflammatory process of infectious origin affecting the teeth and their supporting structures, causing significant economic losses and reducing animal welfare. Bacteria in the gingival biofilm are one of the main factors in initiating inflammatory lesions. Bacteria act directly on tissues or indirectly through substances that cause tissue damage. Studies on the etiopathogenesis of periodontitis in Brazilian sheep herds are scarce. The present study aimed to characterize histologically periodontal lesions of culled sheep from the Brazilian breed, Santa Inês. Periodontal lesions, such as periodontal pockets containing plant tissue and bacteria, replacement of the periodontal ligament by connective tissue and inflammatory cells, superficial pustules, hydropic epithelial degeneration, and epithelium hyperplasia, were observed. Submucosal changes were characterized by granulation tissue, edema, swelling of the endothelial cells, bacteria, and predominantly perivascular lymphoplasmacytic inflammatory infiltrate. In the alveolar bone, osteoclastic resorption and bone apposition were observed. This study revealed subacute to chronic inflammation, alveolar bone resorption, and cortical bone apposition in ovine periodontitis. Thus, these findings can contribute to the evolution of knowledge about the etiopathogenesis of ovine periodontitis and, possibly, the development of measures to control the disease.
Abstract in Portuguese:
A periodontite é um processo inflamatório de origem infecciosa que afeta os dentes e suas estruturas de suporte, causando perdas econômicas significativas e redução do bem-estar animal. As bactérias do biofilme gengival são um dos principais fatores envolvidos no início das lesões inflamatórias. As bactérias agem diretamente nos tecidos ou indiretamente por meio de substâncias que causam dano tecidual. Estudos sobre a etiopatogenia da periodontite em rebanhos ovinos brasileiros são escassos. O presente estudo teve como objetivo caracterizar histologicamente as lesões periodontais de ovinos de descarte da raça brasileira Santa Inês. Foram observadas lesões periodontais, como bolsas periodontais contendo tecido vegetal e bactérias, substituição do ligamento periodontal por tecido conjuntivo e células inflamatórias, pústulas superficiais, degeneração hidrópica epitelial e hiperplasia do epitélio. As alterações da submucosa foram caracterizadas por tecido de granulação, edema, tumefação das células endoteliais, bactérias e infiltrado inflamatório linfoplasmocitário predominantemente perivascular. No osso alveolar, observou-se reabsorção osteoclástica e aposição óssea. Este estudo revelou inflamação subaguda a crônica, reabsorção óssea alveolar e aposição de osso cortical na periodontite ovina. Assim, esses achados podem contribuir para a evolução do conhecimento sobre a etiopatogenia da periodontite ovina e para o desenvolvimento de medidas de controle da doença.
#15 - Metabolic imbalances, hoof injuries, and metabolic profile of high-producing Holstein × Gir cows showing lameness
Abstract in English:
This study attempted to determine the associations between metabolic imbalances and lameness or hoof injuries in high-producing Holstein × Gir cows, and to determine whether the metabolic profile affects the occurrence of lameness. Eighty cows were followed from -60 to 60 days relative to calving and hoof injuries were reported on days -60, 7 and 60. Locomotion score (LS), body condition score (BCS), the concentrations of non-esterified fatty acids, β-hydroxybutyrate, glucose, cholesterol, albumin, total protein, blood urea nitrogen (BUN), calcium, phosphorus, and magnesium, and the activity of aspartate aminotransferase were determined at days -42, -21, -7, 0, 7, 21 and 42. The McNemar and Chi-square tests were used to compare frequencies of lameness and hoof injuries over time and to verify the associations between lameness, BCS, hoof injuries, and metabolic disorders. Two-way repeated measures ANOVA was used considering groups (non-lame × lame cows) and variations of BCS and metabolites over time. Lameness and hoof injuries increased between days -60 (20% and 66.3%) and 60 (44.7% and 98.6%). Excessive postpartum loss of BCS (P=0.017) and subclinical hypocalcemia (P=0.012) were associated with lameness on day 60. In general, the metabolic profile did not differ between lame and non-lame cows but cholesterol, albumin, BUN and magnesium concentrations were higher in non-lame cows. The postpartum decrease in BCS can affect the occurrence of lameness, and the metabolic profile of lame cows shows little difference from that of non-lame cows.
Abstract in Portuguese:
Este estudo objetivou verificar as associações entre desequilíbrios metabólicos e claudicação ou lesões nos cascos em vacas mestiças Holandesa × Gir de alta produção e determinar se o perfil metabólico afeta a ocorrência de claudicação. Oitenta vacas foram acompanhadas de -60 a 60 dias em relação ao parto e as lesões nos cascos foram avaliadas nos dias -60, 7 e 60. O escore de locomoção (EL), o escore de condição corporal (ECC), as concentrações de ácidos graxos não esterificados, β-hidroxibutirato, glicose, colesterol, albumina, proteína total, nitrogênio ureico no sangue (BUN), cálcio, fósforo e magnésio e a atividade da aspartato aminotransferase foram determinados nos dias -42, -21, -7, 0, 7, 21 e 42. Os testes de McNemar e de Qui-quadrado foram empregados para comparar as frequências de claudicação e de lesões nos cascos ao longo do tempo e para verificar as associações entre claudicação, ECC, lesões nos cascos e distúrbios metabólicos. A análise de variâncias de medidas repetidas bifatorial foi usada considerando-se grupos (vacas com claudicação × vacas sem claudicação) e variações de BCS e de metabólitos ao longo do tempo. A claudicação e as lesões nos cascos aumentaram entre os dias -60 (20% e 66,3%) e 60 (44,7% e 98,6%). A perda excessiva de ECC no pós-parto (P=0,017) e a hipocalcemia subclínica ao parto (P=0,012) foram associadas com claudicação no dia 60. Em geral, o perfil metabólico não diferiu entre vacas com e sem claudicação, mas as concentrações de colesterol, albumina, BUN e magnésio foram maiores em vacas sem claudicação. A redução do ECC no periodo pós-parto pode afetar a ocorrência de claudicação, e o perfil metabólico das vacas claudicantes apresenta pouca diferença em relação ao das vacas não claudicantes.
#16 - Efficacy of antimicrobial therapy in association with vaccination on the bacteriological cure of subclinical mastitis caused by Staphylococcus aureus in lactating cows
Abstract in English:
The objective of this study was to evaluate the efficacy of the antibiotic therapy associated with vaccination on the microbiological cure rate of subclinical mastitis caused by Staphylococcus aureus in lactating dairy cows. A total of five herds, from which 72 cows (120 mammary quarters - MQ) were diagnosed with S. aureus subclinical mastitis, were included in this study. Cows were randomly allocated to one of three treatment groups: a) Control (no treatment); b) ATB (antibiotic therapy); and c) ATB+VAC (antibiotic therapy plus vaccination against S. aureus). Intramammary treatment consisted of twice-daily infusion of ampicillin 75mg + cloxacillin 200mg, for 5 days. Parenteral treatment was done by injection of a single dose (7.5mg/kg) of enrofloxacin, on the first day of the treatment protocol. Vaccinated cows received three doses of a commercial vaccine 14 days before treatment (d-14), on the first day of treatment protocol (d1), and 14 days after the treatment protocol (d+14). Non-treated cows had a lower cure rate (0.06) than cows treated with ATB (0.84) and ATB+VAC (0.85). No difference in cure rate was observed between cows treated with ATB and ATB+VAC. On the other hand, vaccinated cows had lower somatic cell count (SCC) after 28 days of the treatment protocols (4.76 log10) than non-treated cows (5.37 log10). In conclusion, treatment with intramammary ampicillin and cloxacillin, associated with intramuscular enrofloxacin presented a high cure rate for SCM caused by S. aureus during lactation. The use of vaccination against S. aureus in association with antibiotic therapy did not increase the cure rate of MQ during lactation, but it was effective in reducing the SCC when compared to non-treated MQ. Although to ensure that the decrease of the SCC in ATB+VAC group was associated with the vaccination, the study should have included an additional group of only vaccinated cows, without antimicrobial therapy, with was not done in the present study, and therefore is one of the limitations of the experimental protocol used.
Abstract in Portuguese:
O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da antibioticoterapia associada à vacinação sobre a taxa de cura microbiológica de mastite subclínica causada por Staphylococcus aureus em vacas leiteiras em lactação. Foram selecionados 5 rebanhos, dos quais 72 vacas (120 quartos mamários, QM) foram diagnosticadas com mastite subclínica por S. aureus e foram alocadas aleatoriamente em um de três grupos de tratamento: a) Controle (sem tratamento); b) ATB (antibioticoterapia); e c) ATB+VAC (antibioticoterapia mais vacinação contra S. aureus). O tratamento intramamário consistiu em infusão de ampicilina 75 mg + cloxacilina 200 mg duas vezes ao dia, durante 5 dias. O tratamento parenteral foi feito por injeção de uma dose única (7,5 mg/kg) de enrofloxacina, no primeiro dia do protocolo de tratamento. As vacas vacinadas receberam três doses de uma vacina comercial, 14 dias antes do tratamento (d-14), no primeiro dia do protocolo de tratamento (d1) e 14 dias após o protocolo de tratamento (d+14). A taxa de cura das vacas não tratadas foi menor (0,06) do que das vacas tratadas com ATB (0,84) e ATB+VAC (0,85). Não foi observada diferença de taxa de cura entre vacas tratadas com ATB e ATB+VAC. Por outro lado, as vacas vacinadas apresentaram menor a contagem de células somáticas (CCS) após 28 dias de tratamento (4,76 log10) do que em vacas não tratadas (5,37 log10). Em conclusão, o tratamento com ampicilina e cloxacilina intramamária, associados à enrofloxacina intramuscular, apresentou alta taxa de cura para MSC causada por S. aureus durante a lactação. A utilização da vacinação contra S. aureus associada à antibioticoterapia não aumentou a taxa de cura dos QM durante a lactação, mas foi eficaz na redução do CCS quando comparada à QM não tratados. Entretanto, para ter certeza que a diminuição da CCS no grupo ATB+VAC estivesse associada à vacinação, o estudo deveria ter incluído um grupo adicional de apenas vacas vacinadas, sem terapia antimicrobiana, o que não foi feito no presente estudo e, portanto, é um das limitações do protocolo experimental utilizado.
#17 - Bovine tuberculosis in safari park in Brazil
Abstract in English:
Bovine tuberculosis (bTB) is an infectious disease caused by Mycobacterium bovis, affecting domestic animals, wild animals and humans. In captivity, for wild animals, bTB represents a risk to animal keepers and zoo visitors, in addition to the possibility of spreading the infection to domestic animals or through the trade of infected wild animals. Sambar (Cervus unicolor), red deer (Cervus elaphus) and fallow deer (Dama dama) from a safari park in the State of Rio Grande do Sul, Brazil, showed a clinical condition of dyspnea and weight loss. Some animals died and showed lesions suggestive of tuberculosis (LST), which were confirmed by histopathology. After the interdiction of the safari park by the state veterinary authorities, 281 deer were euthanized with the authorization of the “Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis” (IBAMA). Retropharyngeal and submandibular lymph nodes and viscera were collected from 21 animals, which were grown in Stonebrink medium for up to 90 days. After DNA extraction from the bacterial colonies, PCR was performed for targets flanking the region of differentiation 4 (RD4). Of the 21 samples, 14 (66.7%) presented LST with a granulomatous appearance, a whitish coloration, and caseous or calcified consistency, and seven samples (33.3%), showed no lesions. In the culture of 14 samples with LST, 13 (92.8%) presented bacterial growth compatible with M. bovis. In the cultivation of the seven samples without LST, four (57.1%) presented colonies compatible with M. bovis. PCR and DNA sequencing of the PCR amplicons detected as positive all the 17 (100%) bacteriological cultures suggestive of M. bovis, thus confirming the outbreak of bTB in deer. Decisions about positive tested and suspicious animals should be taken based on the evaluation of the risk of transmission to the rest of the zoological animals, animal welfare, conservation considerations and, the zoonotic potential of this pathogen.
Abstract in Portuguese:
A tuberculose bovina (bTB) é uma doença infecciosa causada por Mycobacterium bovis, afetando animais domésticos, animais selvagens e humanos. Para animais selvagens em cativeiro, a bTB representa um risco para os tratadores de animais e visitantes do zoológico, além da possibilidade de espalhar a infecção para animais domésticos ou por meio do comércio de animais silvestres infectados. Cervídeos sambar (Cervus unicolor), veado-vermelho (Cervus elaphus) e gamo (Dama dama) de um parque safári no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil, mostraram uma condição clínica de dispneia e perda de peso. Alguns animais morreram e apresentaram lesões sugestivas de tuberculose (LST), as quais foram confirmadas por histopatologia. Após a interdição do parque safári pelas autoridades veterinárias estaduais, 281 veados sofreram eutanásia com a autorização do Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis (IBAMA). Os linfonodos retrofaríngeos e submandibulares e vísceras foram coletados de 21 animais, que foram cultivados em meio Stonebrink por até 90 dias. Após extração de DNA das colônias bacterianas, foi realizada PCR para alvos que flanqueavam a região de diferenciação 4 (RD4). Das 21 amostras, 14 (66,7%) apresentaram LST com aspecto granulomatoso, coloração esbranquiçada e consistência caseosa ou calcificada, e sete amostras (33,3%) não apresentaram lesões. Na cultura de 14 amostras com LST, 13 (92,8%) apresentaram crescimento bacteriano compatível com M. bovis. No cultivo das sete amostras sem LST, quatro (57,1%) apresentaram colônias compatíveis com M. bovis. A PCR e o sequenciamento de DNA dos fragmentos de PCR detectaram como positivo todas as 17 (100%) culturas bacteriológicas sugestivas de M. bovis, confirmando assim o surto de bTB em cervídeos. As decisões sobre animais positivos testados e suspeitos devem ser tomadas com base na avaliação do risco de transmissão para o restante dos animais zoológicos, bem-estar animal, considerações de conservação e no potencial zoonótico desse patógeno.
#18 - Prevalence of bovines persistently infected with bovine viral diarrhea virus (BVDV) in dairy cattle herds in Paraná State, Brazil
Abstract in English:
This study aimed to establish the prevalence of animals persistently infected (PI) with bovine viral diarrhea virus (BVDV) in dairy farms at Parana State, Brazil. Samples were collected from 6,465 female Holstein Friesian Dairy Cattle, including animals less than two years old, females over two years old who had not given birth at the farm, and mothers of calves diagnosed as persistently infected. The cattle came from 40 dairy herds distributed in 10 municipalities in the State of Paraná. The samples were obtained from May 2015 to August 2018. The diagnosis of PI animals was made with an antigen-capture ELISA test. We detected PI animals in fifteen herds sampled (37.5%), ranging from one to sixteen animals per herd. The prevalence in Parana State’s municipalities was 1.78%, ranging from 0.3 to 8.9% at positive herds. The analysis of the individual herds shows significant dissemination of the BVDV in Parana’s municipalities, including endemic areas. With this, we highlight the need for measures to raise awareness among producers about the existence and importance of bovine viral diarrhea (BVD) in dairy herds, reinforcing the PI animals’ role in disease epidemiology and the economic impact caused by the maintenance of these farm animals.
Abstract in Portuguese:
Com o intuito de se estabelecer a prevalência de animais persistentemente infectados (PI) com o BVDV em propriedades leiteiras no estado do Paraná. Foram coletadas amostras de 6.465 bovinos, fêmeas, da raça Holandês Preto e Branco (HPB). Amostraram-se animais com idade inferior a dois anos, fêmeas com mais de dois anos que não haviam tido partos na propriedade, e mães de bezerros que foram diagnosticados como persistentemente infectados. Os bovinos foram provenientes de 40 rebanhos leiteiros, distribuídos em 10 municípios no Estado do Paraná. A coleta deu-se no período de maio de 2015 a agosto de 2018. O diagnóstico dos animais PI foi feito por meio do teste de ELISA de captura de antígeno. Animais PI foram detectados em quinze rebanhos amostrais (37,5%), oscilando entre um e dezesseis animais por rebanho. A prevalência nos municípios do estado Paraná foi de 1,78%, oscilando entre 0,3 a 8,9% nos rebanhos positivos. Com a alta prevalência de animais PI observada, quando analisados os rebanhos amostrais individualmente, é possível afirmar que há uma disseminação importante do BVDV em municípios paranaenses, destacando inclusive áreas endêmicas. Com isso, vê-se a necessidade de medidas de conscientização dos produtores sobre a existência e importância da BVD nos rebanhos, destacando o papel dos animais PI na epidemiologia da doença, bem como o impacto econômico causado pela manutenção desses animais nos rebanhos.
#19 - Expression of icaA and icaD genes in biofilm formation in Staphylococcus aureus isolates from bovine subclinical mastitis
Abstract in English:
Staphylococcus spp. plays a significant role in the etiology of bovine mastitis. Staphylococcus aureus is considered the most important species due to the high prevalence and the difficulty of in vivo treatment that is related to the expression of virulence factors and biofilm formation. This study aimed to detect the phenotypic expression of the biofilm formation in 20 S. aureus isolated from bovine mastitis and to evaluate the expression and regulation of genes involved in its production. MALDI-TOF and phenogenotypic identification assays were performed to characterize the isolates. The phenotypic biofilm production and the presence of icaA and icaD and bap genes were evaluated. The Agr system was typified (agr I, agr II, agr III and agr IV) and its regulator (agr RNAIII) was detected. Furtherly, Real-time PCR (qPCR) was performed at chosen times to quantify the expression of icaA, icaD and hld genes in three selected isolates. All 20 strains were biofilm producers and most presented icaA and icaD genes. Only one isolate presented the bap gene. The agr gene type II showed a prevalence of 70%. Transcriptional analysis revealed increased expression of ica genes at eight hours of growth. These results confirm that polysaccharides production mediated by the icaADBC operon genes is an essential mechanism to the biofilm formation and contributes to the early stages of bacterial growth.
Abstract in Portuguese:
Staphylococcus spp. desempenham um papel significativo na etiologia da mastite bovina. Staphylococcus aureus é considerada a espécie mais importante devido a alta prevalência e a dificuldade de tratamento in vivo que está relacionado à expressão dos fatores de virulência e formação de biofilme. Este estudo teve como objetivo detectar a expressão fenotípica da formação de biofilme em 20 cepas de S. aureus isoladas de mastite bovina e avaliar a expressão e regulação de genes envolvidos em sua produção. MALDI-TOF e ensaios de identificação fenogenotípica foram realizados para caracterizar os isolados. A produção fenotípica de biofilme e a presença dos genes icaA, icaD e bap foram avaliadas. O sistema Agr foi tipificado (agr I, agr II, agr III e agr IV) e seu regulador (agr RNAIII) foi detectado. Além disso, a PCR em tempo real (qPCR) foi realizada nos tempos determinados para quantificar a expressão dos genes icaA, icaD e hld em três isolados selecionados. Todas as 20 linhagens foram produtoras de biofilme e a maioria apresentava os genes icaA e icaD. Apenas um isolado apresentou o gene bap. O gene agr do tipo II mostrou uma prevalência de 70%. A análise transcricional revelou aumento da expressão de genes ica às oito horas de crescimento. Estes resultados confirmam que a produção de polissacarídeos mediada pelos genes do operon icaADBC é um mecanismo essencial para a formação do biofilme e contribui para os estágios iniciais do crescimento bacteriano.
#20 - Effects of lumbar myelography on subarachnoid pressure and cardiorespiratory parameters in healthy sheep
Abstract in English:
The purpose of this study was to evaluate the effects of lumbar myelography on subarachnoid pressure, cardiorespiratory parameters and pressure-volume index in sheep. Eight sheep were evaluated. The animals were submitted to puncture of the cisterna magna for monitoring of subarachnoid pressure (SaP). Lumbar myelography was performed through applying Iohexol (0.4mL/kg). ToC, PAS, PAD, MAP, InspISO, FeISO, SaP and CPP were recorded immediately after anesthetic stabilization (M0), during lumbar puncture (M1), and two, four and six minutes after contrast application (M2, M3 and M4, respectively). Blood pressure initially increased, then decreased, returning to basal level, similarly observed for InspISo and FeISo. The SaP rose initially thereafter remaining stable. Despite of the effect on subarachnoid pressure, lumbar myelography can be considered safe in sheep.
Abstract in Portuguese:
O objetivo foi avaliar os efeitos da mielografia lombar na pressão subaracnóidea, parâmetros cardiorrespiratórios e índice pressão-volume em ovinos. Oito ovelhas foram avaliadas. Os animais foram submetidos à punção da cisterna magna para monitoramento da pressão subaracnoidea (SaP). A mielografia lombar foi realizada com a aplicação de Iohexol (0,4mL/kg). Os momentos estudados foram: imediatamente após a estabilização anestésica (M0), durante a punção lombar (M1), dois, quatro e seis minutos após a aplicação do contraste (M2, M3 e M4, respectivamente), para avaliar as seguintes variáveis: ToC, PAS, PAD, MAP, InspISO, FeISO, Sap e CPP. A pressão arterial aumentou inicialmente, depois diminuiu, retornando aos valores iniciais, padrão também observado para o InspISo e o FeISo. O SaP subiu inicialmente, posteriormente, permanecendo estável. A mielografia lombar, apesar de influenciar a pressão subaracnoidea, pode ser considerada segura em ovinos.
